Absztrakt szöveg 10. DGfZ Szimpózium 1997

10. Heidelberg-szimpózium
1997. október 23-25

DGfZ kivonatok

Az összefoglalókat a következõk nyomtatják: A DGZ Heidelbergi Találkozók közleményei, DKFZ, Heidelberg 1997, ISSN 0949 - 5347

=== SZÓBELI BEMUTATÁSOK ===

=== APOPTOSIS ===

=== KÉPELEMZÉS ===

7. SPEKTRÁLIS PONTOSSÁGTÁVOLSÁG MIKROSZKÓPIA A GENÓMKUTATÁSBAN
C. Cremer * (1,2), H. Bornfleth (1), J. Bradl (1), P. Edelmann (1), A. Esa (1), H. Münch (1), J. Rauch (1) ), B. Rinke (1), L. Trakhtenbrot (3), M. Hausmann (1), T. Cremer (4,2) (1) Alkalmazott Fizikai Intézet és (2) Interdiszciplináris Tudományos Számítástechnikai Központ (IWR), Heidelbergi Egyetem, D-69120 Heidelberg; (3) Hematológiai Intézet, Tel. Hasomer/Izrael; (4) Humángenetikai Intézet a Müncheni Egyetemen, D-80333 München.
* Előadó szerző
Új módszertani megközelítéseket vázolnak fel, a multispektrális molekuláris biológiai jelölési technikák és az új optoelektronikai folyamatok kombinációjának segítségével, például konfokális lézeres pásztázó fluoreszcens mikroszkóppal vagy kvantitatív lézerrel stimulált hullámmezős fluoreszcens mikroszkóppal, "nagy pontosságú spektrális mikroszkóppal", "nagy pontosságú, nagy felbontású mikroszkópikus, nagy felbontású mikroszkóppal" Tárgyak megvalósítása. Hosszú távon felmerülnek a lehetőségek a genom térbeli topológiájának fénymikroszkópos vizsgálatának elvégzésére háromdimenziósan konzervált ("ép") sejtmagokban "ekvivalens" molekuláris felbontással és ezáltal hozzájárulva az emberi genom szerkezet-funkció kapcsolatának mélyebb megértéséhez.

=== KLAUS GOERTTLER-DÍJ ===

=== STANDARDIZÁLÁS ÉS MINŐSÉG ELLENŐRZÉSE ===

=== PERIFERÁLIS VÉR ÉS CSONTMÁR ===

32. ANTIGÉN-PEPTIDEK FOLYAMATOS CITOMETRIKAI ELEMZÉSE ANTIGEN-BEMUTATÓ SEJTEKEN
D. Kunkel, A. Scheffold és A. Radbruch,
Berlini Német Reuma Kutatóközpont
Az immunreakció szabályozásához a T segítő limfocitáknak fel kell ismerniük specifikus antigénjüket antigén peptidek formájában, amelyeket antigént bemutató sejtek dolgoznak fel és az MHC II. Osztályú molekulákon mutatják be.
Haptenizált ovalbumin-peptid felhasználásával áramlási citometriával vizsgáltuk ennek a peptidnek a megjelenését. Kimutatták a peptid specifikus kötődését az MHCII molekulához. Ezenkívül meghatároztuk a felvételhez és megjelenítéshez szükséges körülményeket, valamint a peptidkoncentráció és a sejtenként feltöltött MHCII molekulák száma közötti kapcsolatot.
Eredményeink azt mutatják, hogy az áramlási citometriával specifikus peptidek bemutatása alapján lehet detektálni és szétválasztani az antigént bemutató sejteket.

A limfocitákat a CPB szelektíven szűri. Arra a következtetésre jutunk, hogy a műtét során CD3 sejtek 25 54

a fenotípus a szervezet diszkrét részeibe vándorol (homing). A citokinek termelésének és kiválasztásának fokozott képessége miatt ezek a sejtek részben helyi gyulladásokat és posztoperatív CLS-t indukálhatnak. (A szász tudományos és művészeti minisztérium támogatásával).

=== KÖRNYEZETI ELEMZÉS ===

=== ÚJ MÓDSZEREK ÉS ALKALMAZÁSOK ===

=== POSZTER ÜLÉS ===

53. Mennyire vastag az Ön szekciója? - EGYSZERŰ MÓDSZER A PARAFFIN SZEKCIÓK SZEKCIÓVASTAGSÁGÁNAK ÉRTÉKELÉSÉHEZ
Gschwendtner A., Lorenz M., Mairinger T.
Dpt. Patológia, Innsbrucki Egyetem, Innsbruck, AUSZTRIA
A bármilyen kvantitatív elemzéshez (pl. DNS - citometria, IHC-festés - kvantifikálás, sztereológiai módszerek) használt paraffinszelvények vastagságának pontos mérése fontos a megbízható eredmények eléréséhez. Noha a metszet vastagsága nagy pontossággal és pontossággal mérhető konfokális lézeres mikroszkóppal, ezek a műszerek drágák és sok laboratórium számára nem könnyen elérhetők. Ez a cikk egy egyszerű módszert ismertet a képelemzéshez ténylegesen használt, arányosan feldolgozott paraffin szakasz vastagságának számszerűsítésére.
E cél elérése érdekében az adott szakasz két részre oszlik, a nagyobbat a kvantáláshoz használják, míg a kisebbet újból beágyazzák, és a vastagságán keresztül reszekcionálják. Az újból beágyazott szakasz vastagsága könnyen mérhető bármilyen fénymikroszkóppal elérhető hosszúságmérő eszközzel.

