A bél mikrobiomjának vizsgálata - R

Ezt a tesztet Daniela tervezte Tatjana Mijatovic orvossal és tudóssal együtt az R.E.D. Laboratories-től. Belgiumból. A cél a bél teljes és komplex állapotának és az azt populáló mikroorganizmusoknak az elemzése.

autizmussal gyermekeknél
Tatjana Mijatovic Ph.D. címet visel. a molekuláris biológiában. 50 publikációt írt lektorált folyóiratokban (21 főszerzőként és 29 társszerzőként), első szerzőként 2 szabadalommal rendelkezik. 2011 óta Tatjana Mijatovic projektvezető, laboratóriumi vezető és KSH (tudományos főigazgató) az R.E.D. Laboratories-nál. R.E.D. laboratóriumok egy belgiumi Biotech cég, amely speciális teszteket dolgoz ki és végez olyan multifaktoriális betegségek értékelésére, mint a krónikus fáradtság szindróma, krónikus immunműködési zavarok, krónikus fertőzések, bélműködési zavarok, autizmus stb. Dr. Mijatovic számos csoportban és nemzetközi tudományos hálózatban dolgozik, az autizmus biológiai markerei. Korábban Dr. Mijatovic projekt-menedzserként volt jelen a kutatás és fejlesztés területén, valamint biológia vezetőként az új rákellenes szerek felfedezésére szakosodott biotechnológiai vállalatnál, gyógyszeripari vállalatok publikációinak tanácsadó vezetőjeként és (iii) tudósként. a belgiumi Brüsszeli Szabadegyetemről (ULB).

A belekről van szó

  • MSA (dysbiosis)
  • Zonulin (áteresztő bél)
  • sIgA (bélimmunitás/bélgyulladás)
  • EDN/EPX (krónikus bélgyulladás)
  • Gyulladásos bélmarkerek (FOB, Calprotectin, Transferrin, Lactoferrin)
  • Fertőzések (tesztek a táblázat 3. oszlopában)
  • Az ár nem tartalmazza a szállítási költségeket
  • A teszteket Belgiumban végzik
  • Első tesztként ajánlott

Bélellenőrzés

  • MSA (dysbiosis)
  • sIgA (bélimmunitás/bélgyulladás)
  • Gyulladásos bélmarkerek (FOB, Calprotectin, Transferrin, Lactoferrin)
  • Add hozzá, ha az első elemzéskor felmerülnek:
  • Zonulin (áteresztő bél): +100 €
  • Fertőzések: az első elemzésnél csak pozitív (az árakat lásd alább)

fertőzések

  • Cryptosporidium/Giardia Ag: 42 €
  • HPYL (Helicobacter Pylori Ag): 35 €
  • SALMO (szalmonella Spp. Ag): 35 €
  • LISTA (Listeria monocitog. Ag): 35 €
  • ADENOV (adenovírus Ag): 35 €
  • SHIG (Shigella spp. Ag): 35 €
  • ENTEROV (Enterovirus Ag): 40 €
  • HepA (Hepatitis A Ag vírus): 40 €
  • EntaHIST (Entamoeba histol Ag): 35 €
  • CampBact (Campylobacter Ag): 35 €
  • YERSI (Yersinia enteroc. Ag): 42 €
  • ClostCOMBO (Clostridium difficile Ag GDH, A + B toxin): 60 €

Az elemzések leírása

A GASTROINTESTINAL TRACT normál működése

A gyomor-bél traktus az egyik legnagyobb interfész az emberi belső környezet és a külvilág között. Feladata az élelmiszer által biztosított alapvető tápanyagok emésztése és felszívása. Ugyanakkor gátat biztosít, amely megakadályozza az egészséget veszélyeztető molekulák átjutását a bélnyálkahártyán és a szisztémás keringésbe.

A bélműködési zavarokat jelenleg számos krónikus betegség, például allergia, autoimmun rendellenesség, gyulladásos rendellenesség és degeneratív betegség elősegítő tényezőjének tekintik.

