A BVD asszociációja a psdacine PDD szindrómával

BVD összefüggés a PDD szindrómával a Psitaccine-ban

Első közzététele: 2016. május 9

Szerkesztői csoport: MEDICHUB MÉDIA

Absztrakt

A proventrikuláris dilatációs betegség (PDD) a madarak gyulladásos betegsége, amely elsősorban a felső és a középső emésztőrendszer vegetatív idegeit érinti. Az esetek általában gyomor-bél traktus diszfunkcióját mutatják be, mint például dysphagia, regurgitáció és emésztetlen táplálék jelenléte a székletben. Összesen 54, különböző fajokhoz tartozó pszichiáter madár (6 Amazona aestiva, 1 Amazona ventralis, 7 Ara ararauna, 4 Ara macao, 12 Psittacus erithacus, 2 Cacatua galerita, 1 Cacatua alba, 2 Cacatua sulphureus, 1 Pionis menstruus, 2 pioniták) leucogaster, 11 Psittacula krameri, 5 Psittacula eupatria) bekerültek a vizsgálatba. Az ABV jelenlétének PCR módszerekkel történő szűrése 47 fertőzött állatot azonosított, amelyek pozitív eredményt értek el a vizsgálatokban. A többi madár negatív volt ezekben a vizsgálatokban. Megfigyelték azt is, hogy a fertőzött papagájok különféle szerveiben bőségesen vannak jelen fermentációs élesztők.

Összegzés

A dilatált proventricularis betegség (PDD) egy gyulladásos állapot, amely a felső és középső emésztőrendszer vegetatív idegeiben élő madarakat érinti, a betegeknél általában gyomor-bél traktus diszfunkciói vannak, például dysphagia, regurgitáció és emésztetlen táplálék jelenléte a székletben. 54 különböző fajhoz tartozó psittacine madár (6 Amazona aestiva, 1 Amazona ventralis, 7 Ara ararauna, 4 Ara macao, 12 Psittacus erithacus, 2 Cacatua galerita, 1 Cacatua alba, 2 Cacatua sulphureus, 1 Pionis menstruus, 2 Pioes leucogaster, 11 Psittacula krameri, 5 Psittacula aupatria) voltak a jelen vizsgálat alanyai. A madár-született vírus (AVV) jelenlétének meghatározására szolgáló PCR-szűrési módszerek 47 pozitív fertőzéses esetet azonosítottak. A többi alany negatív eredményt mutatott. A fertőzött papagájok különféle szerveiben fermentatív élesztők bőséges jelenlétét is megfigyelték.

Tanulmányok kimutatták, hogy a vírusnak számos olyan genotípusa létezik, amelyek főleg bizonyos papagájfajokat érintenek, és amelyek eltérő elváltozási képet és evolúciót okoznak. A mai napig a kutatások még nem tisztázták az egyes genotípusok előfordulását a papagájpopulációkban, és nem tudtak egyértelmű különbséget tenni egy adott genotípus és egyes papagájfajok között. A statisztikai vizsgálatokat viszonylag nehéz elvégezni, mert kiderült, hogy ugyanaz a genotípus különféle fajokból izolálható (különösen azoknál a gazdaságoknál, ahol több papagájfaj van, a vírus genotípustól függetlenül bármely fajhoz továbbterjed), és sok esetben két vagy több genotípust izolálnak ugyanattól az egyéntől. Ezenkívül a laboratóriumi elemzések feltárják a vírus jelenlétét (sok esetben az eredmény pozitív születési vírusként jelenik meg) genotípusra való hivatkozás nélkül.

A laboratóriumi elemzéseket vagy a vírus jelenlétének és azonosításának, vagy specifikus antitestek kimutatásának céljából végzik. A pozitív madár-születési vírus megerősítő diagnózisát jelenleg PCR-analízissel végzik, amely kimutatja a vírus jelenlétét a biológiai mintákban, de nem igazolja a betegség státuszát. Számos tesztelt papírt (különböző fajokból) pozitív bornavírussal detektáltak, de klinikai vagy sérülési kép nélkül. Ezenkívül a PCR-elemzés feltárja a vírust anélkül, hogy meghatározná a kimutatott vírus pontos genotípusát. Az antitestek és az antitest-titer meghatározása azt mutatja, hogy a madár immunrendszere reagál a szervezetbe bejutott vírusra. Bár feltételezik, hogy a magas antitest-titer fertőzésre utal, és a szervezet megpróbálja elpusztítani a vírust, klinikai kutatások kimutatták, hogy a nagyon magas antitest-titerrel rendelkező pozitív papagájok esetében a legnagyobb a PDD kialakulásának kockázata (a pozitív antitestet még hónapok után sem diagnosztizálták PDD-vel, ez idő alatt a madár nem volt negatív).

