Willebrand-antigén faktor aktivitás - Synevo

Általános információ

A plazma FvW felezési ideje

8-12 óra. A keringő FvW körülbelül 15% -a a thrombocyta rekeszben található, amely teljes egészében intramedulláris szintézisből származik, de a hemostasishoz mindkét FvW medence szükséges. Az endoteliális sejtek nagyobb multimereket választanak ki, mint a plazmában keringők; lebontják őket egy speciális metalloproteáz, az ADAMTS13 által, ami a legnagyobb multimerek méretének csökkenését eredményezi. A csökkent ADAMTS13 aktivitás, veleszületett vagy szerzett inhibitorok által, központi szerepet játszik a trombotikus thrombocytopeniás purpura patofiziológiájában 3; 4 .

Az FvW kötőhelyekkel rendelkezik az FVIII-hoz, a heparinhoz, a kollagénhez, a GPIb és a GPIIb-IIIa vérlemezke-glikoproteinekhez, amelyeknek több funkciója van a hemostasisban. Az FvW stabilizálja az FVIII-t azáltal, hogy megvédi a PC-vel aktivált inaktiválódástól, így meghosszabbítja felezési idejét a keringésben és hatékonyan elhelyezi az érsérülés helyén 1; 2; 4. Minden FvW monomer kötődik az FVIII-hoz, azonban in vivo a monomereknek csak 1-2% -át foglalja el az FVIII, ezzel magyarázva, hogy a nagyon nagy multimerek jelenléte nem elengedhetetlen az FVIII hordozófunkciójához. Azonban a plazma FvW változása összefügg a plazma FVIII 2 következetes változásaival .

Az FvW egy strukturális fehérje és a szubendoteliális mátrix része. Fontos szerepet játszik a vérlemezkék subendoteliális felületekhez való rögzítésében is, különösen a mérsékelt vagy nagy nyíróerőknél (ez a funkció részben in vivo tárható fel a vérzési idő mérésével), hídként funkcionál a vérlemezkék között és elősegíti a vérlemezkék aggregációját. Kezdetben a vérlemezkék lehorgonyzása az érsérülés helyén történik az FvW és a GPIb kölcsönhatása révén, majd a vérlemezkék aktiválása és a GPIIb-IIIa expozíciója következik be, amely megköti a fibrinogént, az FvW-t és más ligandumokat 1; 4. Mindkét FvW-kötési aktivitás maximális a nagy molekulatömegű multimerekben. A GPIb és az FvW közötti kölcsönhatás in vitro felfedezhető a ristocetin 2 antibiotikum hozzáadásával .

A Nemzetközi Hemostasis és Trombózis Társaság által az FVIII-FvW komplexum számára ajánlott nomenklatúra 2:

Ristocetin kofaktor aktivitás

Kollagénkötő aktivitás

FVIII megkötő képesség

Az FvW működésének rendellenességei a von Willebrand-kórt (vWD) okozzák, amely a leggyakoribb örökletes vérzéses betegség, az általános populációban körülbelül 1% -os prevalenciával, de klinikailag szignifikánsan 1: 1000-es prevalenciával 4. Az állapotot bőr-nyálkahártya vérzések, autoszomális domináns átvitel és elhúzódó vérzési idő jellemzi. A betegség nem homogén, egyrészt az FvW által játszott sokféle fiziológiai funkció miatt, másrészt a különböző genetikai modellek bemutatása miatt. A plazma FvW-szint változásainak körülbelül 60% -a genetikai tényezőknek tulajdonítható. Így a 0 vércsoportú egyének FvW-szintje átlagosan 30% -kal alacsonyabb, mint a többi vércsoporté. Ezenkívül az FvW szintje hormonális szabályozás alatt áll; más tényezők is befolyásolják, amelyek bonyolítják a betegség kifejeződését. A menstruációs ciklusban akár 20% -os változásokról is beszámoltak, a legalacsonyabb szintet a korai follikuláris fázisban regisztrálták. Szintén a szint növekszik

15% az öregedés minden évtizedében 3. A jelenlegi vWD osztályozás két fő kategóriát határoz meg: 2; 3; 4:

Egyéb altípusokról számoltak be, köztük a thrombocyta típusról (pseudo-vWD), amely a thrombocyta GPIb mutációiból származik. Vannak nagyon ritkán megszerzett vWD formák is, amelyek autoantitestek jelenlétével társulnak, autoimmun betegségek, klonális proliferáció, hypothyreosis 4; 6; 7 összefüggésben .

