Deamidált Gliadin peptidek antitestei - PDF ingyenes letöltés
Deamidált gliadin peptidek elleni antitestek Különböző ELISA-k összehasonlítása a gyermekek lisztérzékenységének diagnosztizálásához Értekezés a tudományos fokozat megszerzéséhez Dr. med. a Lipcsei Egyetem Orvostudományi Karán benyújtotta: Maria Petzold (nem Ritter), született: 1984. június 3., Lipcse Témavezető: Prof. Dr. rer. nat. habil. Thomas Mothes a lipcsei egyetemen, Orvostudományi Kar, Laboratóriumi Orvosi, Klinikai Kémiai és Molekuláris Diagnosztikai Intézet döntése a doktori fokozat odaítéléséről 2011. szeptember 27-től
Tartalomjegyzék Bibliográfiai leírás A rövidítések listája 1 Bevezetés. 11 1.1 Meghatározás. 11 1.2 A lisztérzékenység formái és az epidemiológia. 12 1.3 Diagnosztika. 13 1.3.1 Klinikai tünetek. 13 1.3.2 Szerológiai vizsgálat. 14 1.3.3 Szövettani vizsgálat. 15 1.4 Patogenezis. 18 1.5 Deamidált gliadin peptidek. 21 2 Célok. 23 3 Módszerek. 25 3.1 A tantárgy felépítése. 25 3.2 A résztvevők jellemzői. 29 3.3 Az antitest meghatározása. 31 3.4 Statisztikai értékelés. 33 3.5 Módszertani kritika. 35 4 eredmény. 37 4.1 Antitestkoncentrációk a betegeknél és a kontrollok. 37 4.2 ROC elemzés. 39 4.3 Határértékek. 41 4.3.1 Vállalati határérték. 41 4.3.2 Saját határérték. 42 4.3.3 Saját határérték a nagy érzékenységhez. 42 4.3.4 Saját határérték a magas specificitáshoz. 44 4.3.5 A kombinált tesztek eredményei. 44.
Tartalomjegyzék 4.4 Valószínűségi arányok és utóvizsgálati valószínűség. 46 4.5 Antitestkoncentráció és mocsári szakasz. 48 4.6 Az antitestkoncentráció életkori függősége. 50 4.7 Antitestkoncentráció és nem. 50 4.8 Megismételhetőség. 53 4.9 Esettanulmányok. 53 4.9.1 Antitest koncentráció fiatal cöliákiás betegeknél. 53 4.9.2 Krónikus gyulladásos bélbetegség. 54 4.9.3 Pozitív biopszia eredmények a kontrollcsoportban. 55 4.9.4 Celiaciás beteg negatív biopsziás eredménnyel. 56 4.9.5 Szelektív IgA-hiányos beteg. 57 5 Megbeszélés. 59 5.1 A DGP tesztek összehasonlítása egymással. 59 5.2 A DGP tesztek összehasonlítása a natív gliadin elleni antitest tesztekkel. 60 5.3 A DGP-teszt összehasonlítása az autoantitest-tesztekkel a ttg-vel szemben. 61 5.4 A kombinált antitest tesztek előnyei. 64 5.5 Tesztértelmezés. 5.6 Mikor adható le a biopszia? 68 6 Összegzés. 71 Irodalomjegyzék. 75 Táblázatok felsorolása. 87 Ábra lista. 88 Függetlenségi Nyilatkozat. 89 önéletrajz. 91 publikáció. 93 köszönet. 101
Diagnosztika Egészséges nyálkahártya-mocsár 1. típusú mocsár 2. típusú mocsár 3a-típusú mocsár 3b-típusú mocsár 3c-típusú mocsár 4. ábra A mocsári szakaszok szövettani jellemzői Egészséges nyálkahártya: A nyálkahártya normális villusú és kripta felépítésű. 1. mocsártípus: a vékonybél nyálkahártyájának normális felépítése, csak az IEL emelkedik. Marsh type 2: A kripták az 1. típushoz képest megnyúltak. 3a típusú mocsár: A coeliakia destruktív típusa, közepes villus atrófiával és a kripták hiperpláziájával. 3b. Típusú mocsár: A coeliakia destruktív típusa mély villus atrófiával. 3c típusú mocsár: Destruktív coeliakia teljes villus atrophiával. (Oberhuber 2001 (Marsh Type 1), az összes többi kép: A. Werner és V. Wiechman, Patológiai Intézet, St. Georg Klinika ggmbh 2009). 17-én
Bevezetés 6. ábra A gliadin dezamidálása szöveti transzglutamináz segítségével Balra: A szöveti transzglutamináz az ammóniát szétválasztja a specifikus glutamin maradványokról, aminek eredményeként glutamát maradékok keletkeznek (aminosavak egybetűs kódban; glutamin = Q, glutaminsav = E, prolin = P, fenilalanin = F). Jobbra: Antitestek kötése (lumineszcencia vizsgálattal mérve) a lisztérzékenységi beteg szérumától a natív QPQQPFP gliadin szekvenciához és a dezaminált QPEQPF szekvenciához. Az erősebb világítás erősebb kötést jelent. (T. Mothes 2009) 22
Módszerek 7. ábra Folyamatábra a szérum kiválasztására A felvételi kritériumoknak megfelelő 340 szérumból összesen 35 szérummintát kizártunk. A fennmaradó 305 szérumból 142-et a betegcsoportba, 163-at pedig a kontrollcsoportba soroltak az ESPGHAN kritériumai alapján. A betegcsoportban egy negatív biopsziás eredménnyel rendelkező résztvevő volt, a kontroll csoportban összesen négy olyan résztvevő volt, akiknek szövettani értékelése pozitív Marsh stádiumnak felelt meg. 28.
Módszerek 79 betegből a szövettani vizsgálat Marsh 3c-t, 26 betegnél Marsh 3b-t mutatott ki, további 27-et pedig Marsh 3a-nak minősítettek. A szövettani értékelés során több szakaszt jeleztek-e pl. Marsa 3a 3c, a betegeket a legmagasabb szakaszba sorolták (a Marsh 3c példában). Négy betegnél csak a Marsh 3 volt az értékelés, ötöt a Marsh 2 kategóriába soroltak. Látens cöliákiában szenvedő betegeknél a szövettani értékelés Marsh 1-et eredményezett (3. táblázat). 8. ábra A résztvevők száma és a vérvétel közötti intervallum A vizsgálatban résztvevők több mint 50% -ában vért vettek a biopszia előtt három és nulla nappal. A résztvevők további 16% -ának vért vettek fel 20 nappal a biopszia előtt vagy után. 3. TÁBLÁZAT Betegek száma Marsh stádium szerint Marsh stádium Marsh 1 Marsh 2 Marsh 3a Marsh 3b Marsh 3c Betegek száma 1 5 27 26 79 Négy betegnél csak a Marsh 3 osztályozás volt elérhető. 30-án