A MEKC módszer módosítása - PDF ingyenes letöltés

Agrárgazdaságtani és Élelmiszertudományi Tanszék Biotermék-technológia tanfolyam MEKC módszer módosítása az almalé mikotoxin-patulinjának meghatározására Alapmunka: Anne Weber A tudományos fokozat megszerzéséhez Bachelor of Science (B.Sc.) Első bíráló: Második lektor: Prof. Dr. rer. nat. Christine Wittmann Dr. rer. nat. Bettina Albrecht Feldolgozási időszak: 2010. január 18., 2010. március 2. URN: urn: nbn: de: gbv: 519-thesis2010-0114-9 Neubrandenburg, 2010. március 2.

módosítása

Tartalomjegyzék II Tartalomjegyzék Rövidítések listája. IV Az egységek listája. VI 1 Bevezetés. 1 1.1 Patulin. 2 1.1.1 Felépítés és előfordulás. 2 1.1.2 Bioszintézis. 3 1.1.3 Toxikológiai értékelés. 5 1.2 Jogalap. 7 1.2.1. A mikotoxin maximális mennyiségéről szóló rendelet. 7 1.2.2. Az 1425/2003/EK rendelet. 7 1.2.3. A 2003/598/EK irányelv. 8 1.3 Ellenőrzési eljárás. 9 1.3.1 Nagy teljesítményű folyadékkromatográfia. 9 1.3.2 Gázkromatográfia. 10 1.3.3. Vékonyréteg-kromatográfia. 10 1.3.4 Immunkémiai módszerek. 10 1.3.5 A patulin meghatározása MEKC-DAD segítségével. 11 1.4 Célkitűzés. 17 2 Anyag és módszerek. 18 2.1 Anyag. 18 2.1.1 Vegyszerek és szerek. 18 2.1.2 Szükséges alap- és pufferoldatok. 19 2.1.3 Eszközök. 23 2.1.4 Vizsgált minta. 23 2.2 Módszerek. 24 2.2.1 A PAT/5-HMF koncentráció fotometriai meghatározása. 24 2.2.2 Az elválasztó hatás optimalizálása. 26 2.2.3 A minta előkészítése. 26 2.2.4 Az almalé mintájának növekedése. 29 2.2.5 Mérés. 31

Tartalomjegyzék III 3 Eredmények. 32 3.1 A törzsoldatok stabilitása. 32 3.2 Az elválasztó hatás optimalizálása. 33 3.2.1 Az elektrolit összetételének vizsgálata. 33 3.2.2 A minta előkészítése. 35 4 Megbeszélés. 39 5 Összegzés. 48 Szójegyzék. VII Irodalomjegyzék. XI. Ábrajegyzék. XVI táblázatok listája. XVII. Nyilatkozat. XVIII. Melléklet. XIX

IV rövidítések listája Rövidítések listája Numerikus 5-HMF 6-MSA 5- (hidroxi-metil) -furfurol-6-metil-szalicilsav; 6-metil-szalicilsav B BSTFA N, O-bisz-trimetil-szilil-trifluor-acetamid C CE CMC kapilláris elektroforézis; Kapilláris elektroforézis kritikus micelláris koncentrációja; kritikus micellás koncentráció D DAD DC DIN diódasorozat detektálása; Diódasoros detektálás Vékonyréteg-kromatográfia Német Szabványügyi Intézet E ECD EI EOF elektronrögzítő detektor; Elektronfogó detektor elektronionizációja; Elektronütéses ionizálás Elektro-ozmotikus áramlás F FAO Élelmezési és Mezőgazdasági Szervezet G GC gázkromatográfia; Gázkromatográfia H HFBI HPCE HPLC heptafluor-butirilimidazol nagy teljesítményű kapilláris elektroforézis; Nagy teljesítményű folyadékkromatográfia; Nagy teljesítményű folyadékkromatográfia

Rövidítések listája V L LFGB LMBG Élelmiszer-, fogyasztási cikkek és takarmánykód Élelmiszer- és fogyasztási cikkekről szóló törvény M MEKC MG MS Micelláris elektrokinetikus kapilláris kromatográfia Molekulatömeg-tömegspektrométer N NCI negatív kémiai ionizáció; negatív kémiai ionizáció P.a. PAT PMDI pro elemzés Patulin ideiglenes maximális napi bevitel R RT retenciós idő S SDS SPE nátrium-dodecil-szulfát; Nátrium-dodecil-szulfát/nátrium-lauril-szulfát szilárd fázisú extrakció; Szilárd fázisú extrakció W WHO Egészségügyi Világszervezet

Egységek listája VI Az egységek listája nyomás mbar millibár terület integrált mau. s milli abszorpciós egységek. másodperc tömeg μg, mg mikrogramm, milligramm molaritás mol/l mol/liter molekulatömeg g/mol gramm/mol jelintenzitás mau milli abszorpciós egységek feszültség kv kilovolt hőmérséklet C Celsius fok térfogat μl, ml, l mikroliter, milliliter, liter hullámhossz nm, perc, h másodperc, perc, óra

1 Bevezetés 2 1.1 Patulin 1.1.1 Felépítés és előfordulás A patulin (4-hidroxi-4H-furo [3,2-c] pirán-2 (6H) -on, lásd az 1. ábrát) telítetlen heterociklusos poliketid-lakton, amelyet különféle fajok állítanak elő. Penicillium, Aspergillus és Byssochlamys nemzetségek penészgombáival szintetizálhatók a mezőgazdasági termékekben (LAWLEY, 2008; MILIOTIS, 2003; WEIDENBÖRNER, 1998). A legfontosabb képviselőket az 1. táblázat foglalja össze, amelyen belül a Penicillium expansum rendelkezik a legnagyobb jelentőséggel (LAWLEY, 2008; MILIOTIS, 2003). Magát a mikotoxin szintézist a környező környezet bizonyos körülményei támogatják, és fajonként változó. A P. expansum optimális mikotoxin képződési tartománya 20 C és 25 C közötti hőmérsékleten van, pH-tartomány 1. ábra: Vegyszerek pH 3-tól 6,5-ig (KRÄMER, 2007) és W-értéke 0,99 A patulin szerkezete (WEIDENBÖRNER, 1998). Egyes patulinképzők még a hőmérsékleten is képesek eltávolítani a mikotoxint