67. A KROMOSÓMA TERÜLETEK VÁLTOZHATÓK A SEJTKÖRBEN
S.Monajembashi, H.Dittmar, C.Bock és K.O. Greulich
Molekuláris Biotechnológiai Intézet, Beutenbergstrasse 11, D-07745 Jena, Tel./Fax: ** 49-3641-656409/10
Az interfázisú magban a kiválasztott kromoszómák (2, 7, 9, X) térbeli összefüggését és formáját fluoreszcenciával szituációs hibridizációval (FISH) vizsgáltuk. Hagyományos epifluoreszcens mikroszkópiát és képfeldolgozást alkalmaztunk a teljes kromoszómafestő próbák vizualizálására, amelyeket vagy CY3-mal, vagy CY5-vel festettek. Mivel a limfociták nincsenek szinkronizálva, a fedőlemezen megtalálhatók a különböző sejtciklus-fázisokban lévő interfázisos magok.
Kétféle kép figyelhető meg: a) néhány esetben a kromoszóma-domének nagyon kompaktak és egyértelműen el vannak választva egymástól, és páros homológokba rendeződnek. A kromoszómák egy körön jelentek meg a mag külső térfogatában. Valószínűleg ezek a magok képviselik a mitózishoz közeli helyzetet. b) a legtöbb esetben a domének nagyobbak és lazábban vannak csomagolva. A sejtmag sokkal nagyobb régióit töltik meg. Ezek az eredmények a kromoszóma területek jelentős dinamikáját jelzik a sejtciklus alatt.

71. AZ ARABIDOPSIS THALIANA INTERFÁZIS-KROMOSZOMÁJAI
Tatiana 1. Szamojlova, Armin Meister és Simon Misera
Növénygenetikai és Növénynövény-kutató Intézet, D-06466 Gatersleben
Az Arabidopsis thaliana különféle aneuploid vonalainak DNS-tartalmát áramlási citometriával határoztuk meg szuszpenzióban DAPI-vel festett interfázisos sejtmagokon és összehasonlítottuk a vad típussal. Az összes vonal eltérése a vad típustól nagyon könnyen reprodukálható volt, és lehetővé tette az egyes Arabidopsis kromoszómák vagy egyes kromoszómakarok relatív DNS-tartalmának becslését.
A legkisebb telotrisommal rendelkező vonal kivételével (Tr 3A) valamennyi vizsgált triszóma szignifikáns különbséget mutatott a vad típushoz képest. Ebből arra lehet következtetni, hogy a jelen kísérleti körülmények között olyan különbségek mutathatók ki, amelyek meghaladják az Arabidopsis genom 3% -át.
Az egyes triszómák és a vad típus közötti különbségek összege jól egyezett a haploid kromoszóma-készlet várható DNS-tartalmával.

74. A GALECTIN -1 MEDIÁLT IMMUNOSSZUPRESSZIÓ TÁRSADALOMMAL APOPTOSIS INDUKCIÓJÁVAL
U. Schulz 1, p. Neels 2, J. Brock 2, H. Walzel 2
Immunológiai Intézet 1 Orvosi Biokémiai Intézet 2, Rostocki Egyetem, Németország
A placentális galektin -1, az oldható 13-galaktozid kötő fehérjék galektincsaládjának tagja, gátolja az emberi perifériás vér limfocitáinak alloantigén - és mitogén által indukált proliferációját. A humán leukémiás T-sejtvonal galektin-1 által közvetített proliferáció-gátlása A Jurkat összefüggésbe hozható az intracelluláris kalciumkoncentráció növekedésével ([Ca 2+] i) és az apoptózis indukciójával.
Az áramlási citometriás mérések azt mutatták, hogy az lektin idő- és koncentrációfüggő növekedést indukál a foszfatidil-szerin expresszióban, amint azt az annekdin-V FITC/PJ festéssel detektáltuk. Megállapították, hogy ezek a foszfatidil-szerin expresszióra gyakorolt hatások laktóz jelenlétében jelentősen csökkentek. A DNS-fragmentáció az agarózgélekben létra mintaként jelent meg, miután Jurkat T-sejteket galektinnel -1 6 órán át inkubáltunk. Ezek az eredmények azt jelzik, hogy a galektin -1 az aktivált T-sejtekben apoptózis indukálásával modulálja az immunválaszt.