A szelénpótlás hatása a zárt szarvas (Dama dama) szelén állapotára -
A Lipcsei Egyetem Állatorvosi Orvostudományi Kar Állattáplálkozási, Táplálkozási Károsítási és Dietetikai Intézetétől A szelénpótlás hatása a ketrecben tartott dámszarvas (Dama dama) szelénállapotára Nyitó disszertáció a Doctor medicinae veterinariae (Dr. med. Vet.) Fokozat megszerzésére A Lipcsei Egyetem állatorvosi kara, Sophie Stoebe, Lipcse Lipcse, 2011
A lipcsei egyetem állatorvosi karának jóváhagyásával dékán: Prof. Dr. Uwe Truyen témavezető: PD Dr. Ingrid Vervuert bíráló: 1. PD Dr. Ingrid Vervuert, a Lipcsei Egyetem Állattáplálkozási, Táplálkozási Károk és Dietetikai Intézete, június 2. Prof. Dr. Andreas S. Müller, a Martin Luther Egyetem Mezőgazdasági és Táplálkozástudományi Intézete Halle-Wittenberg, Halle/Saale Védelem napja: 2011. június 28.
Tartalomjegyzék I. Tartalomjegyzék Tartalomjegyzék. I Ábrák felsorolása. V Táblázatok listája. VI Melléklet táblázatok listája. VIII. Rövidítések listája. IX 1. Bevezetés. 1 2. Irodalmi áttekintés. 2 2.1 Se mint kémiai elem. 2 2.2 A Se és a fehérjék története. 3 2.3 Se tartalom a talajban, a növényekben, az élelmiszerekben és a takarmányokban. 4 2.3.1 Se-tartalom a talajban. 4 2.3.2 Se-tartalom a növényekben. 5 2.3.3 Se tartalom az élelmiszerekben. 7 2.3.4 A hírcsatorna tartalmának megtekintése. 8 2.4 Se az anyagcserében. 9 2.4.1 Reszorpció. 9 2.4.2 Szállítás, anyagcsere és tárolás. 10 2.4.2.1 Szállítás. 10 2.4.2.3 Tárolás. 11 2.4.3 Ellátás placentán és tejjel. 12 2.4.4 Kiválasztás. 14 2.5 A Se biológiai funkciói. 16 2.5.1. SeP. 16 2.5.2 Funkciók. 18 2.5.2.1 A GPx speciális funkciói. 18 2.5.2.2 A szelenoenzimek további funkciói. 20 2.6 dámszarvas (Dama dama). 21 2.6.1 A dámszarvasok szisztematikus és történeti osztályozása. 21 2.6.2 A dámszarvas élettana és táplálkozása. 22-én
II Tartalomjegyzék 2.6.3 Se státus Cervidennél. 23 2.7 Se követelmény. 24 2,8 Se és enzimértékek a szervezetben. 25 2.8.1 Se-tartalom a vérben. 25 2.8.2 Se tartalom a különböző szervekben. 28 2.9 Se és betegségek. 30 2.9.1. Se-hiányhoz kapcsolódó betegségek. 30 2.9.2 Se toxicitás. 31 2.9.2.1 Akut Se-mérgezés. 32 2.9.2.2. Szubakut Se-mérgezés. 33 2.9.2.3 Krónikus Se-mérgezés. 33 3 Állatok, anyagok és módszerek. 35 3.1 A kísérlet célja. 35 3.2 Állatok. 35 3.3 Testtartás. 35 3.4 Takarmányozás és kiegészítés. 35 3.5 Vizsgálati eljárás. 37 3.6 Mintavétel. 38 3.6.1 Vérminták. 38 3.6.2 Szerv- és szövetminták. 38 3.6.3 Mérés. 40 3.6.4 Takarmányminták. 41 3.7 Tesztparaméterek. 43 3.8 Analitikai módszerek. 43 3.8.1 Takarmányelemzés. 43 3.8.1.1 TS. 43 3.8.1.2 Nyershamu (Ra). 44 3.8.1.3 Szerves anyagok (os). 44 3.8.1.4 Nyersfehérje (Rp). 44 3.8.1.5 Nyers zsír (Rfe). 44 3.8.1.6 Nyersrost (Rfa). 44 3.8.1.7. N-mentes kivonatanyagok (NfE). 45 3.8.1.8 Nyomelemek: Se, Cu, Zn. 45 3.8.2 Teljes vér, plazma, szerv és szövet elemzése. 45
Tartalomjegyzék III 3.8.2.1 A vázizmok szövettana. 45 3.8.2.2 Se tartalom. 46 3.8.2.3 DM-tartalom. 47 3.8.2.4 GPx aktivitás. 47 3.8.2.5 Fehérjetartalom. 48 3.8.2.6 Hemoglobin-tartalom. 49 3.8.2.7 GPx mRNS expresszió. 49 3.8.2.8. Α-Glutation-S-transzferáz aktivitás (GST). 53 3.9 Statisztikai értékelés. 54 4. Eredmények. 55 4,1 km az állatok és a féltestek súlya. 55 4.1.1 KM állatok a kísérlet kezdetén. 55 4.1.2 A vizsgálandó féltestek súlya. 55 4.2 A vázizmok szövettana. 56 4.3 Se-tartalom a plazmában, a teljes vérben és a szervekben. 