A hüvelyes gasztrektómia és a módosított Roux-en-Y gyomor megkerülő technikák az egerek protokolljában (lefordítva

Absztrakt

Bevezetés

A bariatrikus eljárásokat azonban nehéz közvetlenül adaptálni a kis állatmodellekhez, és nagy műtéti kézügyességet igényelnek. Míg az SG könnyen elvégezhető rágcsálóknál, nagyon jó túlélési arány mellett, a DGRY halálos egerekben a súlyos bélelzáródások miatt. 5 Különböző módosított DGRY technikákat javasoltak ennek a problémának a megoldására, nevezetesen az oesojejunostomiát. Itt egy másik alternatívát mutatunk be: gastrojejunostomia a gyomor kimetszése nélkül. Ez a módosított DGRY utánozza az emberekben tapasztalható jótékony hatások többségét (pl. A testtömeg jelentős csökkenése, valamint a vércukorszint és a lipid homeosztázis javulása).

Ez a kézirat összefoglalja és megvitatja az SG és DGRY technikai és kísérleti részleteit egerekben, és videók segítségével megkönnyíti ezeket az eljárásokat. Különös hangsúlyt kapnak a preoperatív és posztoperatív ápolási protokollok optimalizálása, amelyek lehetővé teszik a vitaminok és a vashiányok csökkentését.

Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.

Jegyzőkönyv

Állatok és szállás: 8 hetes korokat szerezzünk hím C57BL/6 egerekből. 10 hetes korukban szabad hozzáférést biztosítsunk a C57BL/6 vízhez és magas zsírtartalmú étrendhez (DIO étrend: 35% zsír kcal, 25,8% kazein, 1,30% ásványi NSAID, 1,30% vitamin, 1,70% dikalcium-foszfát, 0,7 karbonát% kalcium, 2,10% citrát-kálium, 0,026% kolin-bitartarát, 8,9% szacharóz, 0,384% cisztin, 6,5% cellulóz, 31,7% zsírzsír, 3,3% szójaolaj és 16,29% maltodextrin) 8 (SG) vagy 14 (RYGB) hétig a fogyókúrás műtétek előtt. A súlygyarapodás elősegítése érdekében a magas zsírtartalmú étrend mellett adjon egérnek 20% fruktózt (v/v) tartalmazó vizet a DGRY műtéthez (színlelt és DGRY).

Etikai nyilatkozat: Az alábbiakban leírt összes protokollalépés követi a Pays de la Loire állatkísérleti etikai bizottság 01.953.01 jóváhagyási szám alatti irányelveit.

1. műtét előtt Általános előkészítés

2.ujjú gasztrektómia: Sebészeti eljárás

3. Roux-en-Y gyomor bypass: Sebészeti eljárás

4. Általános posztoperatív ellátás

  1. Állítsuk le az izofluránt, és folytassuk 0,8 L/perc O2 áramlási sebességgel, amíg az egér teljesen fel nem ébred. Ne hagyja az egeret felügyelet nélkül, amíg visszanyeri a motor irányítását, amire az állatok jelzik, hogy elmennek mozogni a ketrecben, és képesek állni és járni zuhanás nélkül.
  2. Helyezze az egeret (ketrecenként csak egy egeret) 30 ° C hőmérsékletű sütőbe, hőmérsékleti körülmények között, 5 napig.
  3. Fenntartja a vas (0,5 mg/kg/nap, szubkután injekció) és a vitamin (800 mg/180 ml vízben) kiegészítőket a DGRY egerekben a protokoll végéig.
  4. A műtét után 5 napig térjen vissza ingyenes hozzáféréshez az étkezési gél diétához (gélben gazdag étrend: 10% zsír, 10% folyékony cukor, 57% víz). Helyezze vissza a szilárd ételt 3 nappal a műtét után.
  5. Szubkután adják be a buprenorfint (0,1 mg/kg, naponta kétszer, a 0. és a 3. napon a műtét után), meloxicamot (1 mg/kg, a 0. és a 3. napon a műtét után), metoklopramidot (1 mg/kg, 0. naptól a 5 nappal a műtét után) és a marbofloxacin (10 mg/kg, 0. naptól a 3. napig aTE teljes műtét).

5. Postoperatív anyagcsere-paraméterek

  1. Mértéke a étkezési fogyasztás
    1. Hagyja az egereknek a műtét után 1 hétig helyreállni. Egér ház egy ketrec mellett. Mérje meg a ketrecbe helyezett szilárd takarmány mennyiségét. Az étel súlya 24 órával később marad meg. Ismételje meg ezt a lépést, amíg szükséges.
  2. Orális glükóz tolerancia teszt
    1. Gyorsítsa az egereket 6 órán keresztül az orális bolus előtt. Gyűjtsön egy csepp vért a farok hegyéből, és vigye fel egy glükométerbe helyezett glükózcsíkra, hogy meghatározza a 0 idő vércukorértékét.
    2. Adjon be 20% D-glükóz oldatot (2 g/kg) orálisan. Mérjük meg a vércukorszintet 15, 30, 60 és 120 perccel a szoptatás után.
  3. A hemoglobinszint elemzése
    1. Hematológiai rendszer segítségével mérj meg 20 µl friss vért a hemoglobinszint mintavételéhez.
". Eutanázia> 6

  1. Altassa az egereket xilazin/ketamin (10/80 mg/kg) oldat intraperitoneális injekciójával. Végezzen méhnyak diszlokációt. Ellenőrizze a teljes eutanáziát, hogy a szív ne verjen és a szemgolyó pislogási reflexe elvész.

Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.

Reprezentatív eredmények

Felhasználási feltételek

Az SG-eljárás átlagos működési ideje 49,3 ± 1,5 perc volt. 62,8 ± 5,0 mg-ot távolítottunk el a gyomorból, ami a gyomor 80% -a. Egyetlen egér sem halt meg a műtét alatt vagy a következő hét napban. Egy egér (7,1%) a posztoperatív 11. napon hunyt el bezoár okozta gyomorelzáródás miatt.

A DGRY eljárás átlagos működési ideje 89,1 ± 2,8 perc volt. A mortalitási arány szignifikánsan magasabb volt a DGRY után (színlelt: 25% vs. DGRY: 66,6%; p = 0,038). A posztoperatív halál fő okai az anasztomotikus szivárgás (n = 8), az anasztomotikus szűkület (n = 5), az érzéstelenítés szövődményei (n = 4) és a posztoperatív vérzések voltak (n = 2). Két hosszú távú halált is megfigyeltünk az anastomosis gasztro-szűkületéből, krónikus obstrukcióval és alultápláltsággal. Amint az a 3. ábra, a műtét utáni túlélési arány fokozatos javulását észleltük a protokoll egészében, jelezve, hogy intenzív sebészeti képzésre van szükség a DGRY sebészeti technika elsajátításához.