Szérum fehérje elektroforézis - Synevo
Általános információ
A szérumfehérjék különböző funkciókat látnak el a testben:
• puffer rendszerek alkatrészei;
• immunológiai szerek (immunglobulinok);
• hordozó szerep, bizonyos ionok és molekulák (haptoglobin, prealbumin, transzferrin) transzportjának biztosítása;
• különféle proteolitikus enzimek (antiprotézisek: alfa1-antitripszin, alfa2-makroglobulin) aktivitásának szabályozásának szerepe;
• szerep az onkotikus nyomás szabályozásában 2 .
Az orvosi biokémiai laboratóriumokban alkalmazott jelenlegi módszer a szérumfehérjék szétválasztására az elektroforézis. Szilárd hordozókat és lúgos pH-értékeket alkalmaznak, amelyeknél az összes fehérjekomponens negatív töltésű és a pozitív pólusba vándorol. Az elektroforegramon a festés után a fehérjék sávok formájában jelennek meg, amelyek optikai sűrűségét megmérik, és mindegyik sáv maximális abszorpcióval rendelkezik. Elektroforézissel a fent említett körülmények között öt frakciót kapunk: szérumalbumin, a1, a2, b, g - globulinok 3. Egyes elektroforézis rendszerek megkülönböztethetik a b zónát két különálló b1 és b2 sávra, így összesen 6 fehérjefrakciót eredményeznek.
Az albumin, a1 és b homogén, jól körülhatárolható sávok formájában jelennek meg. az a2 és a g diffúz sávként jelenik meg, és a g frakció középső részén egy intenzívebb színű terület jelenik meg .
Ajánlások a szérumfehérje elektroforézishez - monoklonális gamapathiák kimutatása; a szérumfehérjék és a táplálkozási állapot értékelése 3 .
Betegképzés - éhgyomorra (éhgyomorra) vagy étkezés után 1 .
Begyűjtött minta - vér 1 .
Betakarítási konténer - antikoaguláns nélküli vakutainer szétválasztó géllel/anélkül 1 .
Betakarítás után szükséges feldolgozás - centrifugálással elválasztjuk a szérumot 1 .
Teszt térfogata - legalább 0,5 ml ser 1 .
A bizonyíték elutasításának okai - hemolizált vagy 2-8 ° C-on nem tárolt szérum 1 .
A minta stabilitása (az ország laboratóriumaival kapcsolatos) - az elválasztott szérum szobahőmérsékleten 4 napig vagy 2-8 ° C-on 1 hétig stabil .
Munkamódszer (az ország laboratóriumaihoz kapcsolódik)- elektroforetikus (agar gélben), majd a kapott frakciók denzitometrikus letapogatása 1 .
Referenciaértékek (az ország laboratóriumaihoz kapcsolódnak) - 2 éves kortól függenek
A 6 frakciót elválasztó rendszer esetében a következő referenciaértékeket kell használni:
A minta elutasításának okai (a központi laboratóriumhoz kapcsolódnak): a minta hemolizált vagy 2-8 ° C-on nem tárolható
A minta stabilitása (a központi laboratóriumhoz kapcsolódik): 10 nap 2-8 ° C-on, 2 hónap -20 ° C-on
Munkamódszer (a központi laboratóriumhoz kapcsolódik): Kapilláris elektroforézis szabad oldatban
Referenciaértékek (a központi laboratóriumhoz kapcsolódóan):
| Albumin | 58,9–73,4 | 57,4–71,4 | 57.4- 69 | 57,5- 67,7 | 57.1- 67.2 | 55,8 - 66,1 |
| Alfa-1 globulin | 3,2–11,7 | 3- 5 | 3,2–5,4 | 3.3- 5.4 | 3,2–4,9 | 2,9 - 4,9 |
| Alfa-2 globulin | 10.6–14 | 10,2–16,1 | 10,7–15,5 | 10–14,8 | 8.9-13 | 7.1- 11.8 |
| Béta-1 globulin | 4,8–7,9 | 5,3–6,9 | 5.6 - 7 | 5.2–7 | 5,1–6,9 | 4,7–7,2 |
| Béta-2 globulin | 2.1- 3.3 | 2.1– 3.6 | 2.3–3.5 | 2,6–4,2 | 2,9–5,2 | 3,2–6,5 |
| Gamma globulin | 3,50–9,7 | 4.2–11 | 5.8- 12.1 | 7,7–14,8 | 9,8–16,9 | 11.1–18.8 |
Az eredmények értelmezése 3
Az eredmények értelmezésének megkönnyítése érdekében a komponens fehérjékkel mind az 5 frakciót leírjuk: (lásd 8.1.2. Ábra) 2
A csökkent szérumalbumin (hipoalbuminémia) különféle kóros állapotokban fordul elő, és különböző jelentése van (alultápláltság, felszívódási zavar, nefrotikus szindróma, neoplazmák). Az dehidratáció után az albumin mennyisége megnő. Különleges esetekben egy további sáv található az albumin vándorlási területén, néhány klinikai jelentőségű genetikai variáció (aloalbuminemia és bisalbuminemia) miatt.