Sok egyénnél PDD vagy idegi és emésztési tünetek jelentkeznek. Ebben a szakaszban a diagnózis felállítható vérvizsgálatok alapján (pozitív PCR madár született vírus vagy specifikus vírusellenes antitestek alapján). A PDD klinikai diagnózisát a tünetek alapján nehéz megállapítani, mivel számos tünet sok más fertőző, parazita vagy anyagcsere-betegségben jelentkezik. A PDD diagnózisát specifikus emésztőrendszeri elváltozások (különösen proventricularis elváltozások) alapján igazolják, kiegészítve a proventriculusból, pipettából, vesékből, agyból és gerincvelőből gyűjtött minták szövettani vizsgálataival.

Olyan vizsgálatot végeztünk, amely a taxonómiailag osztályozott fajok 54 psittacinját tartalmazta különböző nemzetségekben: 6 Amazona aestiva, Amazona ventralis, 7 Ara ararauna, 4 Ara macao, 12 Psittacus erithacus, 2 Cacatua galerita, Cacatua alba, 2 Cacatua sulphureus, egy Pionis menstruus, 2 Pionites leucogaster, 11 Psittacula krameri, 5 Psittacula eupatria. A nemek szerinti megoszlás 31 férfi és 23 nő volt. Az életkor 1 évnél kevesebb és 17 év közötti volt, 7 madár számára ismeretlen és nehezen értékelhető. Az ebben a vizsgálatban szereplő összes madárból 9-et boncolásra küldtek, post mortem biológiai mintákat vettek, míg további 12 madarat biopsziával gyűjtöttek össze. Valamennyi madár a PDD klinikai tüneteit mutatta, a megnyilvánulások az emésztőrendszerre összpontosultak (alacsony testtömeg, hasmenés, emésztetlen táplálék a székletben vagy kitágult proventriculus), néhány madár idegrendszeri károsodást (remegés, ataxia vagy görcsök) is jelentkezett.

A diagnózist PCR-rel állapították meg. A C-szekvencia cél SDC-t tartalmazó PCR-standardot úgy nyertük, hogy a célszekvenciát vektorba klónoztuk, kettős promóteres Topo TA klónozó készlet alkalmazásával, a gyártó utasításainak betartásával. A genetikai anyagot SNAP mini-előkészítő készlet segítségével extraháltuk, a gyártó utasításainak megfelelően. A genetikai anyag koncentrációját spektrofotometriával határoztuk meg, a Gene Quant II RNS/DNS készüléket használva, és az RNS-t alkalmaztuk templátként az SDC-C PCR vizsgálathoz, hogy megerősítsük az SDC C szekvencia jelenlétét C. jejuni esetében. A standardokat 1,2–1,2x108 genomekvivalens/3 μl standard genetikai anyagot tartalmazó készítményekből nyertük, amelyeket -20 ° C-on tároltunk, felhasználás előtt legfeljebb háromszor felolvasztottunk és fagyasztottunk. PCR primereket és mintákat (CJTP2) fejlesztettünk ki Primer Express szoftver segítségével, hogy megcélozzuk az adott régiót.

