Glikált hemoglobin (Hb A1c) - Synevo

Általános információk és ajánlások a HbA1c meghatározásához

A vércukorszint elvégzése lehetővé teszi a cukorbetegek szénhidrát-anyagcseréjének jelenlegi állapotának felmérését a vérvétel idején. Ezzel szemben a glikált hemoglobin meghatározása a glikémiás állapot retrospektív becslését adja, függetlenül a cirkadián ritmustól, az étrendtől és a vércukor-koncentráció egyéb átmeneti ingadozásaitól; 2; 4; 5 .

A glikált hemoglobin vagy a HbA1c fontosságát a cukorbetegek glikémiás kontrolljának markerként a két nagy tanulmány - a DCCT (Diabetes Control and Complication Trial) és az UKPDS (United Kingdom Prospective Diabetes Study) - eredményei emelték ki. Ezek meggyőzően bebizonyították az intenzív glikémiás kontroll jótékony hatását mind az anyagcsere paraméterekre (glikémia és HbA1c), mind az I vagy II típusú cukorbetegség hosszú távú szövődményeire (mikro- és makrovaszkuláris), és megállapítottak néhányat specifikus terápiás célpontok a HbA1c 8 alapján .

A "glikált hemoglobin" (GHb) kifejezés számos olyan vegyületet ír le, amelyekben közös a hemoglobin glikációja - a glükóz vagy más hexózisok nem enzimatikus kapcsolódásának reakciója a hemoglobin molekulához. A glikáció a hemoglobin szerkezetének több aminosavmaradékánál fordulhat elő, és két szakaszban fordul elő (lásd 1. ábra):

-a glükóz kondenzációja a hemoglobin szabad aminocsoportjával Schiff-bázist generál (instabil aldimin);

-Az Amadori átrendeződés jelenség stabil ketoamint eredményez (glükóz, fruktozamin esetén).

synevo
glikémiás kontroll

Ábra. 1 A hemoglobin glikációja

(Helmut R. Henrichs, HbA1c - Glikált hemoglobin és Diabetes Mellitus adaptálva)

A "glikozilezett hemoglobin" kifejezést kezdetben széles körben használták, de mivel a glikációs reakciók kémiailag eltérnek a glikozilezési reakcióktól, az IUPAC-IUB Biokémiai Nómenklatúra Közös Bizottsága (JBCN) javasolta a kifejezést " glikált hemoglobin ”a fent említett vegyületek leírására 5 .

A HbA1 a glikált hemoglobin teljes mennyiségét jelöli, és megkülönbözteti azt a normál, nem glikált hemoglobin A-tól. A HbA1 többféle lehet; A HbA1c, amelyet azért neveztek el, mert a kromatográfiás elválasztás során a harmadik egyéni A1 csúcsot képezte, a glikált hemoglobin legfontosabb frakciójának bizonyult (75-80%). Az IFCC (Nemzetközi Klinikai Kémiai Szövetség) definíciója szerint a HbA1c irreverzibilis glikált hemoglobint képvisel a β-lánc egyik vagy mindkét amino-terminális valinájában (lásd 2. ábra) 4; 5 .

glikált

glikált

(Garry John, IFCC adaptációja: A HbA1c globális szabványosításának elérése: még nincs meg)

A vér HbA1c szintje korrelál mind a hemoglobin felezési idejével, mind az átlagos vércukorszinttel annak teljes élettartama alatt. Így a HbA1c növekedése arányos a tesztet megelőző utolsó 2-3 hónap átlagos vércukorszintjével (átlagos vércukorszint) (megfelel az eritrociták átlagos élettartamának) 2; 5; 6 .

Egy nemrégiben készült tanulmány (2006-2008), amelyet a legfontosabb nemzetközi cukorbetegség-szervezetek támogattak, pontosabban meghatározta a HbA1c és a becsült átlagos glükóz (eAG) közötti matematikai kapcsolatot. Lineáris regressziós elemzés alapján ezt az összefüggést az egyenlet határozza meg:

Így minden HbA1c értékhez megállapítható a megfelelő átlagos glikémia (eAG) 5:

A1c EAG
% mg/dl mmol/l
6. 126. 7
6.5 140 7.8
7 154 8.6
7.5 169 9.4
8. 183 10.1
8.5 197 10.9
9. 212 11.8
9.5 226 12.6
10. 240 13.4
11. 269 14.9
12. 298 16.5

A HbA1c meghatározása teszt a cukorbetegek glikémiás kontrolljának értékelésére és hosszú távú monitorozására. A cukorbetegség szövődményeinek kockázata szempontjából is prediktív szerepe van: ketoacidosis, nephropathia, retinopathia. Ki tudja értékelni a leghatékonyabb terápiás megközelítést: orális antidiabetikumok, inzulin, β-sejt transzplantáció. Ezen okokból kifolyólag a HbA1c-t rutinszerűen kell elvégezni minden cukorbeteg páciensnél, mind a diagnózis felállításakor, mind az 1; 2; 5; 6 .

