Összehasonlító tanulmány az ózonozott olívaolajról és az ózonozott napraforgóolajról

Maritza F. Díaz *, I; Rebeca HernándezI; Goitybell MartínezI; Genny Vidal; Magali GómezI; Harold FernándezI; Rafael GarcésII Ózon Anyagok Intézete, Ózonkutató Központ, Országos Tudományos Kutatóközpont, P.O. House 6412 Havanna, Kuba III. Instituto de la Grasa, CSIC, Sevilla, Spanyolország

Maritza F. Díaz *, I; Rebeca HernándezI; Goitybell MartínezI; Genny Vidal; Magali GómezI; Harold FernándezI; Rafael GarcésII

Ózon Anyagok Intézete, Ózonkutató Központ, Országos Tudományos Kutatóközpont, P.O. Ház 6412 Havanna, Kuba
IIInstituto de la Grasa, CSIC, Sevilla, Spanyolország

Ebben a tanulmányban az ózonozott olíva- és napraforgóolajokat kémiailag és mikrobiológiailag összehasonlítják. Ezeket az olajokat egy habosított ózongázreaktorba helyeztük szobahőmérsékletű vízfürdőben, amíg megszilárdult. A peroxid, savasság és jód értékét az antimikrobiális aktivitással együtt határoztuk meg. Az ózonozás ezen olajok zsírsavösszetételére gyakorolt hatásait gáz-folyadék kromatográfiás technikával elemezték. A peroxidációs és savasságértékek növekedését mindkét olajnál megfigyelték, de ezek nagyobbak voltak az ózonozott napraforgóolajban. A jódérték nulla volt az ózonozott olívaolajban, míg az ózonozott napraforgóban 8,8 g jód/100 g. Az antimikrobiális aktivitás mindkét ozonozott olaj esetében hasonló volt, kivéve a Pseudomona aeruginosa minimális baktericid koncentrációját. A zsírsavak összetétele mindkét ózonozott olajban a telítetlen zsírsavak (C18: 1, C18: 2) fokozatos csökkenését mutatta, az ózon dózisának fokozatos növekedésével.

Kulcsszavak: ózon, ózonozott napraforgóolaj, ózonozott olívaolaj, peroxidérték, antimikrobiális aktivitás, gáz-folyadék kromatográfia

Ebben a tanulmányban az ózonezett nyky és a napraforgó kémiai és mikrobiológiai összehasonlítását végezték el. Ezeket az olajokat buborékoltató ózongázzal, szobahőmérsékletű vízfürdőben, megszilárdulással vezettük be a humorátorba. Peroxid-, jódtartalom és egy gramm savasság az ízületek antimikrobiális aktivitásként történő meghatározásához. A zsírdózis-összetétel ózonozását végzik el a Gás-Líquido kromatográfiával elvégzendő összes vizsgálat esetében. A savperoxidációs értékek akkor figyelhetők meg, ha mindkét csont megfigyelhető, amelyek nem tartalmaznak napraforgó-ozonátokat. A jódtartalom nem eredményez ózonozott ózonátot nullára, 100 g-onként 8,8 g jódot tartalmazó napraforgó-ózonátot nem tartalmaz. Az ózonhoz hasonló antimikrobiális anyag a Pseudomona Aruginosa minimális baktériumölő koncentrációjával kombinálva. Zsíros anyagok összetétele, amelyek egynél több fokú zsírt (C18: 1, C18: 2) tartalmaznak, és amelynek fokozatos az ozonozása.

A növényi olajok jellemzését több mint 200 éve tanulmányozzák. A múlt század második felében a további ingert a kémia és a biokémia növekedése jelentette, valamint a vágy, hogy megértsék azokat a mechanizmusokat, amelyek a legkülönbözőbb természetes termékekhez és azok működéséhez vezetnek.

Az olívaolajat olívaolajból, a napraforgóolajat napraforgómagból nyerik. Mindkét olaj különböző zsírsavösszetételeket tartalmaz, az olívaolajban magas az olajsav-tartalom (65-85%), a napraforgóolajban gazdag linolsav (48-74%) és olajsav (14-39%).

