A petefészekrák kockázatának becslési profilja (HE4, CA 125, ROMA pontszám) - Synevo
A teszt tartalmazza CA 125.
Általános információk és ajánlások
Az emberi epididimális fehérje 4 (HE4) a tejsavósav-fehérjék családjába tartozik, amelyek magja 4 diszulfidkötést tartalmaz (WFDC = savósav-négy-diszulfidmag), és gátló tulajdonságokkal rendelkezik a tripszinnel szemben. A szubsztrát és a HE4 funkció sem ismert; a fehérje valószínűleg antimikrobiális és gyulladáscsökkentő szer.
A megfelelő HE4 gén a 20q12-13.1 kromoszómán helyezkedik el, és egy 13 kD fehérjét kódol; érett glikozilezett formájában a fehérje molekulatömege körülbelül 20-25 kD, és egyetlen peptidláncból áll, amely két WFDC domént tartalmaz (emiatt WFDC2-nek is nevezik).
A fehérjét kezdetben az emberi disztális epididymis hámsejtjeiben azonosították, és specifikusnak tekintették a termékenységgel (HE4 = specifikus Homo sapiens epididymis). Később kiderült, hogy a HE4 kis mennyiségben expresszálódik bizonyos szövetek normális hámjában: a reproduktív traktusban (beleértve a petefészket), a felső légúti traktusban és a hasnyálmirigyben. Kifejezése azonban jelentősen megnő a petefészek-, tüdő-, vastagbél- és melldaganatok sejtvonalainak szintjén. Számos független molekuláris vizsgálat kimutatta, hogy a WFDC2 gén túlzottan expresszálódik petefészekrákos betegeknél, összehasonlítva az egészséges emberekkel 1, 2, 3. Immunhisztokémiai vizsgálatok révén Drapkin és munkatársai kimutatták, hogy a HE4 expressziója az epitheliális petefészekrák egyes szövettani altípusaira korlátozódik. Így a HE4-et a szérumdaganatok 93% -ában, az endometrioid adenokarcinóma minden esetben, a tiszta sejtes adenokarcinóma csak 50% -ában azonosították, mucinózus daganatokban egyáltalán nem 4 .
2003-ban Hellström és munkatársai kimutatták, hogy a petefészekrákos betegek szérumában nagy mennyiségben detektálható a HE4 fehérje. Emiatt úgy gondolták, hogy a HE4 hasznos biomarker lehet a petefészekrák kockázatának becslésében 1 .
Számos tényező járul hozzá a petefészekrák előrehaladott diagnózisához. Először is, a tünetek specifitásának hiánya (kismedencei fájdalom vagy nyomás, tartós emésztési zavarok és hasi puffadás, vizelés) késlelteti a betegek orvoshoz történő bemutatását, és amikor orvoshoz fordulnak, gyakran nem ismeri fel az ilyen tünetek következményeit. Másrészt nincs olyan nem invazív vizsgálat, amely elég pontos lenne a jóindulatú és a rosszindulatú kismedence tömegének megkülönböztetéséhez. A betegeket általában kismedencei vizsgálattal és transzvaginális ultrahanggal értékelik (az elsődleges képalkotó módszer a tömeg petefészke eredetének megerősítésére), majd feltáró műtéten és hisztopatológiai vizsgálaton esnek át. Az epitheliális petefészekrák standard kezelése a stádium és az elsődleges műtéti cytoreducation, amelyet a legtöbb esetben kemoterápia követ.
Az említett vizsgálatok és eljárások mellett különös érdeklődés kísérte azokat a biomarkereket, amelyek hasznosak lehetnek a petefészekrákos betegek kezelésében. Jelenleg a legszélesebb körben alkalmazott biomarker a CA 125 tumor antigén, így a kismedencei daganatos nőknél gyakran vizsgálják a CA 125-et transzvaginális ultrahang mellett. Bár a marker emelkedett szérumszintje szorosan korrelál az epitheliális petefészekrákkal (a növekedést az esetek 80% -ában regisztrálják), magas értékek jóindulatú állapotokban is megtalálhatók, például endometriózisban, pangásos szívelégtelenségben, májcirrhosisban, ezek korlátozásában. így a sajátosság. Sőt, a CA 125 szint magasabb a premenopauzás nőknél, ami növeli a hamis pozitív eredmények előfordulását ebben a betegcsoportban. Másrészről a CA 125 antigén érzékenysége csak 50% az I. stádiumú betegségre nézve, ezáltal kevéssé hasznos a petefészekrák korai felismerése szempontjából. A beadás után a CA 125 soros meghatározása felhasználható a 3; 5; 6 betegség kiújulásának kimutatására .