A legtöbb egyesület javasolja 6,5% vagy 7% HbA1c mint a cukorbetegek terápiás célpontja. A HbA1c tesztelés gyakorisága a cukorbetegség típusától és a glikémiás kontroll stabilitásától függ:

  • 3-4 hónapos korban, I. típusú cukorbetegségben szenvedő betegeknél, hagyományos kezelés alatt;
  • 1-2 hónapos korban, I. típusú cukorbetegségben szenvedő betegeknél intenzív kezelés alatt;
  • 6 hónapos korban II-es típusú cukorbetegségben szenvedő betegeknél, stabil glikémiás kontroll mellett;
  • 1-2 havonta cukorbeteg terhes nőknél;
  • 1-2 havonta a terhességi cukorbetegségben szenvedő betegek esetében 1; 2 .

Bár 1994 óta az ADA (American Diabetes Association) specifikus terápiás célpontokat állapított meg a HbA1c számára, a különböző módszerekkel kapott eredmények közötti nagy eltérés kezdetben korlátozta a klinikusok megfelelő használatát. Annak érdekében, hogy a HbA1c eredmények összehasonlíthatók legyenek a DCCT/UKPDS vizsgálatok eredményeivel, és ezáltal elérjék azok szabványosítását, 1996-ban végrehajtották az NGSP-t (National Glycohemoglobin Standardization Program). Referencia laboratóriumok hálózatán keresztül az NGSP tanúsítja a különböző gyártók HbA1c-módszereinek DCCT-re való visszavezethetőségét. Az eredmények stabilitásának biztosítása érdekében az NGSP azt javasolja, hogy a gyártók tanúsítsák módszerüket évente 8 .

Egészen a közelmúltig nem javasolták a HbA1c teszt alkalmazását a cukorbetegség diagnosztizálásában, főként az eredmények egységesítésének hiánya miatt. 2010-ben azonban az ADA javasolta a HbA1c felvételét a cukorbetegség diagnosztikai kritériumaiba határértékkel, 6,5% (A vizsgálatot szabványosított DCCT és NGSP tanúsított módszerrel kell elvégezni.) E döntés meghozatalakor a HbA1c vércukorszinttel szembeni előnyeit vették figyelembe:

  • A böjt feltételei nem szükségesek;
  • Magasabb előeanalitikai stabilitás;
  • Intraindividuális biológiai variáció ↓ a glikémiához képest;
  • Változások ↓ stressz és interakciós betegségek esetén.

Másrészt a HbA1c-nek van néhány hátránya:

  • Magasabb költség;
  • Egyes országokban/régiókban a tesztek rendelkezésre állásának hiánya;
  • A HbA1c korrelációjának hiánya az emberek átlagos vércukorszintjével;
  • A HbA1c nem releváns kóros vörösvértest-forgalomban (hemolitikus anaemia, vashiányos vérszegénység) szenvedő betegeknél; Ezekben a helyzetekben a cukorbetegség diagnózisának kizárólag a vércukorszinten kell alapulnia.

Az ADA azt is javasolta, hogy azok a betegek, akiknek HbA1c értéke a tartományban van 5,7–6,4% a cukorbetegség szempontjából magas kockázatúak kategóriájába kell sorolni, valamint az éhomi éhgyomri (IFG) vagy a csökkent glükóztolerancia (IGT) károsodottakkal együtt. .

Betegképzés - Nincs szükség éhgyomorra (éhgyomorra) 7 .

Begyűjtött minta - vér jön 7 .

Betakarítási konténer - porszívó EDTA K3-mal 7 .

Betakarított mennyiség - amennyit a vákuum megenged 7 .

Tesztstabilitás - 7 nap 2-8 ° C-on 7 .

Módszer - monoturbidimetriák (DCCT szabványosítva: Diabetes Control and Complications Trial és NGSP tanúsított: National Glycohemoglobin Standardization Program). Az anti-HbA1c antitestek magas specifitása miatt a glikált β-lánc N-terminálisán lévő 4 aminosav-szekvenciára az assay nem interferenciát mutat a legtöbb patológiás hemoglobinnal, az urémiás betegeknél talált karbamilezett hemoglobinnal és az aszpirin-terápia által generált acetilezett hemoglobinnal. A teszt így az „igaz” HbA1c-t méri az IFCC meghatározása szerint. A teljes hemolizált vérben a HbA1c meghatározása egy turbidimetrikus gátlási reakción alapszik:

  • az első lépésben a minta HbA1c reagál anti-HbA1c antitestekkel, és oldható antigén-antitest komplexeket eredményez;
  • a második szakaszban olyan polihapteneket adunk hozzá, amelyek reagálnak anti-HbA1c felesleggel képződő antitest-polihaptén komplexekkel, amelyeket immunoturbidimetriásan határozunk meg.

