A Gießen neurodermatitis tréning hatása a bőr állapotára és a stressz élményére - PDF Free Download

A Gießen neurodermatitis tréning hatása a bőr állapotára és a stressz tapasztalataira. Nyitó disszertáció a Justus Liebig Gießen Egyetem orvosi tanszékének doktori fokozatának megszerzésére Michael Hartmut Schock a Gießen Gießen munkatársától

A Pszichoneuroimmunológiai Orvosi Központtól a Pszichoszomatika Klinikájáról igazgató: egyetem-prof. Dr. med. Kruse, a Justus Liebig University Giessen Reviewer: Recenzens: Prof. Dr. med. Eva Peters Prof. Dr. med. Thilo Jakob vitás napja: 2018.08.07

2.8.3 ELISA MÉRÉSEK (ENZIMMEL KAPCSOLÓDOTT IMMUNOASSAY) 31 2.8.4 FACS (FLUORESCENCE-ACTIVATED SHELL SORTING) 32 2.9 ADATGYŰJTÉSI ÉS MÉRÉSI MÓDSZEREK 37 2.9.1 LABORATÓRIUMI ANYAGOK ÉS MŰKÖZÖK FELSZERELÉSE 37 2.9.2 MELLÉKLET 2.9.4 FACS MÉRÉSEK 46 2.10 STATISZTIKA 49 2.10.1 ADATKEZELÉS 49 2.10.2 AZ ELEMZÉS FORMÁJA ÉS A MINTA ÖSSZEFOGLALÓJA 2.10.3 LEÍRÓ ELEMZÉS 50 2.10.4 STATISZTIKAI ÉRTÉKELÉS 50 3 EREDMÉNYEK 52 3.1 ALAPADATOK 52 3.2 VIZSGÁLATI EREDMÉNYEK 53 3.2.2 KÉRDŐÍV 54 3.2.3 KORTISZOL, BDNF, SLURP-1 ÉS IGE 58 3.2.4 IMMUNSTATUS 60 3.2.5 T-SZABÁLYOZÁSI LIMFOCITTE 62 3.2.6 DENDRITIKUS SEJTEK 64 3.3 VÁRATLAN ESEMÉNYEK 66 4 VITÁLÁS 67 4.1 AZ EREDMÉNYEK VITÁSA 67 4.1 .1 A BŐR FELTÉTELE NEM JAVÍTJA A KÉPZÉST 67 4.1.2 A STAI-X1 PONTOK JELENTŐS HULLADÉKÁNAK CSÖKKENTETT SZÁRMAZÁSA 68 4.1.3 A stressz és a COPINGSCOROK változásai nélkül 70 4.1.4 A szérumkonferencia kicsi változásai A STRESSZ MEDIÁTOROK 71 4.1.5 A FACS ELEMZÉSEK VÁLTOZÁSOKAT MUTATNAK A MONOCITÁK ÉS A T MEMÓRACSOK NÖVÉNYÉBEN 73

4.3. KÖVETKEZTETÉS 4.4 4.4 VÁLASZLAN ÉS ÚJ KÉRDÉSEK KITEKINTÉSE 85 5 VEZETŐI ÖSSZEFOGLALÓ 87 6 ÖSSZEFOGLALÓ 88 7 RÖVIDÍTÉSEK FELSOROLÁSA 89 8 ÁBRÁK LISTÁJA 91 9 TÁBLÁZATOK JEGYZÉKE 92 10 IRODALMI IRODALOM 94 11 MELLÉKLETEK 114 11.1 REFERENCIA DOKUMENTUMOK

Bevezetés 1.5 Jelen munka kérdése A bemutatott munka célja az volt, hogy értékelje a Giessen képzési program hatásait az AD lefolyására pszichoneuroimmunológiai szempontból. Ebből a célból a következő kérdésekre kell válaszolni: Egy edzésen való részvétel klinikailag csökkenti-e az atópiás dermatitis aktivitását? o Esnek-e a gyulladásos bőr aktivitási pontszám SCORAD értékei? Megtalálhatók-e változások a résztvevők önjelentéseiben a stresszélmény, a stresszkezelés, valamint a mentális és fizikai egészség tekintetében? o Vannak-e jelentős változások az életminőségben és a viszketésben? o Változnak-e a stressz és a szorongás érzésében? o Változik-e a pszichomotoros megküzdési magatartás? o Változnak-e az egészség felfogásában és a szomatizálódásra való hajlamban? Meghatározhatók-e a kortizol, a BDNF, a SLURP-1 és az IgE stressz mediátor szintjének változásai? Változnak-e a monociták, a T-szabályozó sejtek vagy a dendritikus sejtek populációi? 23.

