A dolgozat címe

Diplomamunka A diplomamunka címe A dohányzás hatása az egészséges felnőttek lipidprofiljára, valamint az oxidatív stressz kiválasztott paramétereire Szerző: Julia Pöschl kívánt tudományos fokozat Természettudományi Magistra (Mag.rer.nat) Bécs, 2011 Tanulmányszám a tanulmánylap szerint: A 474 Tanulmányozási terület a tanulmánylap szerint: Táplálkozástudományi okleveles tanulmány Témavezető: o. Dr. Ibrahim Elmadfa

III. Kor Köszönetnyilvánítás Ezúton szeretnék köszönetet mondani különösen szüleimnek és különösen édesanyámnak. Neki szentelem ezt a munkát, hogy szívből köszönjem meg neki a tanulmányaim során nyújtott korlátlan támogatást, türelmet és segítséget. Külön köszönet illeti Mr. o. Univ.-Prof. Dr. Ibrahim Elmadfa, aki átvette a dolgozat témáját és a barátságos támogatást munkám során, valamint társ-témavezetőmnek Dr. Elisabeth Fabian, aki a közlekedési balesete és a hosszú rehabilitációs tartózkodása ellenére mindig mellettem volt tanácsokkal és tettekkel. Végül azonban szeretnék köszönetet mondani legnagyobb példaképemnek, apámnak. Támogatása megerősített az álmaim valóra váltásában és a céljaim megvalósításában.

P kor VI 3.4.1. Módszer. 26 3.4.2. Felhasznált anyagok és felszerelések. 26 3.4.3. A meghatározás végrehajtása. 27 3.4.4. Értékelés. 28 3.5. Az oxidált LDL-koleszterin (oxldl) meghatározása. 29 3.5.1. Módszer. 29 3.5.2. Felhasznált anyagok és felszerelések. 29 3.5.3. A minták hígítása. 30 3.5.4. A meghatározás végrehajtása. 30 3.5.5. Értékelés. 30 3.6. Fejlett oxidációs fehérjetermékek (AOPP) meghatározása. 31 3.6.1. Módszer. 31 3.6.2. Felhasznált anyagok és felszerelések. 31 3.6.3. A meghatározás végrehajtása. 31 3.6.4. Értékelés. 32 3.7. Minőség ellenőrzés. 32 3.8. Statisztikai értékelés. 33 4. Eredmények. 34 4.1. Kor és nem szerinti megoszlás. 34 4.2. Dohányzási magatartás. 37 4.3. Antropometriai paraméterek. 40 4.3.1. Magasság. 42 4.3.2. Testsúly. 42 4.3.3. BMI. 44 4.3.4. Derékbőség. 44 4.3.5. Csípő kerülete. 45 4.3.6. W/H arány. 46 4.4. Lipid profil. 47 4.4.1. Teljes koleszterinszint. 47 4.4.2. HDL koleszterin. 48 4.4.3. Összes/HDL-koleszterin. 49 4.4.4. Trigliceridek. 49 4.4.5. LDL-koleszterin. 50 4.4.6. LDL/HDL hányados. 51 4.5. Paraméterek az oxidatív stressz meghatározásához. 52 4.5.1. Teljes antioxidáns kapacitás (TAC). 52 4.5.2. MDA. 53 4.5.3. AOPP. 54 4.5.4. oxldl. 55

P kor VII 5. Megbeszélés. 57 5.1. Az egész kollektíva figyelembevétele a nemek közötti különbségek tekintetében. 57 5.1.1. Lipid profil, antropometria és kardiovaszkuláris kockázat. 57 5.1.2. Dohányzás, oxidatív stressz és kardiovaszkuláris kockázat. 60 5.2. A dohányzás és hatása a lipidprofilra, az antropometriára és a kardiovaszkuláris kockázatra. 64 6. Következtetés. 66 7. Összegzés. 69 8. Összegzés. 71 9. Irodalomjegyzék. én

IX. Életkor ábra: 2-1. Ábra: Az érelmeszesedéses gyulladásos reakciók patogenezise. 13 2-2. Ábra: Oxidatív stressz. 18 3-1. Ábra: A dohányzási viselkedés megoszlása. 21 4-1. Ábra: Különbség a nők és a férfiak között a lipidprofil és az összes antioxidáns kapacitás tekintetében (*: nőknél p 0,85, férfiaknál pedig WHR> 1,00, hasi elhízás és így fokozott kardiovaszkuláris kockázat ( ELMADFA, 2004). A zsigeri és a szubkután testzsír csökkenése a kardiovaszkuláris kockázati tényezők csökkenéséhez vezet, és néha javítja a lipidprofilt, a vérnyomást, a vércukorszintet, a HbA1cs-t és az inzulinrezisztenciát (HAUSTEIN, 2004).

