A lisztérzékenység genetikai hajlam (HLA-DQ2DQ8) - Synevo
A cöliákia (más néven cöliákia, glutén intolerancia, glutén enteropathia, cöliákia vagy nem trópusi folyadék) egy olyan krónikus gyulladásos emésztési rendellenesség, amelyet a glutén bevitele okoz, és amely megakadályozza a tápanyagok, vitaminok és ásványi anyagok felszívódását a belekben. Az egész életen át tartó érzékenység jellemzi a glutén alkoholban oldódó frakcióit: búza-gliadint és árpából, rozsból és zabból származó prolaminokat, a genetikailag hajlamos embereknél fellépő érzékenységet. A gluténfrakciók közül a gliadin a legmérgezőbb komponens. Ez nem allergia, hanem a T-limfociták által közvetített autoimmun betegség, amelyben a vékonybélből származó szövet transzglutamináz az élelmiszer gliadinnal maga az autoantigén képződik. Mivel csak bizonyos HLA antigének kötik meg a gliadint és mutatják be az immunrendszernek, a betegség ezen antigének hordozóiban fordul elő. Ez megmagyarázza ennek a betegségnek a családi jellegét: az érintett személyek első fokú hozzátartozóinál 10% -os prevalenciát, a monozigóta ikreknél pedig a betegség akár 70% -os egyezőségét regisztrálják.
A lisztérzékenység meglehetősen gyakori a lakosság körében, Európában 1: 200-1: 500 prevalenciával. A nőket 2-3-szor jobban érinti, mint a férfiakat 1 .
A cöliákia patogenezisében szereplő egyéb autoimmun gyulladásos megbetegedésekhez hasonlóan az inkriminált genetikai tényezők (bizonyos HLA antigének jelenléte), a test gluténterhelése, valamint más, nem megfelelően jellemzett tényezők, amelyek elősegítik a megnyilvánulások előfordulását egyes genetikai hajlamú embereknél .
A coeliakia iránti fogékonyságot bizonyos HLA 2. osztályú allélok adják a HLA-DQ régióban. Így a legtöbb betegnek (90-95%) heterodimerje van HLA-DQ2 allélok kódolják DQA1 * 05 és DQB1 * 02 (más néven: HLA DQ2.5), míg
5% -uk rendelkezik heterodimerrel HLA-DQ8 allélok kódolják DQA1 * 03 és DQB1 * 0302. A legtöbb betegnek haplotípusa van DR3-DQ2 (DRB1 * 0301-DQA1 * 0501-DQB1 * 0201) vagy heterozigóta DR5-DQ7/DR7-DQ2 (DRB1 * 11/12-DQA1 * 0505-DQB1 * 0301/DRB1 * 07-DQA1 * 0201 - DQB1 * 0202). Ez azt jelenti, hogy az a-láncból és egy β-láncból álló DQ2 dimer molekulát allélok kódolhatják DQA1 * 0501 és DQB1 * 0201 ugyanazon a kromoszómán (cisz konfiguráció - 1A. ábra) vagy allélokon keresztül helyezkedik el DQA1 * 0505 és DQB1 * 0202 különböző kromoszómákon helyezkednek el (transzkonfiguráció - 1A. ábra). A DQA1 * 05 és DQB1 * 02 negatív betegek gyakran pozitívak a haplotípus szempontjából DRB1 * 04-DQA1 * 03- DQB1 * 0302 (haplotípus DR4-DQ8). A DQ8 molekulát szintén egy α lánc alkotja, és egy β láncot ugyanazon a kromoszómán elhelyezkedő allélok kódolnak (cisz konfiguráció - 1C. Ábra). Nagyon ritkán a betegek csak a DQ2 heterodimer (a DQ2 heterodimer fele) 2; 3; 4; 5 α-láncát (* 0501 vagy * 0505) vagy csak a β-láncát (* 0201 vagy * 0202) hordják. .
1. ábra: DQ2 és DQ8 molekulák képződése (adaptáció a lisztérzékenység után, génellenőrzések)
A HLA-DQ2 genotípus betegségre való hajlam autoszomális-domináns vagy autoszomális recesszív módon terjed, a szülők hajlamos HLA genotípusától függően (lásd 2A. Ábra). A HLA-DQ8 genotípus betegségre való hajlam autoszomális-domináns átvitelű (lásd 2B. Ábra).
Ábra. 2 A DQ2 (A) és DQ8 (B) érzékenység átadásának módja azokban a családokban, amelyekben az egyik szülő bemutatja a megfelelő hajlamosító HLA haplotípust, a másik pedig nem mutatja be ezt a haplotípust. A HLA-DQB1 * 0302 variáns mindig a HLA-DQA1 * 03 szekvenciával együtt öröklődik az összekapcsolódási egyensúlyhiány miatt (adaptáció a lisztérzékenység után, gének áttekintése)
Mivel az általános populáció 30% -ánál a celiaciához társult HLA-allélok egyike található (DQ2 és/vagy DQ8 heterodimert kódolva), és az egyik vagy mindkét heterodimerrel rendelkezőknek csak 3% -ánál alakul ki a betegség, ezen allélok azonosítása nem állapítja meg a diagnózist, hanem csak egy megnövekedett kockázat. Másrészt a celiaciához társuló HLA allél hiánya gyakorlatilag kizárja ezt a diagnózist 1 .
