Családi adenomatózus polipózis - APC mutációk - Synevo
Általános információ
A családi adenomatózus polipózis (FAP), bár ritka állapot, az adenomatózisos polipózis leggyakoribb szindróma. Autoszomális domináns transzmisszióval rendelkezik, és a vastagbélben és a végbélben elterjedt száz vagy akár több ezer adenomatózus polip korai megjelenése jellemzi. PAF-kezelés hiányában 35–40 éves korig változatlanul vastagbélrákká válik. Ezenkívül megnő a többi rosszindulatú daganat kockázata.
A PAF előfordulása világszerte állandó és 1: 6000 és 1: 12000 születés között változik, mindkét nem egyenlő mértékben érintett.
A PAF genetikai hibáját az APC gén csíravonal mutációja (adenomatosis polyposis coli) képviseli. Ez egy tumorszuppresszor gén, amely az 5. kromoszóma hosszú karján helyezkedik el, a q21 sávban. 15 exonból áll, és nagy molekulatömegű fehérjét kódol (309 kDa). Az APC fehérje számos olyan doménnel rendelkezik, amelyek közvetítik az oligomerizációt, de kölcsönhatásba lépnek különféle intracelluláris fehérjékkel is, amelyek fontos szerepet játszanak a sejtek tapadásában, a szignál transzdukciójában és a transzkripciós aktivációban. In vitro és állatmodellekben (egerek felhasználásával) végzett vizsgálatok kimutatták, hogy az APC a metafázisban a kromoszóma igazodásában, a sejtek migrációjában és az apoptózis elősegítésében is szerepet játszik az 1; 2; 4 vastagbélsejtekben. .
Az APC egy klasszikus tumorszuppresszáló fehérje, amely központi szerepet játszik a Wnt jelátviteli folyamatban, részben a β-catenin lebomlásának szabályozásával. A Wnt útvonalon továbbított jelek befolyásolják egy β-katenint, konduktint és GSK3-t (glikogén-szintetáz-kinázt) tartalmazó protein-komplex stabilitását. Wnt hiányában vagy vad típusú APC fehérje jelenlétében a β-katenint a proteaszómában egy ubiquitin által közvetített folyamat lebontja. Wnt jelenlétében vagy az APC hiányában (mint a vastagbélrák legtöbb formájában) a β-katenin célgének expresszálódnak, beleértve a c-MYC-t is. A MYC génexpresszió növeli a poliamin-ornitin-dekarboxiláz (ODC) expresszióját, amely protoonkogén. Így az APC géntermék közvetett módon szabályozza számos, a sejtproliferációban részt vevő gén transzkripcióját a β-catenin transzkripciós faktorral való kölcsönhatás révén.
Ma már több mint 300 különböző típusú mutációt ismernek el a családi adenomatous polipózis okaként. Kis törlések képviselik őket - 46%; kis betétek - 10% és nonszensz mutációk - 28%. Jelentős génváltozásokról (13%) is beszámoltak, a legfrissebb adatok arra utalnak, hogy a PAF 1 esetek akár 20% -áért is felelősek lehetnek. .
A leggyakoribb mutáció, amely a PAF-ben szenvedő betegek körülbelül 10% -ában fordul elő, az deléció az 1309 kodonban, és a következő gyakoriságú (ami a betegek 5% -ában fordul elő) szintén egy deléció, de az 1061-es kodonban. Az APC mutációk 60% -a az MCR ("mutációs klaszter régió") nevű központi régióban található, amely az 1284 és 1580 kodonok között helyezkedik el; ez a régió felelős a β-katenin lebontásáért.
Az APC génmutációk elemzése azt mutatja, hogy a legtöbb genetikai rendellenesség csonka vagy diszfunkcionális fehérje szintéziséhez vezet. Az APC-funkció elvesztése gátolja az apoptózist, és lehetővé teszi a β-catenin intracelluláris felhalmozódását, ami a későbbi adenomák kialakulásával serkenti a sejtek növekedését.
Összefüggések vannak a betegség bizonyos mutációi és klinikai megnyilvánulásai között, ennek ellenére az összefüggés nem pontos, és előfordulhatnak különbségek.