Az ózon reakciója ezekkel a növényi olajokkal szinte kizárólag a telítetlen zsírsavakban jelen lévő szén-szén kettős kötéssel történik.3 Ez a reakció számos oxigénes vegyületet eredményez, például hidroperoxidokat, ózont, aldehideket, peroxidokat, diperoxidokat és poliperoxidokat. a vegyületek felelősek lehetnek az ózonozott növényi olajok széles biológiai aktivitásáért is. A telítetlen olajokban az oxigénezett vegyületek kitermelése a szükséges reakciókörülményektől függ, például a közeg típusától, amelyben a reakció lejátszódik, az adalékanyagok jelenlététől, a reakció hőmérsékletétől, a reaktor típusától, a reakcióelegy keverésétől, az alkalmazott ózon adagoktól stb. 3, 8 -10

Az ózonozott növényi olajok fizikai-kémiai tulajdonságainak ismerete nagy jelentőséggel bír jellemzésük és azonosításuk szempontjából. Az ózonozási folyamat nyomon követésére és az ózonozott növényi olajok minőségének meghatározására olyan analitikai módszereket alkalmaznak, mint a peroxid, a savasság és a jód értéke. növényi olajokban lévő telített és telítetlen zsírsavak elemzésére használták.16-18

Természetes készítményként az ózonozott olaj ma már több országban elérhető, de a kémiai adatokkal, a standard készítményekkel és az antimikrobiális aktivitással kapcsolatos információk korlátozottak. A kubai ózonozott napraforgóolajat (OLEOZON®) azonban tesztelték, és kiderült, hogy értékes antimikrobiális aktivitással rendelkezik baktériumok, vírusok és gombák ellen.19-22 A Sienai Egyetemi Kórházban saját maguk készítik el úgy készül, hogy tiszta olívaolajban legalább 30 percig hűtött fürdőben ózont buborékoltatunk. Más országokban a tiszta olívaolajat két napig ózonozzák, amíg megszilárdul. 23 Mindkét olajat széles körben használják terápiás hatásaikra. Ezért a cikk célja az ózonozott olíva- és napraforgóolaj kémiai összetételének és mikrobiológiai aktivitásának összehasonlítása különböző térfogat-tesztek, gáz-folyadék kromatográfia (GLC), valamint agar és makro hígítási módszerek alkalmazásával. különböző mikroorganizmusokkal.

Jégecet, kloroform, kálium-jodid, nátrium, tioszulfát, keményítő, etanol, éter, kálium-hidroxid, fenolftalein, jód-bromid, toluol, dimetoxi-propán, a MERCK (Németország). Az ehető napraforgóolajat és az olívaolajokat az Ideal, Argentína és a Borges Oils védjegyekből, illetve Spanyolországból szerezték be.

Általános ózonozási eljárás

80 ml napraforgóolaj és 8 ml víz keverékét juttattuk egy buborékoltató reaktorba, amelyben az ózonreakció 25 ° C-os szobahőmérsékletű vízfürdőben folyt. 8,05 órán át, és 2 mintát vettünk különböző alkalmazott ózondózisoknál (54,6 és 246,8 mg g-1). Ugyanezeket az ózonozási reakciókat kaptuk 80 ml olívaolaj és 8 ml víz keverékével, amelyet 5,73 órán át folytattunk, és 2 mintát vettünk különböző alkalmazott ózon adagokban (34,9 és 177,0 mg g-1). Az ózon adagjait úgy választottuk meg, hogy elérjék a 700 és 800 mmol ekvivalens közötti peroxid értékeket. kg-1 (1. minta) és a teljes megszilárdulásig (2. minta).

Az ózont úgy állították elő, hogy oxigént vezetett át egy Trailigaz Labo 12-02 ózongenerátoron rögzített feszültségen (170 V) és állandó 30 L h-1 áramláson. A kezdeti ózonkoncentrációt (75,2 mg L-1) Anseros Ozomat berendezéssel határoztuk meg.

A peroxid értéke az a szám, amely az aktív oxigén milliekvivalensében kifejezi az 1000 g anyagban lévő peroxid mennyiségét.

A savérték a szabad savak semlegesítéséhez szükséges mg mg kálium-hidroxid száma 1,0 g anyagban.