Az 1. zóna főként az alfa1-antitripszin szérumkoncentrációját tükrözi, így ennek a frakciónak a csökkenése bizonyos tüdőbetegségekkel (korai kezdetű tüdőtágulat) és májban (újszülöttkori hepatitis) társult alfa1-antitripszin-hiányban mutatkozik meg. A növekedést minden gyulladásos reakcióban rögzítik ("akut fázisú reagens"). Ritka esetekben további széles sáv megszerzése ezen a területen alfa-fetoprotein jelenlétére utalhat.
A 2. zóna 2 fehérjekomponensből áll: alfa2 makroglobulinból és haptoglobinból.
Az a2 fokozódása akut fertőzések, akut reumás ízületi gyulladás, arteritis, nephroticus szindróma, cukorbetegség, daganatok esetén fordul elő; ennek a frakciónak a csökkenése súlyos akut hasnyálmirigy-gyulladásban, hepatocelluláris elváltozásokban, disszeminált intravaszkuláris koagulációs szindrómákban, hemolitikus vérszegénységekben, megaloblasztos vérszegénységekben mutatható ki.
A b zóna 2 különálló sávból áll: b1 a transzferrin és a b2, amely a C3 és C4 komplement frakcióit tartalmazza. Ennek a zónának a harmadik komponense a béta-lipoprotein, amelynek sávja átfedésben lehet a transzferrin vagy a C3-szal, vagy a béta-gamma zónában helyezkedhet el.
A b globulin szérumszintje megnövekszik a vashiányos vérszegénység és az epe-cirrózis, valamint csökken az autoimmun betegségek (SLE), nephrosis, májbetegségek, neoplazmák, akut és krónikus fertőzések száma. Néhány esetben az IgA típusú myeloma multiplex esetében ezen a területen monoklonális komponens jelenléte mutatható ki.
A g zóna A gamma-globulinok a legfontosabb globulinok. Ez a kategória tartalmazza az immunglobulinokat (IgG, IgA, IgM, IgD és IgE). Az általuk elszenvedett rendellenességeket vagy különböző hiányosságok, vagy poliklonális vagy monoklonális hipergammaglobulinémia fordítják le.
A g globulinok százalékos aránya csökken az agamaglobulinémiában, a hipogamaglobulinémiában és a nephrotikus szindrómákban. A hipogamaglobulinémia lehet veleszületett vagy szerzett, és könnyen kimutatható szérumfehérje-elektroforézissel, ha az immunglobulinok fő három csoportjának koncentrációja alacsony (IgG, IgA és IgM). A hipogamaglobulinemia jelenléte felnőtteknél további vizsgálatokat igényel egy esetleges limfoproliferatív betegség (könnyű láncú mielóma, krónikus limfocita leukémia, limfómák) kimutatása érdekében.
A gamaglobulinok poliklonális növekedése krónikus immunfolyamatot jelez, amely májbetegséggel (krónikus aktív hepatitis, cirrhosis), kollagén betegséggel (SLE, rheumatoid arthritis), neoplazmákkal (pl. Hodgkin-kór), krónikus myelo-monocytás leukémiával társul. Ezekben az esetekben a hipergammaglobulinémia nagyszámú, immunglobulinokat felszabadító plazmasejt-klón aktiválódásának köszönhető. Meg kell említeni a béta-gamma "híd" alkoholos cirrózis jellegzetes megjelenését, amelyet a gél intenzív színű területként jelenít meg a béta és a gamma zóna között.
Előfordul, hogy a gamma-területen oligoklonálisnak nevezett kicsi, keskeny sávokat láthatunk hepatitisben, immun komplex betegségében, szerzett immunhiányos szindrómában, angioimmunoblasztikus lymphomában szenvedő betegeknél.
A monoklonális gamapathiák nagyszámú klinikai és biológiai állapotot tartalmaznak, amelyek általában rosszindulatú daganatokkal (myeloma multiplex, Waldenström-kór, amiloidózis, limfómák) társulnak, de néhány jóindulatú állapottal vagy akár kóros elváltozás hiányával is (meghatározatlan jelentőségű monoklonális gamapathiák). Ezekben az esetekben monoklonális komponenst (M sávot) detektálnak a fehérje elektroforézis során, amely egyetlen plazma sejt klón szaporodásából származik. A gélen a monoklonális komponensek keskeny, világosan meghatározott sávok formájában jelennek meg, és a denzitometrikus pásztázás után jellegzetes „csúcsokat” kapnak, amelyek bárhol megtalálhatók az alfa és a gamma zóna között, a változó elektroforetikus mobilitás miatt de gyakran a gamma zónában.
A monoklonális immunglobulinok szerkezetileg és biokémiailag homogének, egyetlen típusú könnyű láncból (kappa vagy lambda) állnak. Komplett immunglobulinok vagy csak azok alegységei (pl. Könnyű monoklonális láncok, úgynevezett Bence-Jones fehérjék) szabadulhatnak fel a keringésbe. A monoklonális komponens jelenlétét a páciens végső elemzési értesítőjében fogjuk meghatározni, ajánlással a szérumfehérje elektroforézis elvégzésére 1-3. .
Az alábbi táblázat összefoglalja a bemutatott információkat: