QuantiFERON TBC teszt; Központi Katonai Sürgősségi Egyetemi Kórház Dr.
QuantiFERON TBC teszt
Általános információ
A tuberkulózis (TB) a Mycobaterium tuberculosis komplexbe tartozó baktériumok (M. tuberculosis, M. bovis és M. africanum) által okozott fertőző légúti fertőző betegség.
A tuberkulózis-fertőzés aktív és látens formákat egyaránt magában foglal; A látens tuberkulózis akkor fordul elő, amikor egy személy ki van téve az M. tuberculosisnak, és a szervezet ellenőrzi a fertőzést, de nem tudja felszámolni. Becslések szerint a látens tuberkulózisban szenvedők körülbelül 10% -a életében aktív formává válik. A látens fertőzés reaktiválásának okai közé tartozik a HIV-fertőzés és a TNFα antagonistákkal történő kezelés. Emiatt a látens tuberkulózis diagnózisa fontos lépés a fertőzés újbóli aktiválódásának megakadályozásában, különösen a magas kockázatú embereknél. A látens tuberkulózis kezelése jelentősen csökkentheti az aktív formák felé történő progresszió kockázatát.
A Cellestis Limited (Ausztrália) által kifejlesztett QuantiFERON TB-t az FDA 2005 májusában jóváhagyta in vitro tesztként, amely hasznos volt a Mycobacterium tuberculosis fertőzés diagnosztizálásában mind látens, mind aktív formában. Az Európai Közösségben a tesztet igazolták a tuberkulin teszt azonos helyzetekben történő használatára.
Egészen a közelmúltig a tuberkulin IDR volt az egyetlen módszer a TB fertőzés diagnosztizálására. Bár széles körben használják, a tuberkulin tesztnek számos korlátja van. A QuantiFERON esetében, amely a véren végzett laboratóriumi vizsgálat, a limfociták TB antigénekkel történő stimulálása a phlebotomiás csőben történik, és nem intradermálisan. Emiatt kizárt a tuberkulin-teszt során előforduló "emlékeztető" hatás (bőrteszt elvégzése olyan személyen, aki nem volt kitéve TB-fertőzésnek, stimulálja az immunrendszert, és egy szakaszban reagál a tuberkulinra. a bőrteszt megismétlésével).
A tuberkulin IDR-től eltérően a teszt eredményeit nem befolyásolja a BCG oltás; a nem tuberkulózisos mycobacteriumokkal járó korábbi fertőzéseknek is kisebb a hatása. A bőrpróba során előforduló káros túlérzékenységi reakciók szintén megszűnnek. Ezenkívül a QuantiFERON TB teszt eredményei sokkal objektívebbek, olvasási és értelmezési hibák nélkül.
Teszt indikációk:
1. Minden olyan esetben alkalmazható, ahol a tuberkulin tesztet általában használják:
-az aktív tuberkulózis klinikai és radiológiai gyanúja;
-a tuberkulózis fertőző formáival rendelkező betegek kapcsolatai;
-a magas kockázatú emberek átvilágítása: egészségügyi egységek és gondozó intézmények személyzete, rossz higiénés körülmények között élő emberek stb.
Egy 2008-as tanulmány azt mutatta, hogy a teszt 2 évesnél idősebb gyermekeknél alkalmazható a látens tuberkulózis diagnosztizálására, ugyanazokkal a teljesítményjellemzőkkel, mint a felnőttek.
Megjegyzés: A QuantiFERON TB helyettesíti a tuberkulin tesztet; mindkét tesztet nem szabad egyszerre használni.
2. Eszköz lehet aktív tuberkulózisban szenvedő betegek megfigyelésére. Vannak olyan tanulmányok, amelyek jelzik a teszt potenciális hasznosságát a tuberkulosztatikus kezelés hatékonyságának felmérésében, azáltal, hogy nyomon követik a felszabaduló gamma-interferon mennyiségét, amely idővel változik.
Egy tanulmány szerint a QuantiFERON általi értékelés 2 hónappal a terápia megkezdése után jelentős prediktív értékkel bír annak valószínűségével, hogy az intenzív kezelési szakasz végén a köpetkultúrák pozitívak maradnak.
3. Használható immunszuppresszív terápia előtt (pl. Anti-TNFα antitestekkel) vagy szervátültetés előtt a látens M. tuberculosis fertőzés kizárására.
aratás
Betegképzés - az immunszuppresszív terápiát (citosztatikumok) legalább 14 nappal a betakarítás előtt fel kell függeszteni.