A cöliákia diagnózisát a bélnyálkahártya biopsziájának elvégzése igazolja, amely jellegzetes változásokat mutat (elváltozások súlyossága változó, az atrófiától a bélbolyhok eltűnéséig).
Bizonyos betegségek, különösen az autoimmunok, a lisztérzékenységben szenvedő betegeknél tízszer gyakrabban fordulnak elő, mint az általános populációban. Egyidejűleg a lisztérzékenység gyakran tünetmentes: Duhring herpetiform dermatitis, szelektív Ig A-hiány, primer biliaris cirrhosis, Sjögren-szindróma, I. típusú cukorbetegség, Down- vagy Turner-szindróma, Crohn-kór, fekélyes vastagbélgyulladás, osteoporosis, autoimmun thyreoiditis 3 .
A gluténnak való kitettség kötelező ahhoz, hogy a lisztérzékenység genetikai érzékenységű embereknél forduljon elő. Ezt bizonyítja az elváltozások és tünetek hiánya a lisztérzékenységben szenvedőknél, akik gluténmentes étrendet folytattak.
A glutén struktúrájú fehérjéket megnövekedett prolin- és glutamin-tartalom jellemzi, ami viszonylagos ellenállást biztosít számukra az enzimatikus lebomlással szemben, és így lehetővé teszi számukra a makrofágok felszínén a DQ2 vagy DQ8 molekulákhoz való kötődéshez és stimulálja a CD4 + T-sejteket. Valójában azokat a T-sejteket, amelyek gluténpeptidekkel reagálnak DQ2 vagy DQ8 molekulák jelenlétében, izoláltak a lisztérzékenységben szenvedő betegek nyálkahártyájából. Másrészt a normál nyálkahártyából izolált T-sejtek még a DQ2 embereknél sem reagálnak a gluténra.+.
Ábra. 2 A cöliákia patogenezise
A szöveti transzglutaminázt (tTG) a celiakia fő autoantigénjeként azonosították. Kóros körülmények között az extracellulárisan felszabaduló transzglutamináz (tTG) magas glutamintartalmú fehérjékkel (vagy azok hidrolíziséből származó peptidekkel) komplexeket képezhet, például a búzában. Ezek a komplexek neonatigének, amelyek specifikus antitestek termelését is stimulálhatják; Diagnosztikai szempontból az anti-tTG antitestek érzékenysége és specificitása meghaladja a 95% -ot a lisztérzékenységre 3 .
Ajánlások a HLA hajlam allélok meghatározására
• tüneti betegek, akiknek egyértelmű anti-tTG antitest szintje van, vagy a bélnyálkahártya biopsziájának eredménye nem meggyőző;
• korábban tüneti betegek, akik a gluténmentes étrend bevezetése után tünetmentessé váltak, és akik nem kívánják elvégezni a glutén tesztet;
• tüneti betegek, akik nem reagálnak a gluténmentes étrendre;
• differenciáldiagnózis olyan betegnél, akinek a celiaciához hasonló tünetei vannak;
• a lisztérzékenységben szenvedő betegek első és második fokú rokonai;
• a fent említett kockázati csoportba tartozó betegek értékelése.
Összefoglalva, a teszt hasznos a lisztérzékenység kizárására és az 1; 2; 4 kockázatú betegek azonosítására .
2012-ben az Európai Gyermekgasztroenterológiai, Hepatológiai és Táplálkozási Társaság (ESPGHAN) új iránymutatást dolgozott ki a gyermekek lisztérzékenységének diagnosztizálására. Így a genetikai tesztet tekintik az első vonalbeli vizsgálatnak a magas kockázatú embereknél. Ezenkívül magas klinikai gyanúval és nettó pozitív szerológiával rendelkező gyermekeknél a HLA teszt diagnosztikai eszközként alkalmazható a nyombél nyálkahártya biopsziájának helyettesítésére 6 .
Begyűjtött minta - különös venos 1 .
Betakarítási konténer - EDTA-t antikoagulánsként tartalmazó vakutainer 1 .
Betakarított mennyiség - amennyit a vákuum megenged 1 .
Az elutasítás okai megpróbálni - heparin antikoagulánsként történő alkalmazása; koagulált vagy hemolizált minták.
Tesztstabilitás - 7 nap 2-8ºC-on 1 .
Módszer - mikroarray DNS technológia; meghatározzák a genotípusokat HLA-DQA1 és HLA-DQB1 a lisztérzékenységhez kapcsolódó allélváltozatok meghatározott párjainak kimutatására:
1. HLA-DQA1* 0501, HLA-DQB1* 0201 (HLA DQ2.5 cis konfigurációban)
2. HLA-DQA1* 0505, HLA-DQB1* 0202 (HLA DQ2.5 transz konfigurációban)
3. HLA-DQA1 * 0301, HLA-DQB1* 0302 (HLA DQ8) .
Az eredmények értelmezése
A DQ2 és DQ8 HLA hajlamú allélok negatív eredménye gyakorlatilag kizárja a lisztérzékenység diagnózisát, és rendkívül alacsony kockázatot jelez (1; 4 .