A betegség klasszikus formáját okozó genetikai rendellenességek az 5-ös exon és a 15-ös exon 5'-része között találhatók, míg a legyengített formához kapcsolódóak a gén legkülső 5'-régiójában és a 15-ös exon 3'-os részében (proximális 1517-es kodon vagy 1900-ig disztális). Az 1250 - 1464 kodon régió mutációi súlyos polipózissal társulnak. Az 1445-1578 kodon közötti mutációval rendelkező betegeknél súlyos desmoid tumorok alakulhatnak ki 1; 2; 4 .
Az APC gén különböző mutációi meghatározzák az APC-asszociált polipózis néven ismert szindrómák széles spektrumát, amelyek a következők:
4. FAP - attenuated form (AFAP) 2 .
1. PAF-ben - a klasszikus forma a diagnózist több mint 100 colorectalis adenomatózus polip vagy kevesebb, mint 100 adenomatous polip és egy PAF-rel rokon jelenlétében állapítják meg. Eddig olyan eseteket írtak le, amelyekben több ezer polipot találtak, de általában az átlag 500 volt a diagnózis idején. A polipok, a bél klinikai megnyilvánulásainak, valamint a vastagbél karcinóma kialakulásának átlagos életkora 16, 29, illetve 36 év 2. A retina pigment epithelium veleszületett hipertrófiája nagyon specifikus a PAF-re; diszkrét lapos pigmentált elváltozások vannak a retinában, gyakran kétoldalúak, klinikai következmények nélkül. Ezek általában megelőzik a polipózis megjelenését, és korrelálnak az APC 4 gén 9. és 15. exonja közötti mutációk jelenlétével. .
2. A Gardner-szindróma (SG) a vastagbél adenomatózus polipózisának társulása az oszteómákkal (főként a koponyában és az alsó állcsontban), a fog rendellenességeivel (a fog kitörésének hiánya, egy vagy több fog veleszületett hiánya, a többszörös fogak, a ciszták és az odontómák) és a daganatokkal. lágy szövetek (epidermoid ciszták, mióma, desmoid tumorok). Ezek a jóindulatú extraintesztinális tumorok a PAF-ben szenvedő egyének és családok körülbelül 20% -ában fordulnak elő.
3. A turcot szindróma (ST) a multicentrikus vastagbél adenomatózus polipózis és a központi idegrendszeri daganatok (általában medulloblastomák) ritka kombinációja. A betegeknél kolorektális karcinóma alakul ki fiatal felnőttekben, akár a rákmegelőző elváltozások rosszindulatú átalakulása, akár az interkalált intakt epithelium de novo fejlődése eredményeként.
4. Az AFAP a betegség egy olyan formája, amelyet kis számú, átlagosan 30 polip jelenléte jellemez a felszálló vastagbélben. A polipok átlagos megjelenési kora 36 év, a colorectalis carcinoma esetében 50-55 év (10-15 évvel később, mint a klasszikus PAF-ben szenvedő betegeknél, de korábban, mint a colorectalis carcinoma szórványos formái). Gyomorpolipok (minimális malignus potenciállal), valamint a vékonybél adenomatózus polipjai (4-12% kumulatív malignitási kockázattal) gyakran társulnak 2 .
A desmoid tumorok a PAF-ben szenvedő betegek körülbelül 10% -ában fordulnak elő, nőknél gyakoribbak, és műtét vagy terhesség váltja ki őket. Ezek a morbiditás legfőbb okai, mind az erekre, mind a különböző hasi szervekre gyakorolt kompressziós hatása miatt. Minden klinikai gyanút képalkotó vizsgálatokkal kell igazolni. A desmoid daganatok kezelésének egy multidiszciplináris csoport eredményének kell lennie, amely sebészeket, onkológusokat és gasztroenterológusokat foglal magában.
Az egyéb bélen kívüli daganatok ritkák, és pancreas adenocarcinoma (2%), pajzsmirigyrák (2%), gyomor adenocarcinoma (0,5%) és hepatoblastoma 5 év alatti gyermekeknél (1,6%).
A PAF diagnózisa klinikai adatokon és családtörténeten alapul, de genetikai vizsgálatokkal kell megerősíteni.
A beteg teljesen tünetmentes lehet, ezért a helyes diagnózis érdekében elengedhetetlen a családi daganatok részletes előzményeinek megszerzése. A rektális vérzés vagy a hasi megnyilvánulások a betegség stádiumától függően figyelmeztető jelek lehetnek. Az extrakolonikus megnyilvánulások (desmoid daganatok vagy a mandibula osteomái) azonosítása oda vezetheti az orvost, hogy a beteg életkorától vagy a feltételezett betegség formájától függően szigmoidoszkópiát vagy kolonoszkópiát ajánljon.