Egy másik szérum marker, amelyet az FDA nemrégiben - 2008. júniusában - jóváhagyott az epitheliális petefészekrákban szenvedő betegek monitorozására más klinikai módszerekkel kombinálva, a HE4. Ennek a markernek a betegség progressziójának nyomon követésére szolgáló eszköz hatékonyságát a petefészekrák 80 betegének soros mintáiban a szérum HE4 szintjének változásainak kiértékelésével igazolták a betegség állapotának változásához képest. Ez a tanulmány azt mutatta, hogy a soros HE4 szintek korreláltak a klinikai állapottal (progresszió vs. progresszió nélkül) az elemzett minták 70% -ában. Ezenkívül megállapítást nyert, hogy a HE4 gyakorlatilag egyenértékű a CA 125 antigénnel a betegség kiújulásának kimutatása szempontjából, de előnye, hogy szérumszintjét sokkal kevésbé befolyásolják a jóindulatú körülmények. .
A HE4 diagnosztikai eszközként való alkalmazásának lehetőségét olyan legújabb tanulmányok támasztják alá, amelyek a petefészekrák számos biomarkerét értékelték. Így Huhtinen és munkacsoportja a HE4 esetében 78,6% -os érzékenységet mutatott a 95% -os specificitásra a rosszindulatú petefészek-daganatok és az endometriotikus petefészek-ciszták megkülönböztetésében 8. Moore és munkatársai azt találták, hogy a tanulmányban elemzett 9 biomarker közül a HE4 a leghatékonyabb az epitheliális petefészekrák kimutatásában, jobb érzékenységgel rendelkezik, mint a CA 125 - ez az állapot "arany standard" marker (72,9% vs. 43,3% 95% -os specificitásig). Amit ezek a kutatók ki akartak emelni, az az, hogy a HE4 érzékenysége egyértelműen magasabb az I. stádiumú betegségben (45,9% - 95% -os specificitásig), ebben a helyzetben a CA125 izolált meghatározása nem fontos. A HE4 érzékenysége magasabb, mint a CA 125 esetében a premenopauzás nőknél. Ha a betegség minden szakaszát figyelembe vesszük, a Ca 125 antigén és a HE4 együttes alkalmazása biztosítja a legnagyobb érzékenységet a rosszindulatú daganat azonosításában (76,4% - 95% specificitás) 3 .
Az epitheliális petefészekrák kockázatának becsléséhez olyan algoritmust dolgoztak ki - ROMA (Risk of Ovarian Malignancy Algorithm) -, amely figyelembe veszi a HE4 és CA 125 preoperatív értékeit, valamint a pre- vagy posztmenopauzális állapotot. Az algoritmus kiszámítja annak valószínűségét, hogy a kismedencei tömeg esetén a műtét során rosszindulatú petefészek-folyamat detektálható-e. A tanulmányban Moore és munkatársai azt találták, hogy 75% -os specificitás mellett a ROMA algoritmus 94,3% -os érzékenységet mutat a jóindulatú állapot megkülönböztetésében a hám petefészekrákjától a betegség minden szakaszában; a betegség I. és II. szakaszában a ROMA 85,3% -os érzékenységet mutatott. A ROMA algoritmus érzékenyebbnek bizonyult, mint a rosszindulatú daganatok kockázati indexe (RMI), amely figyelembe veszi a transzvaginális ultrahang, a menopauza előtti vagy utáni állapot és a szérum CA 125 szintjének eredményeit. .
A 2011 áprilisában közzétett adatok szerint a HE4 tesztet és a ROMA algoritmust validálták a jóindulatú és rosszindulatú kismedencei tömegek megkülönböztetésére az olasz populációban is. .
2011 szeptemberében az FDA jóváhagyta a 2 marker és a ROMA algoritmus együttes alkalmazását a petefészekrák kockázatának meghatározásában a medence tömegével rendelkező, pre- és postmenopauzás nőknél 11 .
Összefoglalva, a HE4 meghatározásnak a következő klinikai indikációi vannak:
- a betegség és a kiújulások figyelemmel kísérése epitheliális petefészekrákban szenvedő betegeknél;
- a CA 125-szel együtt az epitheliális petefészekrák kockázatának becslése a menopauza előtti és a menopauzás utáni, kismedencei tömegű nőknél.
A HE 4 az endometrium rák biomarkere is lehet, de további vizsgálatokra van szükség 5 .
Betegképzés - nincs szükség speciális képzésre; a menopauza előtti vagy posztmenopauzális állapotot meg kell adni az 5. utaló jegyzetben .
Begyűjtött minta - vénás vér .
Betakarítási konténer Vakuumálószer antikoaguláns nélkül, elválasztó géllel/anélkül 5 .
Betakarítás után szükséges feldolgozás - a szérumot centrifugálással választják el; a friss szérumot legfeljebb 5 óra alatt dolgozzuk fel; ha ez nem lehetséges, a szérumot 48 órán át 2-8 ° C-on tároljuk, majd -20 ° C-on 5 lefagyasztjuk .
