A vinil-klorid és a magas zsírtartalmú étrend mint a környezet és az elhízás kölcsönhatásának modellje

Összegzés

Ennek a protokollnak a célja az alacsony szintű toxikus expozíció egérmodelljének kidolgozása volt, amely nem okoz nyilvánvaló májkárosodást, hanem súlyosbítja a már meglévő májkárosodást. Ez a paradigma jobban összefoglalja az emberi expozíciót és azokat a finom változásokat, amelyek a biztonságosnak tekintett mérgező koncentrációknak való kitettség során következnek be.

Absztrakt

Bevezetés

Sok mérgező anyag és környezeti szennyező anyag elsődleges expozíciós útja a belégzés. Belélegzése után a vegyület a tüdőn keresztül bejuthat a szisztémás keringésbe, a májba juthat, és metabolikusan aktiválódhat a májenzimek segítségével, mielőtt kiválasztódna 14, 15, 16. Gyakran ezek az aktív metabolitok okoznak toxicitást és károsodást a szervezetben. E csoport és mások korábbi vizsgálatai a VC metabolitjait használták a VC gázok expozíciójának helyettesítőiként 17, 18. Más csoportok CR inhalációs modelleket alkalmaztak; azonban rendkívül magas (50 ppm-től kezdődően) expozíciós szintet alkalmaztak akut toxicitás, súlyos májkárosodás és daganatfejlődés kiváltására 19. Bár ezek a tanulmányok alapvető információkat és mechanizmusokat szolgáltattak a CV által kiváltott karcinogenitáshoz, nem foglalják össze a finom hatásokat és az összetett kölcsönhatásokat más járulékos tényezőkkel, ezért kevésbé relevánsak az emberi expozíció szempontjából.

Az inhalációs expozíciónak ez a módszere alkalmazható a környezetünkben jelen lévő különböző gáznemű mérgező anyagok, köztük más illékony szerves vegyületek expozíciójának utánzására. Az illékony szerves vegyületek a környezetre nézve mérgező anyagok nagy csoportját alkotják, és szélesebb körben elterjedtek az iparosodott régiókban, ami azt jelenti, hogy bizonyos populációkat jobban fenyeget a krónikus expozíció 22. A beadott vegyületek időtartama és koncentrációja változtatható. Noha eredetileg a májkárosodás meghatározására fejlesztették ki, ezzel a modellel más szervrendszereket is tanulmányozhatnak és tanulmányoztak 23. Azoknak a kutatóknak, akik az állatokkal való krónikus expozíció tanulmányozását tűzik ki célul, de szeretnék minimalizálni az állatok stresszét, fontolóra kell venniük ennek a modellnek a használatát.

Jegyzőkönyv

Az állatkísérleteket és a CR-t a Környezet-egészségügyi Minisztérium, a Laboratóriumi Állattenyésztés Értékeléséért és Akkreditálásáért felelős Biztonsági Egyesület hagyta jóvá, az eljárásokat pedig a helyi Állat-gondozási és Felhasználási Bizottság hagyta jóvá.

1. Kísérleti beállítás és akklimatizálás tisztított és kísérleti rendszerekhez

2. Vinil-klorid inhalációs expozíciós rendszer

MEGJEGYZÉS: A piacon több inhalációs expozíciós rendszer áll rendelkezésre, a „csak orr” és az „egész test” expozíciótól kezdve, a kézi és az automatizált rendszerekig. Az e csoport által korábban közzétett adatok egy kézi 12, 23, 24 teljes testrendszerből származnak. Az automatizált inhalációs expozíciós rendszert leíró diagram a 2. ábrán látható.

3. Az expozíció beállítása

4. Kiállítási ketrec és állati előkészítés

  1. Vegye ki az egereket a nappali szobájukból, és helyezze az inhalációs kamra ketrecének állványaiba (egy ketrec állvány a kontroll egereknek, egy a kitett egereknek). Naponta véletlenszerűen randomizálja az egyes egerek elhelyezését a ketrectartóban annak biztosítása érdekében, hogy mindegyik egér egyenletesen legyen kitéve az expozíciós kamrában. Jelölje meg az állatok ketrecének számát és elhelyezési helyzetét a laboratóriumi jegyzetfüzetben.
  2. Helyezze az egyes ketreceket a megfelelő kamrába, és zárja be a kamra ajtajait.

5. Készítsen expozíciót

  1. Fordítsa el a VC benzintartály szelepének elzárócsapját zárt helyzetbe, és kapcsolja ki az összes légáramlást az expozíciós kamrába. Forgassa a rotamétert, amíg a vezérlő kamrában nem áramlik a levegő.
  2. Távolítsa el az egyes kamrák ajtajait, hogy szellőztesse az egereket. Távolítsa el a ketrectartókat a kamrákból. A páraelszívó alatt vegye ki az egereket a ketrecükből, és helyezze őket élő ketreceikbe. Minden egeret szállítson lakóhelyiségébe, hogy éjszakai szállást biztosítson rendszeres ketrecekben.
  3. Az ürülék edényéből származó hulladékokat a Környezet-egészségügyi és Biztonsági Minisztérium (DEHS) által jóváhagyott biológiai veszélyekkel járó tartályba helyezze, mivel ezeket a hulladékokat kémiai veszélynek tekinthetik az intézményi környezet-egészségügyi osztályok. Tisztítsa meg a kamra ajtaját, az ürítő edényt, az expozíciós ketrec állványt és az exponáló kamrát a kísérleti és ellenőrző rendszerek számára.

7. A kamrák VC-koncentrációjának validálása az expozíció alatt

8. Az inhalációs expozíciós kísérlet vége

MEGJEGYZÉS: A kívánt expozíciós idő elteltével, például 6, 8 és/vagy 12 héttel az inhalációs expozíció megkezdése után, a kísérletek befejeződnek, és az állatokat eutanizálják (lásd 1. ábra) az idővonalra).

Reprezentatív eredmények

A kísérlet során az állatok testtömegét és az élelmiszer-fogyasztást hetente ellenőriztük az állatok egészségének biztosítása és az anyagcsere in vivo értékelése céljából. 3. ábraNÁL NÉL a testtömeg és az élelmiszer-fogyasztás egy 12 hetes kísérlet során. A testsúlyt hetente egyszer, az ételfogyasztást pedig hetente kétszer mértük minden csoport számára. Az egerek mindegyike hízott a vizsgálat során. Míg a várakozásoknak megfelelően a HFD csoportokban az egerek nagyobb súlyt kaptak, mint az LFD csoportokban, a VC-nek kitett egerek nem híztak többet, mint a megfelelő kontrollcsoport egerei. Az élelmiszerfogyasztás nem különbözött a 12., 24. csoportban .