A makrofágok által kiváltott C típusú lektin az indukált zsírszöveti fibrózis mögött áll

által

  • Témák
  • Absztrakt
  • bevezetés
  • Eredmények
  • Szövet zsíros Kifejezés bírság elhízásban
  • A lipid eloszlás egerekben Mincle KO
  • Javult a glükóz anyagcsere egerekben Mincle KO
  • Csökkentett zsírszöveti fibrózis egerekben Mincle KO
  • A CLS képződésének csökkentése az egerek zsírszövetében Mincle KO
  • A Mincle által stimulált fibrogén gének expressziója makrofágokban
  • Acélmalom által stimulált myofibroblastok növekedése az FCS-ben
  • Trentillus által stimulált intersticiális fibrózis a zsírszövetben
  • Vita
  • A módszerek
  • Reagensek
  • Állatok
  • Szövettani elemzés
  • Hibridizáció ban ben ha te
  • Áramlási citometriás elemzések
  • Konfokális mikroszkópos elemzés
  • Kollagéntartalom a zsírszövetben
  • Trigliceridtartalom a májban
  • Glükóz és inzulin tolerancia tesztek
  • Western blot az Akt
  • Szérumelemzés
  • CT stimuláció
  • Valós idejű kvantitatív PCR
  • DNS mikroarray elemzés
  • BMT kísérletek
  • statisztikai elemzések
  • További információ
  • Csatlakozások
  • Omnibus Gene Expression
  • További információ
  • PDF fájlok
  • További információ
  • Hozzászólások

Témák

  • Monociták és makrofágok
  • Elhízottság
  • Patogenezis

Absztrakt

bevezetés

Az adipociták és a makrofágok közötti áthallás helyeként az elhízott zsírszövetben egyedülálló szerkezet található, az úgynevezett koronaszerkezet (CLS), ahol a makrofágokról azt gondolják, hogy az elhalt 9, 10 adipocitákból felveszik a maradék lipidcseppeket. Szövettanilag a gyulladásgátló M1 makrofágok aggregálódva SLC-ket képeznek az emberek és rágcsálók elhízott zsírszövetében. Ezzel szemben az M2 makrofágok diszpergálva vannak a 10 adipociták közötti interstitialis terekben. Nevezetesen, a CLS száma pozitívan korrelál az elhízott 11, 12 egyének szisztémás inzulinrezisztenciájával, ami a CLS patofiziológiai szerepét sugallja a zsírszövet gyulladásában és a szisztémás energia anyagcserében. Rosszul érthető azonban, hogy hogyan alakul ki a zsírszövet az elhízás során, és hogyan vesz részt a zsírszövet átalakításában.

Itt megmutatjuk, hogy az elhízás kialakulása során kiváltott Mincle a zsírszövetben a CLS-t alkotó makrofágokhoz lokalizálódik. Érdekes módon a Mincle KO egerek védettek az elhízás által kiváltott CLS-képződés és a zsírszöveti fibrózis ellen, amelyet csökkent méhen kívüli lipidfelhalmozódás és inzulinrezisztencia követ a májban. Ezenkívül a trehalóz-6, 6′-dimikoláttal (TDM), egy mikobaktérium sejtfal glikolipiddel, amelyről ismert, hogy Mincle 13 ligandum, a kezelés CLS-t és intersticiális fibrózist idéz elő egerekben a zsírszövetben. A finom stimuláció elősegíti a fibrózishoz kapcsolódó gének hatásos expresszióját a makrofágokban in vitro. Ez a tanulmány bizonyítékot szolgáltat arra vonatkozóan, hogy Mincle szerepet játszik az adipociták és a makrofágok közötti áthallásban a CLS-ben, ami a fibrogén program aktiválásához vezet. Adataink azt is sugallják, hogy Mincle antagonizmusa a makrofágokban új terápiás stratégiát kínál az elhízás okozta zsírszöveti fibrózis és így az ektopiás lipidek felhalmozódásának megelőzésére vagy kezelésére.

Eredmények

Zsírszövet Finom expresszió az elhízásban

( nál nél ) Mincle mRNS és Emr1 (F4/80) expressziójának alakulása a HFD-vel vagy SD-vel táplált vad típusú egerek epididimális zsírszövetében legfeljebb 50 hétig. Az értékek átlag ± hét. Az adatokat párosítatlan t teszttel elemezzük; n = 5-11; † P †† P § P §§ P -, CD45 + CD11b - F4/80 - és CD45 + CD45 + CD11b + F4/80 + SVF, mRNS, Emr1, Acta2 (aSMA) elkülönítve. Az értékek átlag ± hét; n = 4. ( e ) A Mincle-t expresszáló sejtek százalékos aránya a különböző FCS immunsejtekben. Az értékek négy minta átlaga.

Teljes méretű kép

Megváltozott lipid eloszlás Mincle KO egerekben

( nál nél ) A Mincle KO egerek és a vad egerek testtömege, zsír- és májtömegei a 16. héten. Az értékek átlag ± hét. Az adatokat varianciaanalízissel (ANOVA) elemezzük, amelyet Tukey - Kramer teszt követ. ## P # P ## P ¶ P

( nál nél ) A TDM-stimulált kísérletek illusztrációja SVF alkalmazásával. Az ob/ob egerek epididymális zsírszövetéből előállított FSV-ket CT-vel stimulálták 3 napig. ( ) A CT stimuláció hatása a Mincle, a Tnfa, a fibrózissal kapcsolatos gének (Tgfb1, Pdgfb, Timp1) és az Acta2 mRNS expressziójára. Az értékek átlag ± hét. Az adatokat párosítatlan t teszttel elemezzük; n = 4, ** P - CD31 - fibroblasztokban gazdag FCS-ben, ob/ob egerek epididymális zsírszövetéből előállítva, a mágneses sejtek szortírozó rendszerének (MACS) alkalmazásával. A sejteket CT-vel stimuláltuk 7 napig. ( d ) A CT stimuláció hatása az Acta2 és Col1a1 (kollagén I) mRNS expressziójára. Az értékek átlag ± hét. Az adatokat párosítatlan t teszttel elemezzük; n = 4, ** P

Megfigyeléseink alapján feltételezzük Mincle szerepét a zsírszövet gyulladásában az elhízásban (8. ábra). Az elhízás kialakulása során a Mincle expressziót elsősorban a TLR4 indukálja infiltrált makrofágokban, amint arról korábban beszámoltunk 18. A haldokló adipocitákból felszabaduló endogén ligandum által aktiválva Mincle részt vesz a makrofágok aggregációjában, hogy CLS-t képezzen, ahol az adipociták és a makrofágok között folyamatos a kölcsönhatás. A szeletelés aktiválása a fibrózishoz kapcsolódó gének expresszióját is előidézi a Syk-en keresztül, ezáltal miofibroblasztok képződéséhez vezet, valószínűleg a makrofágok és a fibroblasztok közötti sejtközi kommunikáció révén. Ennek eredményeként az ECM túltermelése korlátozhatja a HFD által kiváltott adipocyták hipertrófiáját, amely szerepet játszik a lipidek májban való felhalmozódásában és a glükóz intoleranciában.