Módszertan 2.7 A vizsgálat menete A tanulmány megtervezése 2014. december 24-én kezdődött. Az etikai kérelem 2016. január 21-i jóváhagyása után megkezdődött a toborzás. A tanfolyamokra évente átlagosan ötször került sor Giessenben, a résztvevők száma 6 és 10 fő között volt. Ezek közül általában 6 és 8 fő között lehetett toborozni, így a vérminták toborzása és begyűjtése jó évet vett igénybe. Megnövekedett lemorzsolódás történt az elején, ezt a problémát a megoldásokkal együtt a 4.2 szakasz tárgyalja. A kontrollcsoportok toborzása kevésbé volt problémás, a többség közvetlenül Giessenből érkezett, így a hosszabb utazások nem jelentettek problémát. Ekkor az információs rendszer és a költségtérítés teljes mértékben kiépült. Ezután az Elisa és a FACS méréseket viszonylag rövid, néhány hetes időszakban hajtották végre a hőmérséklet és a páratartalom ingadozása által okozott külső hatások minimalizálása érdekében. A vizsgálati karonként megcélzott n = 40 alany száma a vizsgálati karon a magas lemorzsolódás miatt nem érhető el. Az értékelést 55 tesztelővel végeztük. 27.

Eljárás, amelyben a kívánt antitestekkel rendelkező sejteket külön-külön mérjük a többi sejttől és meghatározzuk azok számát. A mérések kalibrálásához az elején kompenzációs mérést hajtanak végre. A színezékekkel jelölt antitesteket mesterséges mérőhordozókra, úgynevezett gyöngyökre viszik fel, amelyek megfelelnek a sejteknek, és megmérik azok fényelnyelését. Ily módon meghatározhatók a szövegben a kapuk fent leírt területei. Ezenkívül minden méréshez negatív kontroll, izotípus szükséges. Ez a festékkel jelölt antitest nem specifikusan kötődik az összes sejthez, és összehasonlításra kerül a későbbi mérési eredményekkel. Ennek célja a célsejtek megfelelő azonosításának biztosítása. A következőkben a célsejtpopulációk kapuzási stratégiáit diagramokkal magyarázzuk. A lézer spektruma által kialakított kapuk alapján az antitesttel jelölt sejtek specifikusan kiválaszthatók. Az eredményeket a sejtek százalékos arányában mutatjuk be az előző csoport teljes mennyiségéhez viszonyítva (anyakoncentráció). 33

Módszer 2.8.4.1. Immunállapot monocita populációkkal és természetes gyilkos sejtekkel Minden esemény Sejtmaradék FSC> 20 P1 Élő sejtek Apopt. Sejtek 7-AAD Vital sejtek CD3 + CD19- CD3- CD19 + CD16 + CD56 + CD3 + CD4 + CD3 + CD19 + T-sejtek B-sejtek NK-sejtek T- segítő sejtek utánrα7 + afterrα7 + afterrα7 + afterrα7 + összezáródott e sejtek után rα7 + T sejtek után rα7 + B sejtek után rα7 + B sejtek után Sejtek nachrα7 + Th sejtek CD14 + CD16 + monociták nachrα7 + nachrα7 + monociták Klasszikus monociták CD14 ++ CD16 - köztes monociták CD14 ++ CD16 + CD14 + CD16 ++ nem klasszikus monociták 3. ábra: Kapuzási stratégia az immunstátusz mérésére 34

