A károsodott kobalamin funkció biokémiai jelei befolyásolják a hematológiai jeleket

• alanyok
• absztrakt
• Háttér:
• Mód:
• Eredmények:
• Következtetés:
• Fő
• Eredmények
• Demográfiai adatok és táplálkozás
• Csecsemő kobalamin és folát állapota
• Hematológiai paraméterek csecsemőknél
• vita
• Következtetés
• Mód
• Tanulmányi populáció és tervezés
• Vérvétel és biokémiai elemzés
• Statisztikai analízis
• Nyilatkozat a pénzügyi támogatásról
• Közzététel

alanyok

absztrakt

Háttér:

Míg a csecsemők vérszegénységének leggyakoribb oka a vashiány, addig a kobalaminhiányt elsősorban a fejlődés késleltetése jellemzi, a tipikus makrocita vérszegénység ebben a korcsoportban súlyos és tartós kobalaminhiányra korlátozódik. A hematológiai paramétereket 4 hónapos csecsemőknél értékelték kobalamin-funkció károsodásának biokémiai bizonyítékaival, akik 6 héten belül részt vettek egy randomizált, kontrollált kobalamin-intervenciós vizsgálatban.

Mód:

Százkilencvenhét csecsemőt választottak véletlenszerűen, hogy vagy 400 µl intramuszkuláris injekciót kapjanak. g kobalamin vagy 6 hét után nem kapott beavatkozást. A hematológiai paramétereket, valamint a kobalamin- és folátállapotot a felvételkor és 4 hónapon belül meghatároztuk.

Eredmények:

A kobalamin-kiegészítés javította a károsodott kobalamin-funkció minden markerét, de a 4. hónapban nem volt hatással a hematológiai sejtszámra (P> 0,18). A vashiányos eritropoézis jeleit 6 hét és 4 hónap múlva észlelték. Az alacsony vasállapot legerősebb előrejelzői a 4 hónapos férfiak voltak, és a születésüktől számított magas százalékos súlygyarapodás.

Következtetés:

Azoknál a csecsemőknél, akiknél a kobalamin-funkció károsodott biokémiai jelei vannak, a pótlás nem javítja a hematológiai sejtszámot. Úgy tűnik, hogy a vörösvértestek paramétereinek eltérései elsősorban ebben a korcsoportban a vas állapotával vannak összefüggésben.

A csecsemőkorszak gyors növekedés, több mikroelem iránti megnövekedett igény és a tápanyaghiány későbbi kockázatával jellemezhető időszak (1). A vas- és a kobalaminhiány egyaránt megtalálható túlnyomórészt szoptatott csecsemőknél (1, 2). Míg a vashiány a csecsemők vérszegénységének leggyakoribb oka (3), a kobalaminhiányt elsősorban a fejlődés késése jellemzi ebben a korcsoportban (2, 4). A marginális kobalaminhiányos csecsemőkről normális hematológiai értékekről számoltak be (5, 6), a pancytopenia és a macrocytás anaemia főként súlyos és tartós kobalaminhiányban figyelhető meg (2).

A csecsemők táplálkozásának értékelése nehéz lehet az élet első hónapjaiban bekövetkezett kiterjedt fiziológiai változások miatt, ami megnehezíti a közös laboratóriumi paraméterek értelmezését (2, 7). A szérum kobalamin az első hetekben jelentősen csökken és az első 6 hónapban alacsony marad, míg a szérum folát mennyisége az első életévben magas és magas marad (8 Ezeket a változásokat a homocisztein (tHcy) és a metilmalonsav metabolikus markereinek növekedése kíséri (8). A kobalamin-kiegészítés megváltoztatja a károsodott kobalamin-státusz összes jelzőjét a kobalaminban gazdag idősebb gyermekek és felnőttek profiljához képest, ami arra utal, hogy az elsősorban szoptatott csecsemők nagy részében jelentett magas THC- és metilmalonsav-szint nem tükrözi az éretlen anyagcserét. de meglehetősen kevés kobalamin-kobalamin-függő reakció marad fenn teljesen (9).

A hemoglobin szintézisének és az eritrociták termelésének sebessége a születés utáni első napokban drámai módon csökken, és az élet második hetében eléri a minimumot. Az elnyomott eritropoézis és a magzati eritrociták lerövidült élettartama (60–70 nap) miatt a hemoglobinszint (Hb) és az eritrocita szám a születés után éri el a legalacsonyabb értéket

2 hónappal a születés után (10, 11). Az eritrociták mérete, amelyet az átlagos sejttérfogat (MCV) határoz meg, csökken és legkisebb a 6. hónapban, ezt követően fokozatosan növekszik (10). Míg a normál vörösvértest-paraméterek, például a Hb-szint és az MCV, tükrözik az eritrocita-populáció átlagértékeit, átlagos élettartama 120 nap, a retikulocita-hemoglobin-tartalom (CHr) valós idejű értékelést nyújt az eritropoézisről az előző 24–48 évben (12). Ez az előny teszi a CHr-t gyors fiziológiai változások idején hasznosnak, és felvetették, hogy a CHr a csecsemők vashiányának legjobb előrejelzője, és felülmúlja a hagyományos vas-paramétereket, mint például a szérum ferritin és a transzferrin telítettségét (7).

Korábban egy randomizált, kontrollált kobalamin-intervenciós vizsgálatot végeztünk főleg 6 hetes szoptatott csecsemőkkel, a kobalamin-funkció károsodásának biokémiai bizonyítékaival (9). Ebben a cikkben beszámolunk a kobalamin-kiegészítés hatásáról a hematológiai paraméterekre 4 hónapos csecsemőknél. A tanulmány célja annak megvizsgálása volt, hogy a metabolikus profil, amely a kobalamin funkció károsodását jelzi, összefügg-e a hematológiai sejtvonal termelésével az élet első hónapjaiban.

Eredmények

Demográfiai adatok és táplálkozás

A vizsgálati csoport 107 egészséges, 6 hetes csecsemőt, 56 fiút (52%) tartalmazott, akik születésükkor születtek (átlagos terhességi életkor 39, 9 (SD 1, 3) hét) és koruknak megfelelő súlyúak (átlagos terhességi életkor) 3, 578). SD 506) g). A csecsemő és az anya demográfiai adatai alapján a felvételkor és az utánkövetéskor nem voltak szignifikáns különbségek a kobalamin és a kontroll csoport között (P> 0,05), és az egész csoportra vonatkozó adatok Az 1. táblázat felsorolva . Két különböző típusú tápszert használtak, mindkettőt vaszal (0,7–0,8 mg/100 ml elkészített tápszer) és kobalaminnal (0,13–0,2 μg/100 ml elkészített tápszer) dúsítva. Különböző típusú zabkását használtak, amelyek mindegyike vasat dúsított (4, 8-11, 1 mg/100 mg por). Egyik gyermek sem kapott vaspótlást.

Az átlagos százalékos súlygyarapodás a születéstől számítva 39% (SD 14%) volt a 6. héten, és 95% (SD 26%) a 4. héten. A Spearman-korreláció korrelálta a százalékos súlygyarapodást a 6. héten (r = –0, 44, P 0, 06).

Az átlagos anyai életkor 31,5 (SD 4,8) év volt, és a 104 anyából 63 volt többpáros, átlagosan 1,4 (tartományban, 1-4) korai gyermekkel. 104 anyából 38 beszámolt arról, hogy a terhesség alatt rövidebb vagy hosszabb ideig napi vas-kiegészítőket szedett. Az anyák közül kettő vegetáriánus volt, a többiek mindenevő étrendről számoltak be, bár kilenc anya szerint ritkán vagy soha nem evett húst (n = 6) vagy halat (n = 3).

A csecsemő kobalamin és folát állapota

A kobalamin és a folsav állapotának részletes leírását közzétették (9). Az átlagos szérum kobalaminszint 6 hét után 170 (134–255) pmol/l, az átlagos plazma tHcy pedig 7,59 (6, 21–9, 28) μmol/l volt; A kobalamin és a kontroll csoport között nem figyeltek meg jelentős különbségeket a vitamin- és metabolitszintekben. Négy hónap elteltével a kobalamincsoport 75% -kal magasabb átlagos szérum kobalaminszinttel rendelkezett, mint a kontroll csoport, és átlagos tHcy szintjük 39% -kal csökkent, de változatlan maradt a kontrollokban, ami a kobalaminra adott metabolikus válaszra utal A kiegészítés jelzi.

Hematológiai paraméterek csecsemőknél

Dózis-hatás összefüggés a születéstől 4 hónapig tartó százalékos súlygyarapodás között ( a ) a retikulocita hemoglobin (CHr) és ( ) az átlagos sejttérfogat (MCV) 4 hónapnál általánosított additív modellekkel. A dózis-válasz görbéket folytonos vonalakként, 95% -os konfidencia intervallummal mutatjuk be, mint szaggatott vonalakat.