5. életkor Ausztria statisztikai adatai szerint Ausztriában a férfiak 44% -a és a nők 55% -a normális súlyú. A férfi populáció 43% -át tekintik túlsúlyosnak, 12% -át pedig elhízottnak is. Az elhízott női populációban ez az arány 13%. A 60–74 éves korosztályban a túlsúly és az elhízás gyakorisága mindkét nemnél a legmagasabb (férfiak: 19%; nők: 21%). Ha most összevetjük a BMI 2006/2007-es felmérésének eredményeit az 1999-es mikrocenzusos speciális felmérési kérdésekkel az egészségre vonatkozóan, akkor a következő következtetésre jutottunk: Az elhízottak jelentős növekedése mindkét nemben és minden korcsoportban megfigyelhető. Az alsúly mértékét tekintve (BMI 200 mg/dl vagy 5,2 mmol/l trigliceridek:> 160 mg/dl vagy 1,8 mmol/l LDL-koleszterin:> 130 mg/dl vagy 3,4 mmol/l l HDL-koleszterin: ph = 7,4 3.3 A malondialdehid meghatározása a plazmában 3.3.1 Módszer A malondialdehid a lipidperoxidáció bomlásterméke. Ezért fontos módszer a biomolekulák oxidatív károsodásának meghatározására. Az MDA plazmakoncentrációját a E munka során meghatároztuk HPLC segítségével (WONG et al., 1996).

24. oldal 3.3.2. Felhasznált anyagok és eszközök 3-3. Táblázat: Eszközök az MDA meghatározásához Oszlop: LichroCART 125-4 Lichrosher 100 RP-18,5 µm, Merck védőoszlop: LichroCART 250-4 Lichrosher 100 RP-18, 10 µm, Merck LaChrom Merck Hitachi Kromatográfiás rendszer szivattyú L-7100 Fluoriscence spektrofotométer F-1050 Integrator D-7500 3-4. Táblázat: Reagensek a tetraetoxipropánhoz kapcsolódó MDA meghatározó vegyi anyagokhoz Sigma No. T-9889 Ethanol pa Riedel de Haën No. 32221 foszforsav 85% Riedel de Haën No. 30417 tiobarbitursav Sigma No. T-5500 Metanol Merck LiChrosolvo No. 1.06007.2500 Kálium-dihidrogén-foszfát Riedel de Haën No. 04245 3-5. Táblázat: Az MDA meghatározásának HPLC-körülményei A mozgófázis: B = 60:40 A: Foszfátpuffer (6,8 g kálium-dihidrogén-foszfát előzetes feloldása 800 ml desztillált vízben; pH = 6,8 beállítása 1 M KOH-val; 1 l-es töltés desztillált vízzel; szűrő) B: metanol injekciós térfogat 20 µl áramlás 1,0 ml/perc Nyomás 85 bar Érzékenység 20 detektálás emissziós hullámhossz: 563 nm gerjesztés w hullámhossz: 532 nm futási idő 5 perc

Page 28 3-8. Táblázat: Reagensek PBS ABTS pufferoldat Standard plazma mioglobin H 2 O 2 vakpróba 410 µl 400 µl - - 20 µl 170 µl standard 410 µl 400 µl 10 µl - 20 µl 170 µl minta 400 µl 400 µl - 20 µl 20 µl 170 µl, miután hozzáadtunk H2O2-t a vizsgálati keverékhez, a kihalás menetét fotometrikusan, 734 nm-en mértük 6 perc alatt. Ennyi idő alatt a legmagasabb Trolox-standard gátolhatja a reakciót. 3.4.4. Értékelés Az 5 standard és a minták végpontjait a vakpróba százalékában fejezzük ki. (Üres érték absz. - standard absz.)/Üres érték absz. = [%] (Üres érték absz. - minta absz.)/Üres érték absz. = [%] Az értékelést a standard szintek lineáris regressziójával hajtjuk végre, mivel közvetlen összefüggés van a standardok% -os aránya és koncentrációja között. A minta antioxidáns kapacitását mmol Trolox egyenértékben (Trolox-Ä)/l adjuk meg. 3-9. Táblázat: Standard koncentrációk a TAC számának meghatározásához Trolox [2,5 mm] PBS pufferkoncentráció [µl] [µl] [mmol/l] Standard 1 100 400 0,5 Standard 2 200 300 1 Standard 3 300 200 1,5 standard 4 400 100 2,0 standard 5 100-2,5