Módszertan 2.8.4.2 T-szabályozó sejtek és a kapcsolódó események Sejtmaradványok FSC> 20 élő sejt Egyéb sejtek CD3- CD3 + T limfociták CD8 + CD4 + T szuppresszor sejtek T segítő sejtek CD45RA + CCR4- CD45RA- CCR4 + CD4 + CD25 + Naiv T segítő sejtek Act.T- Segítő sejtek CD4 + T-szabályozó limfociták CD127lo CD25 + FoxP3 + FoxP3 + T-reg. Limfociták Egyéb FoxP3-CD127lo T-szabályozó limfociták CD45RA + CCR4-CD127lo naiv T-regulát. Limfociták CD45RA-CCR4 + CD127lo T-szabályozó memória sejtek 4. ábra: Kapuzási stratégia a T-szabályozó limfocita populációk mérésére 35

Módszertan 2.8.4.3 Myeloid és plazmocitoid dendritikus sejtek Minden esemény Sejttörmelék FSC> 20 élő sejt Apopt. Sejtek 7-AAD Vital sejtek Monociták B sejtek CD14 + CD19- CD14- CD19 + CD14- CD19- Nem mono-nem-B-sejtek CD304 + CD11c + CD1c + CD11c + CD141 + CD11c + pdc mdc1 mdc2 CD86 + CD86- CD86 + CD86- CD86 + CD86- Naiv pdc act. Mdc1 Naiv mdc1 act. Mdc2 Naive mdc2 5. ábra: Kapuzási stratégia a dendritikus sejtek azonosításához 36

Módszertan Dunn-Bonferroni tesztet alkalmaznak, amely párosított átlagérték-összehasonlításokkal nyújt információt a csoportok egyedi vizsgálati dátumai közötti szignifikáns különbségekről. A Friedman-teszt statisztikája Q, a Dunn-Bonferroni teszt statisztikája z. A post-hoc teszt hatás nagyságát P korrelációs együtthatóval jelöljük Pearson szerint. A hibának a p 0,05 valószínűségét szignifikánsnak, a p 0,01-et nagyon szignifikánsnak, a trendet pedig p 0,051 és p 0,099 között feltételeztük. Mindegyik ábrán a csoportok átlagértékei szokásos hibákkal vannak feltüntetve, és * szignifikánsnak, ** pedig nagyon szignifikánsnak tekinthető. 51

Eredmények 3 Eredmények 3.1 Alapadatok A dolgozat megírásakor 85 tesztalany vett részt a vizsgálatban; 14 férfi és 41 nő, akiknek átlagéletkora 31 év volt, bevonhatók az eredmények értékelésébe. Kereszttáblák és a Chi² teszt segítségével a nemek megoszlásában jelentős különbségek kizárhatók. A testtömeg-index (BMI) eloszlásait és az iskolázottság szintjét a varianciák homogenitásának és az egyirányú ANOVA tesztjének segítségével vizsgáltuk. Itt sem voltak jelentős különbségek. 12. táblázat: Az összes vizsgálatban résztvevő alapadatai és megoszlása a különböző csoportok között (információk az átlagértékben (MW) és a szórásban (SD)) Az összes edzéscsoport (SND) Az AD kontrollcsoport (KND) A kontroll csoport egészséges (KO) A statisztika eredménye. A résztvevők tesztelése a lemorzsolódásokkal együtt 85 45 20 20, 2) 5 (26,3)/14 (73,7) 6 (30)/14 (70) (² (1) = 0,559, pontos p = 0,391 Kor BMI MW SD SD SD 30,83 33,63 29, 53 29,85 11,2 14,19 9,98 9,53 23,41 23,05 24,47 22,71 4,38 4,34 4,83 3,98 Levene p = 0,192 F (1,53) = 0,242, p = 0,624 Levene p = 0,684 F (1,53) = 0,827, p = 0,137 52

Eredmények 3.2 A tanulmány eredményei 3.2.1 Elsődleges célparaméter SCORAD A képzés sikerének értékeléséhez az elsődleges célparaméter a SCORAD 3 hónapos lefolyása volt. A Friedman-teszt szignifikáns csoportkülönbségeket mutatott az SND csoportban (Q (2) = 15,5; p