58 4.3.1 Se-tartalom a plazmában és a teljes vérben. 58 4.3.2 Se tartalma a különböző szervekben. 59 4.4 Se-függő és Se-független enzimek. 60 4.4.1 GPx aktivitás plazmában és teljes vérben. 60 4.4.2 GPx aktivitás különböző szervekben. 62 4.4.3 GPx mRNS expresszió. 63 4.4.4. Α-gst aktivitás. 64 5. Megbeszélés. 67 5.1 A módszerek kritikája. 67 5.1.1 Az állatok pótlása. 67 5.1.1.1 Takarmánybevitel. 67 5.1.1.2. A Se-kiegészítés összege. 67 5.1.1.3 A Se-kiegészítés időtartama. 68 5.1.1.4 A Se-kiegészítés típusa. 68 5.1.2 Mintavétel. 69 5.1.3 Vizsgálati paraméterek. 69 5.1.4 E-vitamin. 69 5.2 A teszt eredményeinek megbeszélése. 70
IV Tartalomjegyzék 5.2.1 A Se-ellátás értékelése a Se-kiegészítés előtt. 70 5.2.2 A Se-ellátás értékelése különböző Se-kiegészítések után. 72 6. Összegzés. 81 7. Összegzés. 83 8. Irodalomjegyzék. 85 9. Függelék ... 110 Köszönetnyilvánítás. 117.
VIII Függeléktáblázatok Függeléktáblázatok Függeléktáblázatok Függelék 1. táblázat: Függeléktáblázat 2.: Függeléktáblázat: Függeléktáblázat: Függelék 5. táblázat: Függeléktáblázat: Függelék 7. táblázat: A teszt- és kontrollcsoport vér- és plazma-tartalma µg/l-ben a vizsgálat elején és végén . 110 A teszt és a kontrollcsoportok különböző szerveinek szeintartalma µg/kg DM-ben a vizsgálat végén. 111 GPx aktivitás a teszt és a kontroll vérplazmájában mu/mg fehérjében a teszt elején és végén. A teszt és a kontrollcsoport teljes vérének 112 GPx-aktivitása U/g Hb-ban a teszt elején és végén. 113 GPx aktivitás a teszt- és kontrollcsoport különböző szerveiben mu/mg fehérjében. 114 GPx-1 és GPx-4 RNS expresszió a teszt és a kontroll csoport májában és vázizmában ng/µl-ben. 115 Az a-gst aktivitása a teszt és a kontrollcsoport májában μ/mg fehérjében. 116
Rövidítések listája IX Rövidítések listája AS cdna cgpx crna d DEPC DI dntp ds DNS ε FMVO gesgpx GfE GPx GSH GSSG GSSP GST H.-E. n/a KM LFGB M./Mm. ME Met mRNS MW n NADP + NADPH aminosav (ak) komplementer dezoxiribonukleinsav celluláris glutation-peroxidáz komplementer ribonukleinsav réteg vastagsága a küvetta dietil-pirokarbonáttal deiodinase nukleotid keveréket kettős szálú dezoxiribonukleinsav-függő teljes dezoxiribonukleinsav + glutation-peroxidáz-függő Nutrition Society-specifikus kioltási-peroxidáz-függő étrend Háziállatok glutation-peroxidáz a glutation glutation-diszulfid Protein glutation glutation transzferáz Hemalum eozinnal részletek nem Testtömeg élelmiszer, fogyasztási cikkek és a takarmány-kód Musculus/musculi átváltható energia Metionin hírvivő ribonukleinsav középérték száma nikotinsav-amid-adenidine-foszfát-amid száma nikotinsav-amid-adenidine-foszfát-amid, csökkentett nikotinsavamid-adenidine-foszfát-amid
X Rövidítések listája NBD-Cl NfE NMD os PCR PHGPx pn pp PUFA r Ra Rfa Rfe Rp rpm RTD-PCR S Sd SeCys SeGPx SeMet SeP SKH TrinkwVO TrxR TS TVT us VF E 7-Chlor-4-nitobenzo-2-oxa-1, 3-diazol N-mentes kivonatok tápláló izomdisztrófia szerves anyag polimeráz láncreakció foszfolipid-hidroperoxid-glutation-peroxidáz post natum post partum többszörösen telítetlen zsírsavak fordított nyers hamu nyersrost nyers zsír nyersfehérje fordulatok percenként valós idejű polimeráz láncreakció kén pajzsmirigy szelén szelén peroxidáz Szelenometionin Szelenoprotein A hasított test fele Ivóvíz szabályozás Tioredoxin reduktáz Száraz anyag Állatjóléti Állat-egészségügyi Egyesület Eredeti anyag Hígítási tényező Kihalási különbség percenként