Gyermekkorban csak kicsi adenomák azonosíthatók endoszkópiával, főként a rectosigmoid régióra korlátozódva. A betegek öregedésével több száz colorectalis vagy extracolonicus adenoma található.
A PAF attenuált forma diagnózisa sokkal összetettebb, mint a klasszikus forma esetében, a széles fenotípusos variáció miatt. A szignifikáns vizsgálat helyett a kolonoszkópiát javasolták a betegség kockázatának kitett egyének szűrésére, mivel a polipok általában az emelkedő vastagbélben csoportosulnak. Az AFAP diagnózisa a klinikai megnyilvánulások és a genetikai elemzés kombinációján alapul 1 .
A genetikai tesztelést elsősorban a tünetmentes egyének szűrésére használják, akiknél fennáll a korai PAF kialakulásának kockázata, de a diagnózis megerősítésére olyan betegeknél is, akiknek klinikai tünetei nem egyértelműek. A mutáció azonosítása után a vizsgálat kiterjeszthető a beteg rokonaira is.
Az APC gén mutációinak tesztjei laboratóriumunkban rendelkezésre állnak a veszélyeztetett tünetmentes felnőttek tesztelésére.
A PAF nyilvánvaló klinikai megnyilvánulásával rendelkező betegek kb. 25-30% -ában nem mutattak mutációt.
Mivel a PAF autoszomális domináns örökletes betegség, az érintett személy minden gyermekének 50% -os kockázata van az APC-mutáció öröklésének. A legtöbb PAF-re hajlamos APC-mutációban szenvedő embernél az egyik szülő örökli.
Az érintett testvérek kockázata a szülők genetikai állapotától függ. Ha egy szülő érintett vagy APC-mutációja van, annak a kockázata, hogy átterjed a gyermekekre, 50%.
A betegek körülbelül 20-30% -ának van de novo mutációja.
A magas kockázatú terhes nők prenatális diagnózisa az amniocentézissel nyert magzati sejtekből kivont DNS elemzésével lehetséges, amelyet általában a vemhesség körülbelül 15-18 hetében hajtanak végre, vagy a chorion villusok biopsziája körülbelül 10-12 hetes terhességnél. A betegséget okozó mutációkat azonosítani kell a prenatális vizsgálat előtt az érintett családtagnál.
A tünetmentes egyéneknél a genetikai diagnózis célja a hordozók azonosítása és a rák vagy a PAF egyéb szövődményei okozta idő előtti halálozás megelőzése. A PAF-ben szenvedő egyéneknek 100% -os kockázata van a vastagbélrák kialakulásának, amely majdnem nullára csökken, ha a betegeket megfelelő szűrővizsgálati és kezelési programba helyezik 1; 3. A számos központban alkalmazott profilaktikus sebészeti kezelés a proktokolektómia ileo-anális anasztomózissal, amely lehetővé teszi a végbél működésének fenntartását 4 .
Begyűjtött minta - vér jön 3 .
Betakarítási konténer - antikoagulánsként EDTA-t tartalmazó vakutainer 3 .
Betakarított mennyiség - 5 ml vér 3 .
Az elutasítás okai megpróbálni - heparin antikoagulánsként történő alkalmazása; koagulált vagy hemolizált minták 3 .
Tesztstabilitás - 7 nap 2-8ºC-on 3 .
Módszer - az APC gén összes exonjának szekvenálása + az MLPA deléciók/duplikációk elemzése 3 .
Az eredmények jelentése és értelmezése
Az APC génben észlelt mutációkat és a megfelelő genotípust közöljük 3 .
1. Fél Elizabeth, Dani Bercovich, Paul Rozen. Családi adenomatózus polipózis. In Orphanet Journal of Rare Diseases, 4:22, 2009.
2. ES Boia, R Mejdi. Családi adenomatózus polipózis (FAP): Mit kell tudni és mit kell tenni - Esettanulmány. In Jurnalul Pediatrului –XI: 2008, 43–44.
3. Synevo Laboratórium. Az alkalmazott munkatechnika konkrét hivatkozásai 2010. Ref.