A bél mikroflóra nagyfokú komplexitású ökoszisztéma. A mikroflóra nemcsak a tápanyagok emésztésében és felszívódásában, a vitaminok és zsírsavak szintézisében, a bevitt vegyszerek méregtelenítésében, hanem az immunrendszer szabályozásában is alapvető szerepet játszik. A mikroflóra összetételének megváltozása ezért súlyos következményekkel járhat a gazdaszervezet egészségére nézve. A bél működésének gyakori rendellenessége a dysbiosis. Ez a kórokozó baktériumok szaporodása a bélben. Becslések szerint a felnőtt emberi bélrendszerben akár 50 különböző baktériumfaj is található, amelyek több mint 500 különböző fajt jelentenek.

BELBENI MEGTARTHATÓSÁG: MEGÁLLAPÍTHATÓ BELBELI SZINDRÓMA

Az egészséges bélnyálkahártya általában a teljes emésztés eredményeként felszívja a kis molekulákat. A bélsejtek speciális transzportfehérjéket tartalmaznak, amelyek a tápanyagokat a bélfalon keresztül a vérbe viszik. A nagyobb molekulákat ezek a rendszerek nem szállítják, és általában a bélben tárolódnak, mert a bélnyálkahártya sejtjei csoportosulnak. Az áteresztő bél szindróma (LGS) olyan állapot, amelyben csökken a bélfal azon képessége, hogy nagy és nem kívánt molekulákat tartson távol. Amikor a bélfal sejtjei közötti terek kitágulnak, makromolekulák, antigének és toxinok jutnak el a vérbe.

Számos tényező vezethet áteresztő bélhez:

  • Élelmiszer-összetevők: bizonyos élelmiszer-összetevők (fehérjék, finomított szénhidrátok) fermentálása potenciálisan káros késztermékekhez vezet: ammónia, aminok, fenolok, szulfidok ... ezek a vegyületek csökkentik a nyálkahártya sejtjeinek életét. Az élelmiszer-adalékanyagok, az alkohol, a koffein irritálja a bélfalat.
  • Bél dysbiosis: a mérgező vegyületek fermentációval történő előállítása a bélben lévő baktériumok típusától is függ. Diszbiózis esetén a túlméretezett kórokozó baktériumok méreganyagokat és vegyületeket termelnek, amelyek nagyon károsak a bélsejtekre. Például a redukáló szulfát baktériumok mérgező hidrogén-szulfidot termelnek.
  • Ételallergia és intolerancia: bizonyos ételek (laktóz ...) intoleranciája káros bélgyulladáshoz vezethet.
  • Krónikus stressz: a dysbiosis elősegítése mellett a stressz csökkenti a belek véráramlását, lehetetlenné téve a helyreállítást. A stressz a bélsejtek összehúzódását is okozza, ami nagyobb tereket eredményez a sejtek között.

Az áteresztő belek következményei

A bélfal módosított permeabilitása nagyon káros hatásokkal járhat, többek között:

Irritálható vastagbél szindróma (SCI)

A bél dysbiosis és az áteresztő bél eredményeként kialakuló patológiák közül a leggyakoribb valószínűleg az irritábilis bél szindróma (IBS). Az SCI-t hasi fájdalom vagy kényelmetlenség jellemzi, a bélműködési zavarok jeleivel együtt, leggyakrabban hasmenéssel és/vagy székrekedéssel. A jelenlegi adatok szerint a lakosság 10-20% -a szenvedhet ebben a betegségben. Az SCI a nyálkahártya immunrendszerének helytelen és krónikus aktiválódásának eredménye. Ennek az aktivációnak az okai nem egyértelműek, a betegség valószínűleg multifaktoriális. Az SCI-ben szerepet játszó tényezők a következők:

A bél immunfunkciójának szabályozása:

  • Immunsejtjeink 80% -a a bélben van
  • A gyomor-bél traktushoz kapcsolódó nyirokszövet (GALT) elterjedt a bél nyálkahártyája mentén (Peyer plakkok a vékonybélben, limfoid tüszők a vastagbélben), és a test immunsejtjeinek 80% -át tartalmazzák.
  • Ezek az immunsejtek folyamatosan kölcsönhatásba lépnek a nyálkahártyához kapcsolódó mikroorganizmusokkal (baktériumok, vírusok ...)
  • Finom egyensúly megmarad a bélantigének toleranciája (a gyulladás csökkentése stb.) És a kórokozók elleni védekezés (defenzinek termelése stb.) Között.