Egy személyre hajlamos HLA allélpár azonosítása kumulatív 3% -os kockázatot jelent a lisztérzékenység kialakulásában.
A lisztérzékenységben szenvedő személy első fokú rokonának, aki ugyanazt a hajlamosító allélt hordozza, a betegség kialakulásának akár 40% -a is fennáll.
Csak a HLA DQ8 genotípussal rendelkező embereknél sokkal alacsonyabb a kockázat, mint a csak HLA DQ2 genotípussal rendelkezőknél.
A betegség súlyosságában nincs különbség csak a HLA DQ8 genotípusú betegek és a csak HLA DQ2 genotípusú betegek között.
Mind a HLA-DQ2, mind a HLA-DQ8 genotípusú embereknél nincs nagyobb a betegség kockázata, mint azoknál, akiknek csak a HLA DQ2 genotípusa van; másrészt ezeknek az embereknek nagyobb a valószínűsége a betegség kialakulásának, mint azoknak, akiknek csak a HLA DQ8 genotípusuk van.
A DQB1 * 02 allél elleni homozigozitás egy DQ2 + személynél ötször nagyobb kockázatot jelent a lisztérzékenységre, mint más DQ2 + embereknél. A DQB1 * 02 allél elleni homozigozitásról gyakrabban számolnak be klasszikus lisztérzékenységben szenvedőknél, mint atípusos megnyilvánulásoknál, valamint refrakter sprue vagy enteropathiával társult T-sejtes lymphoma esetén. sejtes limfóma = EATL).
Azoknál az embereknél, akiknek csak a DQ2 heterodimer fele van - csak a HLA-DQA1 (* 0501 vagy * 0505) VAGY HLA-DQB1 (* 0201 vagy * 0202) (de nem mindkettő) variáns, de nem mindkettő - celiakia alakulhat ki, de a kockázat nagyon alacsony bemutatva a teljes heterodimert.
Újabb tanulmányok szerint úgy vélik, hogy a HQ DQ2.2 altípus (amelyet a DQA1 * 02: 01 és DQB1 * 02: 02 allélok kódolnak), bár nem szerepel a diagnosztikai kritériumok között (ESPGHAN 2012 szerint) a lisztérzékenység enyhébb formájával. Ezért a laboratórium közli a HLA DQ2.2 altípus jelenlétét, és megemlíti, hogy bár a klasszikus HLA konstellációkat nem sikerült kimutatni, a jövőbeni lisztérzékenység kockázata nem zárható ki. .
A pozitív genetikai teszttel rendelkező embereket 3-5 éves időközönként szerológiai megfigyelés alatt tartják 2 .
Határértékek és interferenciák
A hajlamosító HLA konstelláció azonosítása nem bizonyítja a cöliákia fennállását 4 .
1. Synevo Laboratórium. Az alkalmazott munkatechnika konkrét hivatkozásai 2010. Ref.
2. Snyder L. C, O Young D, Green HR Peter, Taylor A. K. Celiac Disease. Gene Review, 2008. www.ncbi.nlh.gov. Referencia típusa: Internetes kommunikáció.
3. Elson C.O., Smith E.D. A gyomor-bél traktus immunológiai betegségei. A klinikai immunológiában. Alapelvek és gyakorlat, Mosby, Elsevier, harmadik kiadás, 2008, 1106-1109.
4. Mayo Klinika, Mayo Orvosi Laboratóriumok. Referencia laboratóriumi szolgáltatások az egészségügyi szervezetek számára. Celiaciával társult HLA-DQ Alpha 1 és DQ Beta 1 nagy felbontású DNS-tipizálás, vér www.mayomedicallaboratories.com. 2010. Ref Típus: Internetes kommunikáció.
5. Megiorni F, Pizzuti A. HLA-DQA1 és HLA-DQB1 a lisztérzékenység hajlamában: a HLA molekuláris tipizálásának gyakorlati következményei. In Journal of Biomedical Science., 2012, 19:88.
6. S. Husby, S. Koletzko, R. Korponay-Szabo, M.L. Mearin, A. Phillips, R. Shamir, R. Troncone, K. Giersiepen, D. Branski, C. Catassi, M. Lelgeman, M. Maki, C. Ribes-Koninckx, A. Ventura és K. P. Zimmer, az ESPGHAN lisztérzékenység diagnosztikai munkacsoportjának, az ESPGHAN Gasztroenterológiai Bizottság nevében. Európai Gyermekgasztroenterológiai, Hepatológiai és Táplálkozási Útmutató a lisztérzékenység diagnosztizálásához. JPGN 54. kötet, 1. szám, január 2012.
7. Mubarak A, Spierings E, Wolters V, van Hoogstraten I, Kneepkens CM, Houven R. Humán leukocita antigén DQ2.2 és coeliakia. In J Pediatr Gastroenterol Nutr 2013 ápr. 56 (4): 428-30.