Muller-ellenes hormon (AMH) - Synevo

Általános információ

AMH - a növekedési faktor β (TGF-β) családjának, amelyet Müller-gátló anyagnak is neveznek - főként a férfi differenciálódás szabályozásában játszott szerepe miatt vizsgálták az embrionális periódusban. A magzati here Sertoli sejtjei által termelt hormon tehát a női reproduktív traktus elsődleges elemeinek, a malériális csatornáknak a visszafejlődését indukálja, és ezáltal hozzájárul a férfi nemi szervek normális fejlődéséhez.

A női magzatokból hiányzik az AMH, ami a női belső nemi szervek fejlődéséhez vezet. A pubertás kezdetével az AMH-t, a B-inhibitorhoz hasonlóan, a petefészek növekedési tüsző szemcsés rétegének sejtjei termelik, és nem az őshagymák, sem az antrális tüszők a növekedés utolsó szakaszában (a FSH). A szelektálatlan növekedési tüszők (potenciálisan termékeny primer és szekunder tüszők) szemcsés rétegsejtjeiben történő specifikus expressziója miatt az AMH ideális marker a petefészek-tartalék becsléséhez 1 .

Az AMH gátló hatást gyakorol mind az őshagymák toborzására, mind a növekedési tüszők válaszára az FSH follikulusstimuláló hormonra. Az AMH-szekréció hormonális szabályozásának módja nincs pontosan meghatározva. Állat- és embermodelleken végzett vizsgálatok kimutatták, hogy AMH hiányában az őshagymák nagyobb arányban toborozódnak, így tartalékuk idő előtt kimerül, és a menstruációs ciklus fiatalabb korban megszakad. Másrészt az alacsony FSH-szint alapján, nagyobb számú növekedési tüsző jelenlétében feltételezték, hogy AMH hiányában a tüszők érzékenyebbek az FSH működésére. Az AMH gyengíti az FSH-függő aromatáz aktivitás és az LH receptor expressziójának növekedését. Így a follikulusok FSH-érzékenységére gyakorolt ​​gátló hatása szerepet játszhat a szelekciós folyamatban 2. Úgy gondolják, hogy minden tüszőnek megvan a maga küszöbértéke az FSH-koncentrációra, amelyet túllépni kell a szelekció megkönnyítése érdekében. A tüszők alacsony AMH-expressziója csökkenti az FSH küszöbét, ami a tüszők növekedését és ovulációját okozza a következő ciklusban 2; 3 .

Az életkor előrehaladtával az AMH szintje folyamatosan csökken a nőkben a petefészek funkcionális tartalékával összefüggésben. Csökkenése néhány évvel az FSH nyilvánvaló növekedése előtt jelentős. Emiatt az AMH jobban fel tudja azonosítani azokat a nőket, akiknek termékenysége csökken, és útmutatást adhat a menopauzára való áttéréshez a következő 4 évben 4; 5 .

Az AMH szerepének, mint a növekvő tüszőrezervátum-perifériás jelnek, klinikailag fontos előnyei lehetnek. Meddőségi kezelés alatt álló betegeknél a petefészek öregedését az exogén gonadotropin beadására adott alacsony válasz és a terhesség esélyének csökkenése jellemzi. Fontos a csökkent petefészkekészlettel rendelkező személyek pontos azonosítása és ezáltal a stimulációs kezelésekre adott rossz válasz, hogy elkerüljék őket szükségtelenül in vitro megtermékenyítési programokban. Másrészt a petefészek-tartalék értékelése hasznos azoknál a betegeknél, akiket időskor miatt általában kizárnak ezekből a programokból 1 .

Számos tanulmány kimutatta, hogy az AMH nagyon jó marker a petefészek válaszának meghatározására in vitro megtermékenyítési programokban. A hormon meghatározása a korai follikuláris fázisban (a menstruációs ciklus 3. napja) egy nem kiválasztott betegcsoportban azt mutatta, hogy az AMH-szint alacsonyabb a gyenge petefészek-válaszban szenvedő betegeknél, összehasonlítva a normál válaszúakkal, a petefészek-válasz pedig a visszanyert petesejtek. Kimutatták, hogy a szérum AMH szintje szorosan korrelál a kezelés előtti antrális tüszők számával és a petefészek-stimulációból kinyert petesejtek számával 6; .

Az FSH általi AMH-kontroll hiánya mind emberekben, mind állatokban megerősítést nyert, ami arra utal, hogy a hormon inkább parakrin faktorként működik, mint szisztémásként, és nem része annak a negatív visszacsatolási huroknak, amelyben a gonadotropinok részt vesznek. Így az endogén FSH és LH termelés növekedését okozó, gonatropin-felszabadító hormon (GnRH) agonistával végzett egyszeri magas dózisú kezelés nem befolyásolja a szérum AMH-szintjét. Hasonlóképpen, terhesség alatt az AMH állandó marad, a gonadotropin státus nem befolyásolja, csak a follikuláris populációt tükrözi 1; 7 .

Összefoglalva: a szérum AMH szintje szorosan korrelál az antrális tüszők számával; extrapolációval úgy tekinthető, hogy ezek tükrözik az őshagymatartalék nagyságát. A petefészek-tartalék értékelése fontos mind az in vitro megtermékenyítési klinikák, mind a beteg számára, aki a termékenységi potenciál értékelése érdekében a szakemberhez fordul 1 .

A szérum AMH szintje a petefészek-tartalék markerének szerepe mellett fontos lehet a petefészek patológiájában és a policisztás petefészek szindrómában. Bár ez a szindróma a klinikai megnyilvánulások és a biokémiai jellemzők széles skáláját tartalmazza, gyakori rendellenesség a domináns follikulus szelekció megszakadása egymást követő anovulációval. Ez a gyenge szelekciós mechanizmus kis antral follikulusok felhalmozódásához vezet, amelyek jelentősen hozzájárulnak az AMH termeléséhez. Feltételezik, hogy policisztás petefészek-szindrómában szenvedő betegeknél az aromatáz aktivitás csökkenhet, mivel a tüszők nem termelnek elegendő ösztradiolt. Az AMH szintén gátolja az aromatáz aktivitást, ami arra utal, hogy hozzájárul a szindróma súlyosságához 1 .

A policisztás petefészek-szindrómában szenvedő betegek jelentős százalékának elhízása, inzulinrezisztenciája és kompenzációs hiperinsulinémia van. A megemelkedett inzulinszint részben felelős a szindrómához kapcsolódó hiperandrogenizmusért. Ezekben a betegeknél az inzulinszintet csökkentő gyógyszerekkel (pl. Metformin) végzett kezelés, és ezáltal közvetett módon befolyásolja az androgéntermelést, kedvező hatásokkal járhat. .

A szérum AMH szintje megnövekedett néhány petefészek granulosa daganatban szenvedő betegnél; Az AMH az A-inhibitorral, B-inhibitorral, ösztradiollal és a CA-125-gyel együtt hasznos lehet e betegek diagnosztizálásában és monitorozásában.

Férfiaknál az AMH-értékek megkülönböztethetik a kriptorchidizmust az anorexiától, a genitális kétértelműségű kisgyermekeknél pedig a marker meghatározása hasznos a herék jelenlétének és működésének értékelésére. .

AMH szerkezet

Szerkezetileg az AMH egy homodimer glikoprotein. Szekréciója előtt a hormont glikolízisnek és dimerizációnak vetik alá, 140 kDa-os prekurzort (proAMH) generálva, amelynek két azonos alegysége diszulfidhidakkal van összekötve. Minden monomer tartalmaz egy nagy N-terminális pro-régiót és egy sokkal kisebb érett C-terminális domént. A TGF-β család többi tagjától eltérően úgy tűnik, hogy az AMH-nak az N-terminális domén jelenléte szükséges a C-terminális domén aktivitásának fokozásához és biológiailag aktívvá válásához. A citoplazmatikus tranzit során az AMH egy meghatározott helyen hasad a pro-régió és az érett domén között, így biológiailag aktív homodimerek keletkeznek: egy 110 kDa N-terminális homodimer és egy 25 kDa C-terminális homodimer, amelyek továbbra is társulnak egy komplexben nem kovalens. Az AMH II típusú receptorának csak a biológiailag aktív formája képes megkötni az AMH 10-et .

A laboratóriumunkban a Cobas 6000 platformon bevezetett automatizált teszt (Roche Diagnostics) az összes AMH-t (hasított és nem hasított formában) detektálja két monoklonális antitest segítségével, amelyek felismerik az érett AMH régiót, illetve a pro-AMH régiót. Az AMH vizsgálati módszereket összehasonlító vizsgálatokat követően az új automatizált teszttel kapott eredmények nagyon jól korreláltak az AMH Gen II ELISA tesztekkel (Beckman Coulter) és az AMH/MIS Ansh Labs (korrelációs együttható ≥0,95) eredményeivel. A meghatározott AMH-koncentrációk csökkenő sorrendben voltak: Ansh Labs> AMH Gen II> AMH Roche. Az AMH Ansh Labs és az AMH Gen II alkalmazásával kapott értékek 30% -kal, illetve 20% -kal voltak magasabbak, mint az új automatikus teszttel 11 .

Ajánlások az AMH meghatározására

- a termékenységi potenciál értékelése: az AMH-szint tükrözi a petefészek állapotát (korrelál az antrális tüszők számával, valamint a menstruációs ciklus 3. napján az inhibitor B-szinttel); az FSH-val és az inhibin B-vel ellentétben a szérum AMH-szintje nem mutat ciklikus eltéréseket, így a minta a menstruációs ciklus bármely napján vehető;

- a petefészek öregedési jelenségének értékelése: az alacsony bazális AMH-szint az in vitro megtermékenyítési technikákra adott rossz válaszsal járó csökkent petefészek-tartalékot jelzi;

- prediktív érték a menopauza kezdetén: az AMH szintek prediktív értékkel bírnak a menopauzához való átmeneti időszak telepítésekor;

- a policisztás petefészek-szindróma értékelése: a szérum AMH-szintje megemelkedik a policisztás petefészek-szindrómában, és hasznos marker lehet e betegség mértékének felmérésére 1; .