Ajánlások a teszteléshez - az FvW hiányosságának/rendellenességének diagnosztizálása, a vWD szubtipizálása és a hemofília A-tól való differenciálódás (az FVIII aktivitás meghatározásával együtt) a dezmopresszinnel vagy FvW koncentrátummal végzett kezelés terápiás hatékonyságának figyelemmel kísérése (FvW: RCo) 7 .

Betegképzés - éhgyomorra (éhgyomorra) 5. Kerülni kell az orális antikoagulánsokkal történő kezelést 2 héttel korábban, a heparinnal pedig két nappal a vizsgálat előtt; nem heparinált katéterből gyűjtenek 6. A vizsgálatokat a transzfúziótól, az FvW helyettesítő terápiától, a dezmopresszin 7 távolságától kell elvégezni .

Begyűjtött minta - vénás vér .

Betakarítási konténer - vákuumozó 0,105 M Na-citráttal (nátrium-citrát - vér arány = 1/9). A torna által kifejtett nyomásnak a szisztolés nyomás és a diasztolés nyomás értéke között kell lennie, és nem haladhatja meg az 1 percet. Ha a vénás defekt nem sikerült, új kísérletet ugyanarra a vénára csak 10 perc elteltével lehet megtenni .

Betakarított mennyiség - 2 porszívót betakarítanak, amíg a vákuum lehetővé teszi; a minta részleges koagulációjának megakadályozása érdekében az 5 cső inverziós mozdulataival biztosítani kell a vér és az antikoaguláns helyes keverését. .

Betakarítás után szükséges feldolgozás - a mintát 15 percig 2500 g-on centrifugáljuk, amelyet azonnal plazma-elválasztás és fagyasztás követ; a laboratóriumon kívül gyűjtött mintákat a fagyasztott mintákhoz szánt edénybe szállítják 5 .

A bizonyíték elutasításának okai - nem teli vacutainer; hemolizált vagy koagulált vérminta; plazma, amelyet a laboratóriumban nem fagyasztottak le 5 .

A minta stabilitása - az elválasztott plazma 4 hétig stabil - 20 ° C-on 5 .

FvW: Ag - immunoturbidimetriás: a plazma multimerek összetételétől függetlenül méri az FvW szintjét (specifikus anti-FvW poliklonális antitestekkel bevont latex részecskék agglutinálódnak FvW antigén jelenlétében, növelve az optikai sűrűséget, egyenesen arányosak a vizsgált plazma FvW koncentrációjával) .

FvW: RCo - a páciens plazmáját összekeverik formalinban rögzített vérlemezkékkel, ristocetin jelenlétében, és a thrombocyta aggregáció mértékét foto-optikailag detektálják, és arányos a plazma FvW aktivitásával 6 .

Referenciaértékek 5.

1. Antigén:

15 nap - 1 hónap	46 - 220%
1–5 hónap	36 - 217%
5 -11 hónap	48 - 199%
11 hónap - 5 év	41 -186%
5-10 év	45 -145%
10 -17 év	56 -123%
> 17 év - O vércsoportú emberek	42-141%
> 17 év - A, B vagy AB vércsoportú emberek	66–176%

2. TEVÉKENYSÉG:

O vércsoportú emberek	40–125%
Az A, B vagy AB vércsoportú emberek	49–163%

Az eredmények értelmezése

A vWD-t figyelembe kell venni minden olyan beteg differenciáldiagnózisában, akinek vérzése személyes és családi kórtörténetében normális PT és aPTT. Az aPTT elhúzódhat a vWD súlyos formáiban alacsony FVIII szint mellett 6. A vérlemezkeszám is általában normális, de a 2B típusú betegeknél thrombocytopenia fordulhat elő. A vérzési idő általában meghosszabbodik, de normális lehet a vWD enyhe formáiban.

A táblázat bemutatja az FvW két specifikus tesztjének módosításait, valamint az FVIII aktivitását a vWD 2 különböző típusaiban; 6; 7

---