P a g e 32 3.6.4. Értékelés Az AOPP koncentrációt egy közvetlen, lineáris standard görbe alkalmazásával értékeltük, amelyet hat standardból állítottunk elő (koncentráció: 0 µmol/l 100 µmol/l). 3.7. Minőségbiztosítás Az alkalmazott módszerek minőségének és pontosságának érvényesítése érdekében mind az intravizsgálatot (ugyanannak a mintának tíz meghatározása), mind az inter assay-t (ugyanazon minta meghatározása öt különböző napon) minden egyes kimutatásra elvégeztük (3.12. Táblázat). 3-12. Táblázat: Az intra assay és az inter assay paraméter variációs együtthatói (CV) Intra Assay CV (%) Inter assay CV (%) összes lipid 2,9 4,3 összes koleszterin 2,1 2,3 HDL koleszterin 1,4 4, 3 trigliceridek 1,6 2,4 MDA 0,4 1,5 TAC 0,3 0,8 AOPP 1,0 1,4 oxldl 1,4 3,6

33. oldal 3.8. Statisztikai értékelés Az elemzési eredmények statisztikai kiértékelését az SPSS 16.0 for Windows statisztikai szoftverrel végeztük. A normál eloszlás és a variancia homogenitásának egyedi paramétereinek ellenőrzésére Kolmogorov-Smirnov tesztet végeztünk. A normál eloszlású jellemzők átlagos összehasonlítását a t-teszttel végeztük független mintákhoz, míg a Mann-Whitney U-tesztet használtuk olyan adatokhoz, amelyek nem voltak normálisan elosztva. A lineáris regressziós elemzéseket Pearson szerint végeztük.

P életkor 47 1,2 1 [a] [b] 0,8 W/H arány 0,6 0,4 0,2 0 Női férfiak Dohányzók Nem dohányzók Ex-dohányzók 4-6. Ábra: A W/H arány összehasonlítása az egyes csoportok között a: nők nők p 200mg/dl vagy> 5,2 mmol/l. A teljes kollektív értéket figyelembe véve az érték átlagosan 5,2 ± 1,2 mmol/l volt, így a vizsgált személyek 51% -a meghaladja az ajánlott referencia-tartományt. A nemek között alig volt különbség, de a dohányzók 56% -ánál, a nemdohányzók 49% -ánál és a volt dohányzók 46% -ánál nőtt az érték. Jelentősen pozitív korrelációkat is találtunk (p 5 van megadva. Ezt az értéket a vizsgált személyek csak 12% -ánál túllépték, 36% -uk nő és 64% -uk férfi. A hányados jelentősen különbözött a nemek között (p 160 mg/dl és 1, 8 mmol/l, ami így megnövekedett kardiovaszkuláris kockázatot jelent. A nemek közötti összehasonlításban a vizsgált férfiak átlagos értéke magasabb volt, mint a részt vevő nőké (p 1,8 mmol/l 10% volt a nőknél, a férfiaknál (20%) kétszer olyan magas volt, ami jelentős különbség az átlaghoz képest-

Nem sikerült meghatározni, hogy a tesztalany dohányzónak, volt dohányosnak vagy szigorúan nem dohányzónak írja-e le magát az 50. triglicerid érték alapján (4.4. Táblázat). Ugyanakkor a volt dohányzók (22%) és a dohányosok (16%) között magasabb volt a kockázat a nemdohányzókkal (8%) szemben. E vizsgálat eredménye szignifikáns összefüggést mutat a súly (GK: r = 0,311, p 130 mg/dl vagy 3,4 mmol/l között), ami a résztvevő alanyok több mint 30% -ánál volt., 4 mmol/l) és az ezzel járó szív- és érrendszeri megbetegedések fokozott kockázata kifejezettebb volt a férfi vizsgálatban résztvevőknél. A férfiak csak alig 60% -ánál és a nők 71% -ánál volt dohányzó, p