Begyűjtött minta - vér jön.
Betakarítási konténer - vacutainer lítium-heparináttal.
Teszt térfogata - legalább 10 ml heparinizált vért.
Tesztstabilitás - a vérnek 12 óra (legfeljebb 16 óra) alatt kell megérkeznie a laboratóriumba, ahol a vizsgálatot elvégzik, és ebben az időszakban szobahőmérsékleten tartják. A minta hűtése ellenjavallt.
A bizonyíték elutasításának okai - a stabilitási tartományt meghaladó példányok, hűtött vagy fagyasztott minták.
Módszer és az eredmények értelmezése
A beteg heparinizált vérét 24 órán át inkubáljuk szintetikus peptidek keverékével együtt, amely az M. tuberculosis 3 specifikus fehérjét szimulálja: ESAT-6, CFP-10 és TB 7.7 (p4). Ezeket a fehérjéket a Mycobacterium tuberculosis minden törzse és a Mycobacterium bovis patogén törzsei termelik, de nem a BCG vakcinában szereplő törzsek. Így a QuantiFERON a tuberkulin tesztnél specifikusabb a M. tuberculosis fertőzés kimutatásában. Ha ezeknek a fehérjéknek a vérmintájában memória-limfociták vannak (ami sok évvel ezelőtti fertőzés esetén történik), akkor ezek a sejtek γ-interferont termelnek a specifikus antigénnel érintkezve. A plazmában felszabaduló y-interferon kvantitatív meghatározását rendkívül érzékeny enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálattal (ELISA) végezzük. Pozitív és negatív kontrollokat kell használni a teszt érvényességének biztosításához. A pozitív kontrollt a fitohemagglutinin (mitogén anyag) és a sóoldat negatív kontrollját jelölik (vakként használják a γ-interferon alapszintjének mérésére). A felszabaduló y-interferon mennyiségét NE/ml-ben fejezzük ki.
Az eredmények értelmezése
Eredmény negatív (felszabaduló γ-interferon mennyisége
Ilyen körülmények között kizárható a Mycobacterium tuberculosis fertőzése. Krónikus HIV-fertőzésben vagy súlyos immunhiányos betegség egyéb okaiban szenvedő betegeknél (immunszuppresszív terápia, bizonyos hematológiai állapotok: leukémia, limfóma, egyes szilárd daganatok: tüdő- vagy fej-nyak régió, cukorbetegség, szilikózis, krónikus veseelégtelenség) figyelembe véve a jelenlegi immunállapotot és más módszereket alkalmazva a fertőzés diagnosztizálására.
Egy nemrégiben végzett japán tanulmány szerint a QuantiFERON TB teszt hasznosabb a tuberkulózis fertőzés diagnosztizálásában immunhiányos betegeknél, mint a tuberkulin teszt. Tekintettel azonban arra, hogy az immunszuppresszív terápiában részesülő lymphopeniában szenvedő betegeknél megnövekedett arányú nem meggyőző eredmény született, az eredményeket körültekintően kell értelmezni ebben a betegcsoportban.
Negatív eredmény esetén azoknál az embereknél, akik nemrég kerültek kapcsolatba olyan betegekkel, akiknél a fertőző tuberkulózis formáját diagnosztizálták, ezt egy új teszt igazolja, amelyet az expozíciós időszak végétől számított 6-8 héten belül végeznek (mint a tuberkulin teszt esetében ).
Eredmény pozitív (felszabaduló γ-interferon mennyisége ≥ 0,35 NE/ml)
A pozitív eredmény azt jelzi, hogy M. tuberculosis fertőzött. A legtöbb esetben ezzel a teszttel nem lehet különbséget tenni a látens és az aktív fertőzés között.
Aktív tuberkulózis klinikai gyanúja esetén a mikrobiológiai diagnózis (mikroszkópia, tenyésztés) és a molekuláris biológia minden módszere érvényben marad.
Eredmény meggyőző
Olyan helyzetben fordul elő, amikor sem a mitogén pozitív kontroll validációs kritériumait nem sikerült elérni (nem megfelelő válasz
Határértékek és interferenciák
A teszt prediktív értéke az M. tuberculosis fertőzés prevalenciájától függ a vizsgált populációban. Minden eredményt a beteg klinikai és epidemiológiai összefüggésében kell értelmezni.