A bél immunitásának egyensúlyhiánya az egész testet érinti:

  • A bélgát integritása elengedhetetlen: a fokozott nyálkahártya permeabilitás szisztémás endotoxémiát (krónikusan alacsony gyulladást) és rendellenes immunreakciókat okoz a bélantigénekkel szemben.
  • Gazdagép/bélflóra kölcsönhatások: A bél mikrobiális flórája fontos szerepet játszik a befogadó egészségének megőrzésében, de befolyásolhatja a fogadó immunitás rendellenes működése.

A bélflóra változását jelenleg számos krónikus betegség, például allergia, autoimmun és gyulladásos rendellenesség vagy degeneratív betegség elősegítő tényezőjének tekintik.

Számos tényező, például az antibiotikumok használata, a stressz, bizonyos étrendi összetevők, káros hatással lehetnek a bél mikroflórájára. A felesleges kórokozó baktériumok mérgező baktériumvegyületek (például endotoxinok) termeléséhez vezetnek, amelyek felszívódnak a vérbe és rendellenes immunaktivációt okoznak.

A bélgyulladás, amely étkezési intolerancia vagy allergia következménye lehet, a bélfal fokozottabb áteresztőképességéhez vezet („áteresztő bél”), megkönnyítve ezzel a bakteriális vegyületek átjutását a vérbe.

Autizmus és gyomor-bél gyulladás:

  • Számos jelentés jelezte az emésztőrendszeri tünetek, gyulladások és diszfunkciók magas előfordulását autizmussal élő gyermekeknél (Horvath és Perman áttekintése, Curr Gastroenterol Rep 2002).
  • Enyhe vagy közepes fokú gyulladást figyeltek meg a felső és az alsó bélrendszerben. Az autizmus spektrum rendellenességekben szenvedő gyermekeknél a GI diszfunkció jelenléte gyakran fokozott ingerlékenységgel, dühkitörésekkel, agresszív viselkedéssel és alvászavarokkal társul (Critchfield és mtsai., Gastroenterol Res Pract. 2011).

Az sIgA kulcsfontosságú feladata, hogy a behatoló mikroorganizmusokhoz és toxinokhoz kötődjön, és csapdába ejtse őket a nyálkarétegben vagy a hámsejtekben, ezáltal gátolja a mikrobiális mozgékonyságot, agglutinálja az organizmusokat és semlegesítse exotoxinjaikat, majd elősegítse a székletből a test ártalmatlan eltávolítását. A SIgA az ételeket is elfogadhatónak "címkézi", ezért az alacsony sIgA fokozott ételérzékenységhez vezet.

Az sIgA koncentrációja információt nyújt a bél immunvédelméről:

Az sIgA hiánya a bél immunrendszer aktivitásának csökkenését jelzi

Az emelkedett sIgA-szint bélgyulladást jelez.

Hemoglobin: ürülékkel kiürítették gyomor-bélrendszeri vérzéses megbetegedésekben

transzferrin: vérből származó komponens; jó marker a gyomor-bél vérzésére

kalprotektin: antimikrobiális tulajdonságú neutrofil citoszol fehérje, amely a bélgyulladás során nagy koncentrációban van jelen a székletben

laktoferrin: a széklet leukocitákból felszabaduló neutrofil szekunder granulátumok glikoprotein komponense; a bél gyulladásának jelzőjeként szolgálhat.

Ezt az immunokromatográfiás vizsgálatot székleten végzik, és kvalitatív választ ad (pozitív/negatív).

A zóna az átjárható bél "átjárója". A zonin megnyitja a bélburok sejtjei közötti tereket. Ez általában akkor történik, ha a tápanyagok és más molekulák belépnek és elhagyják a bélet. Amikor azonban az áteresztő bél jelen van, a sejtek közötti terek túlságosan megnyílnak, lehetővé téve a nagyobb fehérjemolekulák bejutását a véráramba, ahol immunreakció léphet fel. Emellett a béltartalom, például baktériumok szivárgását okozhatja az immunrendszerben, gyulladást okozva. A zonulin szintjének növekedésével a bélsejtek közötti tömítés csökken, és a sejtek között olyan terek nyílnak meg, amelyek mindenfélét behatolnak. Ezt hívják "áteresztő bélnek". A zonulin az egyetlen ismert fiziológiás modulátor az eddig leírt szűk sejtközi csomópontok számára, amely részt vesz a makromolekulák kereskedelmében és ezért a tolerancia/immunválasz egyensúlyában.