A teljes hemoglobin-koncentrációt külön csatornában határozzuk meg. A hemolizált vérmintában a felszabadult hemoglobin származékká alakul át, amelynek jellegzetes abszorpciós spektruma bikromatikusan mérhető; a HbA1c százalékos kiszámítását a DCCT/NGSP protokoll szerint végezzük korrekciós képlettel:

% HbA1c = (HbA1c/Hb) x 91,5 + 2,15 7 .

A központi Synevo laboratóriumban a glikált hemoglobin (Hb A1c) kimutatását HPLC módszerrel (High-Performance Liquid Chromatography assay) végezzük.

Referenciaértékek és az eredmények értelmezése

Az eredmények értelmezése az ADA szerint:

- megnövekedett cukorbetegség kialakulásának kockázata: 5,7-6,4%

Terápiás cél cukorbetegeknél: 1 .

• A megnövekedett Hb A1c hiperglikémia jelenlétét jelzi az elmúlt 2-3 hónapban;

• Az értékek megemelkednek a rosszul kontrollált vagy újonnan diagnosztizált cukorbetegeknél;

• Gyenge glikémiás kontroll esetén a Hb A1c szint akár 20% -kal is emelkedhet;

• A csökkent HbA1c fokozatosan, több hónapon keresztül következik be, amikor a normál glikált hemoglobinnal rendelkező eritrociták helyettesítik az emelkedett 2 szintet; 6 .

• A tünetek nélküli betegeknél megnövekedett eredményt meg kell ismételni a cukorbetegség diagnózisának megerősítése érdekében 1 .

Kimutatási határ - HbA1c: 0,2 g/dl (0,124 mmol/l)

Az eredmények értelmezése

• a Hb A1c növekedése hiperglikémia jelenlétét jelzi az elmúlt 2-3 hónapban;

• az értékek megemelkednek a rosszul kontrollált vagy újonnan diagnosztizált cukorbetegeknél;

• a cukorbetegség szabályozása megfelelő, ha 7% alatti értékeket érnek el 6;

• a Hb A1c szint 20% -ra emelkedhet hiányos glikémiás kontroll esetén;

• A csökkenő HbA1c fokozatosan, több hónap alatt következik be, mivel a normál glikált hemoglobinnal rendelkező vörösvértestek helyettesítik az emelkedett 2 szintet .

A tünetek nélküli beteg megnövekedett eredményét meg kell ismételni a cukorbetegség diagnózisának megerősítése érdekében 1 .

Határértékek és interferenciák

A cukorbetegség mellett a HbA1c növekedése a következő helyzetekben is előfordulhat: vashiányos vérszegénység, poszt-splenectomia, policitémia (az eritrocita élettartamának bizonyos megnyúlása miatt).

Csökken a terhesség, a krónikus vérveszteség, a poszttranszfúzió és a hemolitikus vérszegénység (a vörösvérsejt-élettartam csökkenése és a glükóz-expozíció következményes csökkenése miatt) 2; 6 .

növekszik: aszpirin, atenolol, béta-blokkoló, gemfibrozil, hidroklorotiazid, indapamid, lovasztatin, nikardipin, propranolol 3 .

csökken: deferoxamil, diltizem, enalapril, glipizid, inzulin, lisinopril, metformin, pravasztatin, ramipril, verapamil 3 .

• Analitikai interferenciák: nagyon ritka esetekben monoklonális gamapathiában szenvedő betegeknél, különösen IgM-ben (Waldenström-kór) a kapott eredmények nem lehetnek meggyőzőek .

1. American Diabetes Association. A cukorbetegség orvosi ellátásának normái. In Diabetes Care, 34. évfolyam, 1. január, 2011. január.

2. Frances Fischbach. Kémiai tanulmányok. A laboratóriumi és diagnosztikai tesztek kézikönyvében. Lippincott Williams & Wilkins, USA, 8. kiadás, 2009, 355-359.

3. Frances Fischbach. A kábítószerek hatása a laboratóriumi vizsgálatokra. A laboratóriumi és diagnosztikai tesztek kézikönyvében. Lippincott Williams & Wilkins, USA, 8. kiadás, 2009, 1242.

4. Garry John, IFCC. A HbA1c globális szabványosításának elérése: Még nincs meg.

5. Helmut R. Henrichs. HbA1c-glycated hemoglobin and Diabetes Mellitus, 1. kiadás, Bréma: UNI-MED, 2009.

6. Jacques Wallach. Endokrin rendellenességek. In A diagnosztikai tesztek értelmezése. Orvostudományi Kiadó, Bukarest, 7. kiadás, 2006; 804 806.

7. Synevo Laboratórium. Az alkalmazott munkatechnika konkrét hivatkozásai 2011. Ref. Típus: Katalógus.

8. Randie R. Little, Curt L. Rohlfing, David B. Sacks, Nemzeti Glikohemoglobin Szabványosítási Program (NGSP) Irányító Bizottsága. A hemoglobin A1c mérésének állapota és a fejlesztés céljai: A káosztól a rendig a cukorbetegség ellátásának javítása érdekében. In Clinical Chemistry, 57: 2, 205-214, 2011.