Az anyag jódértéke az anyag 100 tömegrészében elnyelt jód tömege

Gáz-folyadék kromatográfia (GLC)

A napraforgó, valamint a kezeletlen és az ózonozott olívaolaj mintáiból telítetlen és telített zsírsavakat elemeztünk. Az észterezett zsírsavak GLC-analíziséhez a metil-észter-származékokat először átészterezéssel állítottuk elő Garcés és Mancha szerint.

Az elemzéseket DB-17HT kapilláris oszlopban (15 mx 0,25 mm azonos, filmvastagság 0,15 μm), lángionizációs detektorral végeztük 280 ° C-on. A vivőgáz 1 ml hidrogén volt. min-1 és 50 kPa nyomáson. Az oszlop hőmérsékletét 100-200 ° C és 8 ° C közötti perc-1-re programoztuk. Az injekció térfogata 5 pL volt. Az elemzéshez Hewlett Packard 5890 kromatográfiai rendszer modellt használtunk. Külső zsírsav standardokat (Sigma-Aldrich Chemical Company) alkalmaztunk az összetevők azonosításához.

Meghatároztuk az eltérő peroxidértékű, ózonozott napraforgóolaj antimikrobiális aktivitását a baktériumok és az élesztő törzseken. Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 10536, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 és Bacillus subtilis ATCC 6633 választottunk. A legkisebb gátlási koncentrációkat (MIC) és a minimális baktericid koncentrációkat (MBC) agar-hígítási módszerrel és makro-hígítási módszerekkel a Klinikai Laboratóriumi Standardok Nemzeti Bizottsága alapozta meg.

Három kísérletet hajtottak végre. Valamennyi adatot átlagként és szórásként fejeztük ki.

Az 1. táblázat a két kezelt és ózonozott olaj peroxid-, sav- és jódértékét mutatja. Az ózonozási reakció során megnőtt a peroxid és a sav értéke, míg a jód értéke csökkent.

Az ózon és a növényi olaj reakciója szinte kizárólag a telítetlen zsírsavakban jelen lévő szén-szén kettős kötések révén történik. Az olívaolaj és az ózonozott napraforgóolajok (1. minta) idővel 160, illetve 185 mPa viszkozitási értéket értek el. mely 2. minta teljes szilárdulást ért el. A peroxidértékek növekedését figyelték meg mindkét olajmintában a peroxidanyagok képződése miatt, amikor az ózon az ismert Criegee-mechanizmus révén telítetlen vegyületekkel reagál. 27 A 2. mintában mindkét ózonozott olaj maximális peroxidértéke 2,506 és 2,43 mm 2,43ol volt. kg-1. Ez a viselkedés annak a polimer peroxidoknak a kialakulásának tudható be, amelyek felelősek mindkét ozonozott olajban elért viszkózus tömegért.

A peroxidáció és a savasság növekedése mindkét olajban megfigyelhető volt, de nagyobb volt az ózonozott napraforgóolajban. Az 1. mintában (olívaolajok és ózonozott napraforgóolaj), ahol a peroxidértékek növekedése gyorsan bekövetkezik az alkalmazott ózondózis 34,9 és 54,6 mg g-1 értékére, a savértékek 0,28-2,7 mg KOH g-1, illetve 0,12-5,3 mg KOH g-1 koncentrációban. A 2. mintában a savértékek 17,3, illetve 86,9 mg KOH g-1-re nőnek, ami 6,4-szeres, és 16,4-szeres növekedést jelent az 1. minta savértékében. Ezeket az eredményeket a különböző egyensúlyi körülmények között jelenlévő összes peroxidvegyület bomlásával magyarázhatjuk, ugyanabban a reakciórendszerben.7 Példaként említhetjük a karbonsav képződését peroxidvegyületekből.6 Másrészt a napraforgóolaj nagyobb arányban tartalmaz savakat. az olívaolajnál telítetlen zsírok nagyon összetett ózonozott rendszerhez vezettek, amelyben a peroxidvegyület savasra bomlása nagyon magas.

A jód értéke csökkenést mutatott az alkalmazott ózon dózishoz képest (1. táblázat). Köztudott, hogy ez az érték az olajok, főleg az olajsav és a linolsav kettős kötés-tartalmának mértéke. Az ózon reakciója a magas telítetlen zsírsavtartalmú növényi olajokkal a jódértékek gyors csökkenéséhez vezetett.3 A jódérték nulla volt az ózonozott olívaolajban (2. minta), míg az ózonozott napraforgóolajban. (2. minta) 8,8 g jód volt 100 g, jelezték, hogy az olívaolaj összes telítetlen csoportja reagált ózonnal, de nem napraforgóolajjal.