A minta mennyisége - legalább 0,5 ml ser 5 .
Az elutasítás okai megpróbálni
A minta stabilitása - a szérum 2 napig stabil 2-8 ° C-on; 3 hónap -20 ° C-on; a mintákat kétszer lefagyaszthatjuk 5 .
Módszer - elektrokémilumineszcencia immunkémia (ECLIA) 3. A tesztet a Fujirebio Diagnostics, Inc. 5-től elérhető első HE4 teszt szerint standardizálták .
Kimutatási határ - 15 pmol/l; mennyiségi határ 20 pmol/l, teljes hiba esetén 30% 5 .
Referenciaértékek és az eredmények értelmezése
Kismedencei tömegű nőknél, akiknél a HE és a CA 125 preoperatív szintjét meghatározták, a ROMA pontszám a következőképpen számítható:
- először számítsa ki a prediktív indexet (PI) a betegek számára a menopauza előtti és a posztmenopauzában az alábbi egyenletek felhasználásával:
premenopauzális:
PI = -12,0 + 2,38 * LN [HE4] +0,0626 x LN [CA125]
menopauza utáni
PI = - 8,09 + 1,04 x LN [HE4] + 0,732 x LN [CA125]
- a ROMA pontszámot az IP alapján számítják ki az alábbi egyenlet segítségével:
RÓMA (%) = exp (PI)/[1 + exp (PI)] x 100
Egy tanulmányt követően az ECLIA módszerrel végzett HE4 és CA 125 tesztek kombinációjának 75% -os specificitásával a következő küszöbértékeket állapítottuk meg, hogy a betegeket a ROMA pontszám alapján magas vagy alacsony kockázatú csoportokba rétegezzük.:
Premenopauzás nők:
Posztmenopauzás nők:
A tanulmány szerint az I-IV stádiumú hám petefészekrákban szenvedő betegek 84,3% -át helyesen vették be a magas kockázatú csoportba a ROMA pontszám alapján, és a jóindulatú kismedencei nők 75,6% -át az alacsony kockázatú csoportba sorolták.
Ha a HE4-et dinamikában alkalmazzák epitheliális petefészekrákban szenvedő betegeknél, a szérumszint ≥20% -ának változása klinikailag jelentősnek tekinthető mind a növekedés (kiújulás, a betegség progressziója), mind a csökkentése (terápiás válasz) szempontjából 5 .
korlátozás és interferencia
A HE4 értékeket mindig a betegek klinikai összefüggésében kell értelmezni; HE4 nem egy rákszűrő teszt.
A HE4 néha megnövekedett értékeket mutathat jóindulatú körülmények között.
A HE4 nem alkalmazható nyálkahártya vagy csírasejtes adenokarcinóma petefészekdaganatokban szenvedő betegek megfigyelésére.
A ROMA algoritmust nem validálták a következő betegcsoportokra:
A ROMA nem diagnosztikai teszt, hanem a kismedencei tömegű betegek rétegződésének eszköze az epitheliális petefészekrák alacsony vagy magas kockázatú csoportjában a műtét során 5 .
Bár a hámsejtes petefészekrák sokkal specifikusabb markernek tekinthető a CA125-höz képest, a közelmúltban néhány variációs tényezőt azonosítottak a HE4 esetében, amelyeket figyelembe kell venni a kapott eredmények értelmezésekor:
- életkor: komplex nemlineáris összefüggés van a szérum HE4 és az életkor között; így az élet minden évtizedében a HE4-értékek emelésére való hajlamról számoltak be (például 60 éves korban a HE4-értékek egészséges embereknél 37% -kal magasabbak a 20-30 évesekhez képest);
- dohányzás: jelentősen befolyásolja a HE4 szintjét (a hörgőhám túlzott expressziójával) 12;
- vesebetegség: a hamisan megemelkedett HE4 értékek leggyakoribb oka; lineáris összefüggést jelentettek a szérum HE4 szintje és a becsült glomeruláris szűrési sebesség (eGFR) között; Ellentétben a CA125-gyel, amelynek a krónikus vesebetegség előrehaladott stádiumában megemelkedett értékei vannak, a HE4 a betegség korai szakasza óta növekszik; így ha a referencia-tartomány felső határát meghaladó HE4-értékek társulnak az eGFR 2-hez, akkor a szérum CA125-koncentrációkat veszik figyelembe a petefészekrák kockázatának meghatározásához 12; 13 .
Mivel a kemoterápiában részesülő betegeknél bizonyos mértékű vesekárosodás meglehetősen gyakori, ezt a hatást a betegség progressziójának és a terápiás válasznak a HE4 monitorozásakor is figyelembe kell venni. .
Megzavarhatja a készlet egyes összetevőit, és a következő meggyőző eredményeket eredményezheti: