Immunológia - Bioxa - 11 orvosi biológiai laboratórium - Reims, Epernay, Tinqueux, Sézanne

Immunológia

Nukleáris antitestek

Az anti-nukleáris antitestek (ANA) olyan autoantitestek, amelyek a test sejtjeinek magjának antigén determinánsai ellen irányulnak, ezeket a szervek nem specifikus autoimmun betegségeiben, az úgynevezett connectivitisben észlelik, amelyek közül a legismertebb a Lupus Erythematosus Disseminated (LED).

Indirekt immunfluoreszcencia (IFI) keresi őket humán Hep-2 sejtkultúrákon, amelyeken a fluoreszcencia számos aspektusát megkülönböztethetjük a kimutatott antitest típusához képest. A fluoreszcenciában kapott képek finomsága lehetővé tette számos különféle típusú patológiához kapcsolódó antitest leírását (lásd: Keringő antikoagulánsok).

ANA detektálása IFI által

Elv: A páciens szérumát a szubsztrátumra rakják le (leggyakrabban a Hep-2 sejteket), és nedves kamrában 30 percig inkubálják. Ez idő alatt a szérumban jelenlévő antitestek kötődnek antigén célpontjaikhoz, és jelenlétük kiderül. fluoreszceinnel jelölt anti-humán immunglobulin antitest hozzáadásával. Az olvasás meghatározza ennek a technikának a 2 alapvető paraméterét: a fluoreszcencia megjelenését és az antitest-titert.

Értelmezés: A fluoreszcencia megjelenése lehet homogén, foltos, nukleoláris, citoplazmatikus vagy membrán, a felismert antigének függvényében, e különböző típusok közötti összes keverék lehetséges.

Az antitest titert a szérum utolsó hígításával fejezzük ki, amely látható fluoreszcenciát ad, felnőtteknél a minimális szignifikáns szint 1/80. (Gyermekeknél 1/40.), A szinteket 1/640. Hígításig mérjük, ami nagyon magas aránynak felel meg, a hígítás folytatható a fluoreszcencia két típusának megkülönböztetésére, amelyek átfednének ugyanazon a hordozón.

Az ANA azonosítása

A megfigyelt fluoreszcencia megjelenésétől függően, amely többé-kevésbé utal egy bizonyos típusú antitestre, az ANA azonosítására különböző technikákat lehet alkalmazni.

1 Anti-DNS antitestek, natív és/vagy denaturált:
A legtöbb anti-DNS antitest mindkét típusú molekulát felismeri, mivel a natív DNS kettős szálú és denaturált egyszálú DNS, az anti-DNS antitestek keresése önmagában kevéssé érdekes (sok esetben klinikai összefüggés nélkül). Jelenleg 4 technika áll rendelkezésre ezen antitestek keresésére.

Farr-teszt: A szérum radioaktívan jelölt DNS-vel történő inkubálása után az immunkomplexek kicsapódnak, és a csapadékban jelenlévő radioaktivitás arányos a mintában található anti-DNS antitestek szintjével. Ennek a tesztnek nagy előnye, hogy kvantitatív (eredmény IU/ml), de technikai megvalósítása nehéz.
IFI a Crithidia luciliae-n: Ez egy flagellált protozoon, amely körkörös natív DNS-ben nagyon gazdag kinetoplasztot tartalmaz, a fluoreszcens kép lehetővé teszi a könnyű leolvasást, a kinetoplast, amely nem messze helyezkedik el a flagellum alaptestétől, könnyen megkülönböztethető a magtól. A kapott eredmény minőségi.
ELISA tesztek: A mikrotiterlemezek üregének alján rögzített natív DNS-fragmensek megkötik a páciens szérumának antitestjeit, amelyeket ezután például peroxidázzal jelölt anti-humán IgG antitest fog feltárni. az eredmények kvantitatívak, és az alkalmazott technikától függően különböző egységekben vannak kifejezve (leggyakrabban NE/ml).
Immunodot: Ez egy ELISA technika, amelyet nitrocellulóz csíkon hajtanak végre, amelyhez natív DNS kapcsolódik. Az olvasás kvalitatív eredményt ad, amelyet alacsony ellenanyagszint esetén néha nehéz értelmezni.

2 anti-hiszton antitest:
Ez egy olyan tarka antitestcsoport, amely különböző hisztonokkal vagy nukleoszómákkal reagál, ezeket leggyakrabban ELISA-val keresik, megtalálhatók az SLE-ben és a gyógyszerek által kiváltott SLE-k többségében, klinikai érdeklődésük egyelőre megmarad.

3 Oldható nukleáris antigének ellenanyagok (ENA):
Ezek a mag kivonható alkotórészei ellen irányulnak, és felelősek a különböző foltos fluoreszcenciákért. Az első leírt pácienshez (Sm), a kapcsolódó patológiához (SS a Sjögren-szindrómához) vagy a molekulatömegükhöz (gp100) kapcsolódó nevek.

Osztályozás:

Anti-RNP antitestek: SLE-ben és vegyes connectivitisben találhatók.

Anti-Sm antitestek: A lupus 70% -ában találhatók és gyakorlatilag csak ebben a patológiában.

Anti-SS-A antitestek: Néhány SLE-ben megtalálhatók, de különösen a Gougerot-Sjögren-szindrómában. Az atrioventrikuláris blokkolás megnövekedett kockázatával is összefüggésben vannak azoknál az újszülötteknél, akiknek anyja hordozza ezt a típusú ellenanyagot.