Az RT-PCR technikával tisztított genetikai anyag elemzéséhez mintát előkészítő reagenssel extraháltuk, a gyártó utasításainak megfelelően. Az előkészített és a hígítószerbe felvett mennyiséget (1 ml) 16 000 x g sebességgel 10 percig centrifugáltuk a biológiai részecskék ülepedése érdekében, és a felülúszót gondosan leszívtuk és eltávolítottuk. A mintákat még egyszer centrifugáltuk 16 000 x g sebességgel 1 percig, az összes felülúszó maradékot eltávolítottuk, és a maradékot 200 µl minta-előkészítő reagensben erős homogenizálással újraszuszpendáltuk. A szuszpenziókat vízfürdőn 10 percig lebegve melegítettük; A mintákat eltávolítottuk, és 2 percig hagytuk szobahőmérsékletre hűlni, majd 2 percig ismét centrifugáltuk 16 000 x g sebességgel. 50 μl felülúszót adtunk hozzá 50 μl hígítószer fölött a molekuláris biológia céljából, és a hígított genetikai anyag mintáját használtuk standardként az RT-PCR elemzéshez...

A PDD szindrómát és az implicit ABV-t 34 esetben a letalitásnak tulajdonították. A túlélést akkor rögzítették, amikor a papagájok klinikai tünetei elhalványultak vagy akár eltűntek, és az irodába történő bemutatásuk után legalább egy hónapig túléltek. A boncolási esetek standard módszerével végzett szűrés megállapította, hogy mind fertőzött madarak voltak, és pozitívan jelezték az elvégzett vizsgálatokat, nevezetesen: Ara ararauna, 2 Psittacus erithacus, Cacatua galerita, Amazona ventralis, Amazona aestiva, 4 Psittacula krameri.

A vizsgálatba bevont papagájok különféle szerveiben fermentációs mikroorganizmusok bőséges jelenlétét is megfigyelték. A komplex emésztőrendszeri patológiával rendelkező madarak teljes számából kilencen nem sokkal a klinikára való megérkezésük után haltak meg súlyos tünetek miatt. Ezen állatok rendelkezésre álló szerveit összegyűjtöttük mikrobiológiai vizsgálat és PCR-elemzés céljából. A legtöbb esetben a vírust a beteg madarak legtöbb szervében kimutatták, beleértve az agyat, a májat, a vesét, a szívet és a tüdőt. Az összes klinikai esetből gyűjtött székletminta csak 24 madárnál volt pozitív. Szervekből származó homogenátumokat és az összegyűjtött biológiai mintákat különböző madár- és emlőssejt tenyészetekhez adták. A fertőzés utáni 7., 10. és 14. napon a tenyészetet megvizsgálták a jellegzetes változások szempontjából. A madár- és emlőssejtek tenyészetein végzett kísérletek meglepően széles spektrumú szerveket és sejttípusokat tártak fel, amelyekben a vírus fejlődik, ami azt mutatja, hogy nem részesíti előnyben a központi és a perifériás idegrendszer sejtjeit.

Fermentációs mikroorganizmusokat vizsgáltak minden olyan madár esetében, akiknek a PDD tipikus klinikai tünetei szerepelnek a vizsgálatban, annak érdekében, hogy összefüggésbe hozzák és összehasonlító módon értelmezzék azokat a lehetőségeket, amelyekben a klinikai diagnózis felfedi a PDD-t, de a PCR-eredmények negatív ABV értékűek, mivel az élesztőgombák fejlődése miatt lehetséges a betegség evolúciója. vagy más fermentatív mikroorganizmusok, amelyek hasonló betegséget okozhatnak. A kapott eredmények arra utalnak, hogy kollektív fertőző tényező van az átvitelben, és az átvitel az emésztőrendszeren vagy a légzőrendszeren keresztül történhet.

A madarak születésű vírusát a papagájok PDD elsődleges etiológiai ágenseként igazolták.
A fertőzött madarak, még akkor is, ha nincsenek klinikai tüneteik, vírustartályt képeznek, biztosítva a vírus időszakos eliminálását az ürüléken keresztül.
A madarakból gyűjtött biológiai minták elemzése kimutathatja a pozitív született vírusokat, amelyeknél klinikai tünetek (beleértve a PDD-t is) alakulhatnak ki, vagy klinikailag egészségesek maradhatnak.
Az inkubációs periódus viszonylag rövid, 12-14 naptól 30 napig tart.
A PDD diagnózisa lehetővé teszi, hogy főként gyulladáscsökkentőkön (nem szteroidokon) alapuló terápiás tanfolyamot hozzanak létre, amely a legtöbb esetben biztosítja a betegség pillanatnyi leállítását vagy lassítja a betegség kialakulását.
A prognózis mindig kedvezőtlen.