• Töltse le a PowerPoint diát

6 hét elteltével a retikulocitózis fordítva fordult elő a Hb-szinttel (r = -0,62, P0,06).

Dózis-hatás viszony ( a ) Hemoglobinszint (Hb), ( ) átlagos sejttérfogat (MCV) és ( c ) Retikulocita hemoglobin tartalom (CHr) 6 hét retikulocita szám esetén általános adalék modellek szerint. A dózis-válasz görbéket folytonos vonalakként, 95% -os konfidencia intervallummal mutatjuk be, mint szaggatott vonalakat.

• Töltse le a PowerPoint diát

vita

A túlnyomórészt szoptatott, biokémiai profilú csecsemőknél, amely a kobalamin működésének károsodására utal, a kobalamin-kiegészítés 6 hét után erőteljesen befolyásolta a kobalamin-státusz metabolikus markereit (9), a hematológiai paramétereket azonban nem befolyásolta. 4 hónap. A szülés utáni súlygyarapodás magas aránya és a férfi nem volt a fő meghatározó tényező a hematológiai paraméterekben, és alacsonyabb vasállapothoz kapcsolódtak. A retikulocitózis alacsony MCV-értékkel és CHr-értékkel járt mind a 6. hétben, mind a 4. hónapban, ami azt jelzi, hogy főként szoptatott csecsemőknél az élet első néhány hónapjában a vas által korlátozott eritropoézis volt jelen.

A vizsgálat formai korlátai között szerepelt a kutatók és az anyák elvakításának hiánya a kobalamin-injekciótól és a placebo-injekció hiánya a kontrollcsoportban. Ezeket a tényezőket azonban nem tartjuk fontosnak a 4 hónapos csecsemők hematológiai eredménye szempontjából.

Mikrobiológiai teszteket használtak mind a szérum folát, mind a kobalamin meghatározására. Az elmúlt években a versenyképes kötési lumineszcencia tesztek egyre népszerűbbek, de a mikrobiológiai tesztet továbbra is a szérum-folát arany standardjának tekintik (13). Míg a mikrobiológiai teszt meghatározza a biológiailag aktív kobalamint, a kompetitív kötési lumineszcencia tesztek funkcionálisan inaktív kobalamin analógokat is tartalmaznak. A legújabb tanulmányok azt sugallják, hogy a kompetitív kötési lumineszcencia tesztek széles körű diszfunkciót mutathatnak ki, különösen akkor, ha hamis-normális értékeket jelentenek a kobalamin-hiányra vonatkozóan.

Ezekben a fiatal csecsemőkben a retikulocitaszám fordítottan korrelált a Hb-szinttel, és összefüggésbe hozható a vas által korlátozott eritropoezis alacsony MCV- és CHr-mutatóival (26). Szemben a felnőttekkel, akiknél a vashiány miatti alacsony Hb-szint általában normális vagy csökkent vörösvértestszámmal jár (27), magas vörösvértest-számot figyeltek meg a 6–48 hónapos csecsemőknél vashiányos vérszegénységben (28). Az ebben a korcsoportban megfigyelt retikulocitózis kifejezettebb volt enyhe vagy súlyos vérszegénységben, ami annak a ténynek köszönhető, hogy súlyos vashiány társul a dyserythropoiesishez, ami csökkentheti a túlélő eritrociták számát (28).

Következtetés

Azoknál a csecsemőknél, akiknél a kobalamin-funkció károsodott biokémiai bizonyítékokkal rendelkezik, a kobalamin-kiegészítés 6 hét után markánsan befolyásolta a kobalamin-státusz intracelluláris metabolikus markereit, de 4 hónap elteltével nem volt hatással a hematológiai paraméterekre. Ezekben az elsődlegesen szoptatott csecsemőknél a magas hízás és a férfi nem volt a fő meghatározó tényező a hematológiai paraméterekben, és 4 hónapos korban alacsonyabb vasállapothoz kapcsolódtak. A mikrotápanyagok állapotának további vizsgálata indokolt fiatal, főleg szoptatott csecsemőknél.

Mód

Tanulmányi populáció és tervezés

2004 decembere és 2006 áprilisa között 107 egészséges, 6 hetes csecsemőt, köztük három ikerpárt és 104 édesanyjukat vett fel a norvégiai Bergenben működő helyi egészségügyi szolgálat, és beiratkoztak egy kobalamin-intervenciós vizsgálatba. A vizsgálati módszerek és eredmények részletes leírását közzétették (9). A hematológiai adatok a 6. héten 107 csecsemőről, a 4. hónapban pedig 102 csecsemőről álltak rendelkezésre, és ezeket a gyermekeket belefoglalták ebbe az elemzésbe.