EPX/EDN ELISA elemzés székletmintákban (EPX/EDN)

Az eozinofil eredetű neurotoxin (EDN) felhalmozódása a bélben gyulladással és szövetkárosodással jár. A széklet EDN mérése objektív paraméterként szolgálhat a gyomor-bél traktusban jelenlévő krónikus klinikai vagy szubklinikai gyulladás esetén.

A széklet EDN-t tartják a legjobbnak a citotoxikus szemcsés fehérjék közül a bélgyulladás értékelésére, mert ez tükrözi legjobban a betegség és a nyálkahártya elváltozásának aktivitásának klinikai, endoszkópos és szövettani pontszámát.

A széklet EDN-szintjének emelkedése számos gyulladásos állapothoz kapcsolódik, mint például ételallergia/-érzékenység, patogén fertőzések (C. difficile és H. pylori), IBS, eozinofil emésztőrendszeri rendellenességek.

A fertőzések értékelése székletmintákban

Az immunokromatográfiás vizsgálatok egy festett kolloid immunológiai felvételén alapulnak, amikor egy membránon áthalad. Antitestet vagy antigént immobilizáltunk erre a membránra. A lehetséges fertőzés felismerése gyors és egyszerű, mivel nem jár a széklet tenyésztésével. A következő elemzések állnak rendelkezésre:

  • C/PARAS Cryptosporidium/Giardia Ag
  • HPYL Helicobacter Pylori Ag
  • SHIG Shigella spp
  • ADENOV Adenovirus Ag
  • PSALM Salmonella Spp. Ag
  • LISTia monocytogenes Ag
  • ENTEROV Enterovirus Ag
  • HepA Hepatitis A vírus Ag
  • EntaHIST Entamoeba histolytica
  • CampBact Campylobacter Ag
  • YERSI Yersinia enterocolitica
  • CLOSTRICombo Clostridium difficile 3 toxinok
  • TULAR Tularemia (Francisella tularensis)

A bél mikroflóra (bél mikrobiom) postnatalis szerzett szervnek tekinthető. Sokféle baktériumsejtből áll, a gazdaszervezet számára különböző funkciókkal rendelkezik. A mikroflóra jelentős szerepet játszik a bél érésében, a bél integritásában, a patogén és opportunista baktériumok kolonizációjának megelőzésében,… Ez az immunrendszert is modulálja. A mikroflóra részt vesz a vitaminszintézisben, a rövid láncú zsírsavak termelésében és a rákkeltő anyagok metabolizmusában is.

A mikrobiom hozzájárul az élelmiszerek feldolgozásához és anyagcseréjéhez:

- a tápanyagok emésztése és felszívódása

- rövid láncú zsírsavszintézis (pl. a Faecalibacterium butyrate, Roseburia szintézise ... fontos a vastagbél egészsége szempontjából ... de sok energiát ad -> elhízás)

- aminosavak és vitaminok szintézise (B12-vitamin, B9-vitamin, K-vitamin)

- az élelmiszerekben található szennyező anyagok és mérgező molekulák méregtelenítése

Bár a bélflóra idővel meglehetősen stabil, számos tényező megzavarhatja a normális egyensúlyt, és ezáltal a bél dysbiosisához vezethet. A bél mikroflóráját megváltoztathatja a gazdaszervezet immunmechanizmusa, a redox állapot, a mellékvese működése, a bél pH-értéke, a gazda étrendje, a fogadó kor, a gyógyszerek, az exogén szervezetek és az érzelmi stressz.
A bél dysbiosis számos krónikus betegségben észlelhető, például Crohn-betegség, SCI, CFS, és társulhat atópiás és fejlődési rendellenességekkel, például autizmussal és ADHD-vel.