A kezeletlen olívaolajban lévő telítetlen zsírsavak gazdag olajsavban tartalmaznak egy telítetlen C9-et, míg a napraforgóolajban magas a linolsav-tartalom, amelynek két telítetlen C9-ben, illetve C12-ben 16, így a Az olajbogyó kettős kötéssel rendelkezik az ózon reakciójához.

Az ózonozás ezen olajok zsírsavösszetételére gyakorolt hatásait gáz-folyadék kromatográfiás (GLC) technikával elemeztük (2. táblázat). A zsírsavak összetétele mindkét ózonozott olajban a telítetlen zsírsavak (C18: 1, C18: 2) fokozatos csökkenését mutatta, az ózon dózisának fokozatos növekedésével. A napraforgóolajban az ózonozási reakció linolsavval megy végbe, míg az olívaolajban olajsav termeli.

Ezek az eredmények azt mutatják, hogy az ózonreakcióhoz kettős kötés van minden rendszerben. Ez nem esik egybe az ózonozott olívaolaj (2. minta) jódérték-meghatározás (1. táblázat) alkalmazásával kapott eredményeivel, mert amikor az alkalmazott 177,0 mg g-1 ózon dózist elérték, ez az elemzés nem mutat kettős határt., számszerűsíti őket. Ez a kísérlet bizonyítja, hogy a jódérték meghatározása nem pontos ehhez a méréshez. Ha az ózon dózisa magas, polimerizációk történnek az ózonozási reakcióhoz képződött peroxidok kondenzációjára7, és a rendszerben megfigyelt magas viszkozitás akadályozza a jód-bromid-reagens kettős reakciójának elérését.

A különböző peroxidértékű ózonozott olíva- és napraforgóolajok antimikrobiális aktivitására vonatkozó adatokat a 3. táblázat mutatja be. Az antimikrobiális aktivitás mindkét ozonozott olaj esetében hasonló volt, kivéve a Pseudomona aeruginosa ATCC 27853 minimális baktériumölő koncentrációját. ózonozott nap, antimikrobiális aktivitás a Pseudomona aeruginosa ellen, míg az ózonozott olívaolaj jobb volt, mint a peroxid magas értéke. Ez a kutatás azt mutatja, hogy magasabb peroxidértékek mellett az olajbogyó és a napraforgóolaj antimikrobiális aktivitása magasabb. Az ózonozott olíva- és napraforgóolajoknak is hasonló csíraölő hatása van.

Egy másik tanulmányban21 az OLEOZON® ózonozott napraforgóolaj in vitro aktivitását tanulmányozták a Staphylococcus aureus ATCC 25923-on. A minimális inhibitor koncentráció értéke 9,5 mg mL-1, a legkisebb baktericid koncentráció értéke 356 mg mL- 1. Ezek az eredmények ebben a vizsgálatban jobbak voltak (3. táblázat), ami az elemzett ATCC törzs változásainak tudható be; az olajokban különböző peroxid-értékeket és más ózonozási eljárásokat alkalmaztak.

Kutatási erőfeszítések az ózonozott növényi olaj kémia területén az évek során; oxigénes termékek tisztázásával foglalkoztak, amelyek korrelálhatnak csíraölő hatásukkal.

A peroxid- és savérték-növekedés mindkét olajban elérhető volt, de nagyobb volt az ózonozott napraforgóolajban.

Ha a peroxid értéke magas, az ózonozott olajok viszkozitása magas, ami megakadályozza a jód-bromid reagens kettős kötéshez való hozzáférést. Ezért a jódérték meghatározása nem pontos ennél a mérésnél.

Az ózonozott olíva- és napraforgóolajok hasonló antimikrobiális aktivitással rendelkeznek a Staphylococcus aureus ATCC 6538, az Escherichia coli ATCC 10536 és a Bacillus subtilis ATCC 6633 ellen, a Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 kivételével, amelyekben az alacsony napraforgóolaj alacsony peroxidértékű volt. jobb antimikrobiális aktivitás, míg az ózonozott olívaolaj magas peroxid tartalommal jobb.