Lupus antikoaguláns - Synevo
Általános információk és ajánlások a lupus antikoaguláns meghatározására
A lupus típusú antikoagulánsok a foszfolipid-fehérje komplexek elleni antitestek. In vitro beavatkoznak a foszfolipidfüggő koagulációs vizsgálatokba, amelyek meghosszabbodásához vezetnek (az aktivált tromboplasztin idő aPTT leggyakrabban használt része) 1; .
In vivo a lupus típusú antikogulánsok jelenléte a trombotikus események (trombofília) fokozott kockázatával jár együtt 3. A trombózis prevalenciája lupus antikoagulánsokkal rendelkező betegeknél 24-36%; a végtag mély trombózisa és a tüdőembólia dominál. Az ismétlődő vetélésekben szenvedő betegeknél az esetek mintegy 10% -ában vannak lupus antikoagulánsok.
A lupus antikoagulánsok belső heterogenitása miatt a laboratóriumi diagnózis gyakran nehéz. Az alkalmazott teszteknek képesnek kell lenniük megkülönböztetni az antikoaguláns lupus aktivitással rendelkező antitesteket az antikoaguláns faktor antitestektől, a faktorhiánytól és a heparintól, mivel mind a négy állapot meghosszabbíthatja az aPTT tesztet. A gyakorlatban a koagulációs faktorokban hiányos plazmákat könnyű azonosítani, mivel a normál plazma hozzáadása normalizálja az alvadási időt in vitro. Az izolált aPTT assay azonban nem képes egyértelműen megkülönböztetni a lupus antikoagulánsokat tartalmazó plazmát és az antikoagulációs faktort és/vagy heparin antitesteket tartalmazó plazmát. .
2009-ben a Nemzetközi Hemostasis és Trombózis Társaság felülvizsgálta és módosította a lupus antikoaguláns (LA) kimutatására vonatkozó ajánlásokat. Így javultak a jelen vizsgálatban megjelölt betegek kiválasztási kritériumai, és laboratóriumi vizsgálati algoritmust is kidolgoztak.
Az LA vizsgálatát azokra a betegekre kell korlátozni, akiknél jelentős az antifoszfolipid szindróma (APS) valószínűsége, vagy akiknek az aPTT megmagyarázhatatlanul meghosszabbodik egy rutinellenőrzés során.
Nem provokált mélyvénás trombózis vagy megmagyarázhatatlan artériás trombózis fiatal betegeknél (4 .
Betegképzés - ideális esetben a mintát az antikoaguláns kezelés megkezdése előtt kell venni .
Begyűjtött minta - vénás vér .
Betakarítási konténer - vákuumozó 0,105 M Na citráttal (1/9), kék/zöld fedél 3 .
Betakarított mennyiség - amíg a vákuum megengedi 3 .
A bizonyíték elutasításának okai - nem megfelelő minta (a porszívón feltüntetett szint alatt); hemolizált példány; alvadék jelenléte a mintában 3 .
Betakarítás után szükséges feldolgozás - centrifugálás 15 percig 2500 g-nál a plazma előállításához (a plazmának nagyon alacsony a vérlemezkék száma, T 1; 3 .
A minta stabilitása - az elválasztott plazma szobahőmérsékleten 4 órán át stabil, 1 hónapig -20 ° C-on 3 .
A Snevo Laboratory elfogadta a CLSI 2014 ajánlását, hogy az LA kimutatási teszteket a szűrés, a megerősítés, a "keverési teszt" sorrendjében végezzék el, utóbbiakat opcionálisan, az elemzett eset sajátosságaitól függően.
szűrés: dRVVT képernyő + aPTT-LA (LA-re érzékeny aPTT); ha az eredmény mindkét tesztben negatív, akkor LA-t negatívan jelentik; ha az egyik vagy mindkét tesztben pozitív eredményt kapunk, megerősítő vizsgálatokat kell használni.
Megerősítés: ha az aPTT-LA pozitív, akkor hatszögletű fázisú foszfolipid semlegesítési tesztet kell végezni; ha a dRVVT képernyő pozitív, akkor a dRVVT 3. megerősítés kerül végrehajtásra .
Referenciaértékek - negatív lupus antikoaguláns 3 .
Megjegyzés: Az antifoszfolipid szindróma diagnosztizálásához szignifikáns 2 pozitív eredményt kapunk 12 hetes időközönként 3; 4 .
Határértékek és interferencia
Az akut trombotikus epizód során gyűjtött mintákból származó eredményeket körültekintően kell értelmezni, mivel a betegek antikoaguláns rohamkezelésen esnek át, és az akut fázisú reagensek (pl. FVIII) értéke magasabb lehet 4. Kis molekulatömegű heparinnal (LMWH) kezelt betegeknél a teszt csak az utolsó adag után 12 órával vett mintákon végezhető el. Ha a tesztet orális antikoagulánsokkal kell elvégezni a betegeknél, akkor javasoljuk, hogy hagyják abba őket és adják az LMWH 4; 5-et, mivel a K-vitamin antagonisták hamis pozitív eredményeket válthatnak ki. .
A> 1 NE/ml-es heparinszint interferenciát okozhat (hamis pozitív értékek), az alacsonyabb szinteket ellensúlyozza a reagensekben található semlegesítő anyagok 3 .
Is, dabigatrán (trombin inhibitor), valamint a közvetlen Xa faktor inhibitorok (rivaroxaban vagy apixaban) hamis pozitív értékeket okozhat a lupus antikoaguláns esetében, ezért az ezen antikoagulánsokkal kezelt betegek tesztelése nem ajánlott 6 .