Egészen a közelmúltig a mikrobiota összetételének kutatása szinte kizárólag a tenyészeten alapult, annak ellenére, hogy:

  • A bélbaktériumok 40-80% -a nem tenyészthető
  • A telepek azonosítása nehéz lehet
  • A baktériumoknak életben kell lenniük: az anaerob kórokozók vizsgálata nagyon nehéz, jelentős veszteségek a minták összegyűjtése és feldolgozása során
  • A tenyésztési megközelítés az összes baktériumfajnak csak egy kis részét képes elemezni (10%?)
  • a domináns fajnak gondolt coli kiskorú tagja…

Az autista gyermekek bélflóra és gyomor-bélrendszeri állapota összefügg az autizmus súlyosságával:

  • Adams és mtsai. (BMC Gastroenterology 2011) arról számolt be, hogy a gyomor-bélrendszeri tünetek szoros összefüggésben vannak az autizmus súlyosságával. A vizsgált négyféle hasznos baktérium közül az autista gyermekeknél sokkal alacsonyabb volt a Bifidobacterium-szint (-45%), valamivel alacsonyabb volt az Enterococcus-szint (-16%) és sokkal magasabb volt a Lactobacillus-szint (+ 100%).
  • Finegold és mtsai. (Anaerobe 2010) arról számolt be, hogy a kontroll gyermekek székletében a Firmicutes a teljes flóra 63,6% -ában volt jelen, autizmussal élő gyermekeknél azonban csak a székletflóra 38-39% -ában volt jelen. Az autizmussal élő gyermekeknél a kontroll székletflóra 30% -át, a székletflóra 51% -át a baktériumok tették ki. Az aktinobaktériumok a kontroll gyermekeknél a székletflóra 1,8% -át, az autizmussal élő gyermekek flórájának 0,4-0,7% -át tették ki. A proteobaktériumok a kontroll gyermekek flórájának 0,5% -át, az autizmussal élő gyermekek flórájának 2,3 és 3,1% -át tették ki. Összefoglalva, az autizmussal élő gyermekek székletflóra statisztikailag szignifikánsan különbözött az egészséges gyermekekétől.

Dysbiosis krónikus fáradtság szindrómában (CFS):

  • A bélműködés általános rendellenessége a dysbiosis, amely a kórokozó baktériumok szaporodása a bélben.
  • Számos publikált tanulmány azt sugallja, hogy a CFS diszbiózissal társul
    • A tenyésztésen alapuló elemzések kimutatták a Streptococcus és Enterococcus spp. Emelkedett szintjét székletmintákban ME/CFS-ben szenvedő betegeknél [Sheedy et al., In Vivo 2009]
    • A probiotikus kiegészítés (L. casei egy tanulmányban, L. paracasei + L. acidophilus + B. lactis egy másik vizsgálatban) javított érzelmi tünetekhez és neurokognitív funkciókhoz vezetett [Rao et al., Gut Pathog 2009; Sullivan és mtsai., Nutr J 2009].

Az R.E.D. laboratóriumokban új eljárást dolgoztunk ki a székletmintában található baktériumtenyészetek elemzésére (Fremont és mtsai., Anaerobe 2013). Ez a korszerű eljárás 16 másodperces PCR-amplifikáción alapul, amelyet nagy sebességű szekvenálás követ. Átfogó áttekintést nyújt az összes baktériumfajról, beleértve azokat is, amelyeket a hagyományos tenyésztési technikákkal nem lehet elemezni.

A széklet metagenomikus elemzésünk teljes képet nyújt a székletmintában jelen lévő baktériumpopulációkról, beleértve az aerobokat, anaerobokat és baktériumfajokat, amelyeket nem lehet hagyományos tenyésztési technikákkal elemezni.

Érdeklődés és lehetséges alkalmazások:

  • Könnyű begyűjtési eljárás, a minták stabilizálhatók: könnyű hozzáférés a betegek számára
  • Nagyszámú alkalmazás: autizmus, krónikus fertőzések, CFS, különféle bélbetegségek, elhízás, allergiák, rák…
  • Kövesse a terápiás beavatkozásokat: pre- vagy probiotikumok, antibiotikumok, növényi kivonatok, étrendi változások…