A csecsemők és az anyák táplálkozásáról, a vitamin-kiegészítésről, a növekedési paraméterekről, a paritásról és az anyai dohányfogyasztásról szóló kérdőív 6 hét és 4 hónap elteltével készült el. Mivel az összes alkalmazott tápszer és zabkása vasat tartalmazott, az anyatej-helyettesítő tápszereket kizárólag szoptatottnak és nem kizárólag szoptatottnak határozták meg, amely magában foglalta a kombinált szoptatást és tápszertáplálást, egyedül a tápszert és a szilárd ételeket is.

A csecsemőket 400 µl intramuszkuláris injekcióra randomizáltuk. g hidroxi-kobalamin (B12-vitamin-raktár; Nycomed Pharma, Asker, Norvégia) (n = 54, kobalamin-csoport) vagy kezelés nélküli (n = 53, kontrollcsoport). A vérvételért és -elemzésért felelős laboratóriumi alkalmazottak vakok voltak a csoportos kijelölésre.

A protokoll etikai jóváhagyását az orvosi kutatásetikai regionális bizottság adta, az anyák pedig tájékozott beleegyezésüket adták. Ezt a tanulmányt a ClinicalTrials.gov cégnél regisztrálták az NCT00479479 számon.

Vérvétel és biokémiai elemzés

Vérmintákat vettünk 6. héten és 4. hónapon antecubitalis venipunktúrával, majd EDTA vakutainer csövekbe gyűjtöttük őket (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ). A hematológiai paramétereket (Hb, MCV, vörösvértestek, a vörösvértestek, CHr, leukociták és vérlemezkék eloszlási szélessége) 4 órán belül elemeztük egy automatizált hematológiai analizátorral (ADVIA 120; Bayer Diagnostics, Tarrytown, NY). A retikulocita-indexek (retikulociták és CHr) rendelkezésre álltak a vizsgálati csoport egy alcsoportja számára (n = 62 6 hét alatt 107-től, n = 72 102 hónaptól 4 hónapig és n = 58 6 hét és 4 hónap alatt 102 páros adatból). .

Az EDTA plazma előállításához használt vérmintákat jeges vízbe helyeztük, és a plazmát 4 órán belül elválasztottuk. A tHcy és a metilmalonsav plazmaszintjét gázkromatográfia-tömegspektrometriás módszerrel vizsgáltuk, amely a metil-klór-formiát derivatizálásán alapult (29). A szérumot úgy kapták meg, hogy vért vákuum-csövekbe vettek adalékanyag nélkül (Becton Dickinson). A szérum kobalamint mikrobiológiai Lactobacillus leichmannii vizsgálattal (30), a szérum folátot mikrobiológiai Lactobacillus casei teszttel (31) határoztuk meg.

Statisztikai analízis

Az eredményeket a medián és interkvartilis tartomány, valamint az átlag és az SD között mutatjuk be. A mediánokat összehasonlítottuk a Wilcoxon Signed Rank teszttel és a Mann-Whitney U teszttel, az átlagértékeket pedig a Student T teszttel. A kategorikus változók közötti különbségeket a 2. teszt segítségével teszteltük.

A Spearman-korrelációt alkalmazták a százalékos súlygyarapodás és a születési súly közötti kapcsolat, valamint a hematológiai paraméterek közötti kapcsolat értékelésére a 6. és 4. hónapban. Számos lineáris regressziós modellt alkalmaztak a gyermek hematológiai paramétereinek (Hb, MCV és CHr) 4 hónapos összefüggésének értékelésére kobalaminintervencióval, nemmel, születéstől 4 hónapig tartó súlygyarapodással, csecsemőtáplálkozással és az anya 6 hét és 4 hónap közötti vaskiegészítők használatával. Hónapok

A Hb-szint, az MCV és a CHr dózis-válasz összefüggéseit 6 hetes retikulocita szám mellett, valamint a CHr és MCV 4 hónapos súlygyarapodásának százalékos arányát ábrázolták általánosított additív modellek.

Az általánosított adalékmodelleket az mgcv-packet (1.4-1 verzió) segítségével számítottuk ki az R-ben (Die R-Stiftung für Statistisches Rechnen, 2.8.1 verzió; Bécs, Ausztria), és az SPSS statisztikai csomagot (18. verzió) fejlesztették ki. amely a fennmaradó statisztikai értékeléseket használja. P-értékek mindkét oldalon

---