- AMH-szekretáló petefészek granulosa daganatok diagnosztizálása és monitorozása;

- genitális kétértelműséggel vagy interszexualitással rendelkező kisgyermekek értékelése;

- a herék működésének értékelése gyermekeknél 9 .

Betegképzés - nincs szükség speciális képzésre 12 .

Begyűjtött minta - vénás vér 12 .

Betakarítási konténer Vakuumálószer antikoaguláns nélkül, elválasztó géllel/anélkül 12 .

Betakarítás után szükséges feldolgozás - a szérumot centrifugálással választják el; ha a vizsgálatot nem lehet ugyanazon a napon elvégezni, a szérumot -20 ° C-on tároljuk 12 .

A minta mennyisége - legalább 0,5 ml ser 12 .

A bizonyíték elutasításának okai - intenzíven hemolizált példány 12 .

A minta stabilitása -6 hónap -20 ° C-on; ne olvasszon/fagyasszon 12 .

Módszer –Immunokémia elektrokemilumineszcencia detektálással (ECLIA) 12 .

Referencia intervallumok és az eredmények értelmezése

A referencia intervallumokat látszólag egészséges felnőttek kaukázusi populációján (148 férfi, 93 nő, akik nem szednek fogamzásgátlót) meghatározták:

• Férfiak: 1,43 - 11,6 ng/ml
• nők:

Referencia intervallumokat állapítottak meg a policisztás petefészek szindrómában szenvedő betegeknél is (149 vizsgált nő): 2,41-17,1 ng/ml.

Az említett referenciatartományok a teszt után kapott értékek 5-95% -át képviselik, kivéve a 35-39 éves, 40-44 éves és 45-50 éves nők esetében a tartományokat, amelyek 10-90% -ot képviselnek (a szám miatt a vizsgált betegek alacsonyabb száma az adott korcsoportokban) 12 .

A petefészek-tartalék becslése

E teszt hasznosságát a petefészek-tartalék becsléséhez egy prospektív multicentrikus vizsgálatban vizsgálták, 451 18-44 éves nő tesztelésével. A kapott AMH-értékeket korreláltuk a transzvaginális ultrahanggal meghatározott antrális tüszők (AFC) számával (2-10 mm átmérőjű tüszőket mértünk). olyan sok

Az AMH-t és az AFC-t ugyanazon menstruációs ciklus 2. és 4. napján határozták meg.

3 AFC csoportot hoztak létre:

Az ezekben a csoportokban előforduló prevalenciától (15%, 37%, 48%) függően kiszámoltuk az AMH kvantumait (c1 = 0,681 ng/ml, c2 = 2,27 ng/ml), hogy meghatározzuk az alábbi táblázatban szereplő kategóriákat:

AFC 0-7	AFC 8-15	AFC> 15
AMH ≤ 0,681 ng/ml	43 (63,2%)	22 (32,4%)	3 (4,4%)	68
0,681 ng/ml	20 (12%)	95 (56,9%)	52 (31,1%)	167
AMH> 2,27 ng/ml	3 (1,4%)	52 (24,1%)	161 (74,5%)	216
N	66	169	215	451

50 évnél idősebb gyermekek és nők esetében nincs meghatározva referencia intervallum. Iránymutatásként megemlítjük a LabCorp (Laboratory Corporation of America) 13 által jelentett értékeket:

A menopauzás nőknek, valamint azoknak, akiknek bármilyen oka van (ideértve a kemoterápia által kiváltott) korai petefészek-elégtelenséget, alacsony AMH-értékek vannak, gyakran a módszer kimutatási határértéke alatt vannak.

A petefészek granulosa daganatai az A, B és AMH inhibitorok mellett szekretálnak, így ezen markerek megemelkedett szintje jelezheti ilyen neoplazma jelenlétét petefészek tömegű nőknél. Hatékony kezelés után a markerek jelentős csökkenést regisztrálnak; az emelkedő szint a betegség kiújulásának/progressziójának indikátora.

Interszexualitású gyermekeknél az emelkedett AMH-értékek a hereszövet jelenlétére utalnak, míg a kimutathatatlan szintek ezt tagadják.

Azoknál a fiúknál, akiknek heréje hiányzik a herezacskóban, a kimutatható AMH-értékek valószínűleg a cryptorchidizmust jelzik, míg a kimutathatatlan szintek anarchiára vagy rendellenesen elhelyezkedő diszfunkcionális ivarmirigyre utalnak. .

Kimutatási határ - 0,01 ng/ml .

Határértékek és interferencia

Az AMH-teszt során kapott értékeket mindig korrelálni kell a klinikai képpel és a többi vizsgálat eredményeivel.

Zavart okozhat a készlet egyes elemeiben, és a következő meggyőző eredményeket eredményezheti:

---