Andrea Winchenbach, disszertáció, FU Berlin
Az élő csírák alapvető fontosságának vizsgálata a béllaktóz-hidrolízis elősegítése érdekében az erjesztett tejtermékek mikrobiális Я-galaktozidázával a gnotobiotikus Gцttinger mini disznó mintájára
Vizsgálatok annak megállapítására, hogy életképes mikroorganizmusokra van-e szükség az erjesztett tejtermékek béllaktóz-hidrolízise során mikrobiális Я-galaktozidáz segítségével, gnotobiotikus Gцttingen minicsigák felhasználásával
Összegzés
A tej intolerancia leggyakoribb oka világszerte a bél Я-galaktozidáz hiánya, ami laktóz malabszorpcióhoz vezet. A fermentált tejtermékeket mikrobás Я-galaktozidáz-tartalmuk miatt sokkal jobban tolerálják a laktóz malabszorbánsok, mint a nem erjesztett tejet.
A munka célja annak tisztázása volt, hogy a fermentált tejtermékekből származó mikrobiális Я-galaktozidázok által végzett béllaktóz-hidrolízis kötődik-e a termékben élő baktériumok jelenlétéhez, és képesek-e ezek a tejtermékkel együtt bevitt csírák a gyomor-bél traktusban lenni -Traktika az áthelyezésre. Erre a célra fermentált tejtermékekkel történő etetési kísérleteket végeztek, amelyek nem tartalmaztak elejtett vagy élő laktobacillusokat, gnotobiotikus minisertéseken és gnotobiotikus patkányokon.
Előzetes tesztekben vizsgálták a tárolási idő és a gyomor átjárásának in vitro hatását a laktobacillusokra és azok Я-galaktozidáz aktivitására, valamint a bél Я-galaktozidáz aktivitásának szintjét a kísérleti állatok vékonybélének különböző szakaszain.
Az etetési kísérlet során mindkét állatból 6 állat 3 egymást követő étrendet kapott fermentált tejtermékből, azonos laktóztartalommal (40 g/l) egymás után 2 héten keresztül. Az első étrend nem tartalmazott laktobacillust, a második g-sugárzás elpusztult, a harmadik pedig élő laktobacillus volt. Az utolsó két étrend mindegyike ugyanazt a Я-galaktozidáz aktivitást tartalmazta (kb. 400 NE/l), az első étrendben nem volt aktivitás. A napi energia- és tápanyagigény kielégítésére az állatok laktóz- és galaktozidáz-mentes kiegészítő takarmányt kaptak.
A három vizsgálati étrendnek a bél laktóz-hidrolízisre gyakorolt hatását mindkét állatfajban az orofcal-laktóz-egyensúly segítségével határoztuk meg, sertéskísérlet esetén, kiegészítve egy nem felszívódó marker értékével. A laktózmérleg mellett orofdcal Я-galaktozidáz egyensúlyt is rögzítettünk. A laktobacillusok adhéziós viselkedésének vizsgálata érdekében a teszt étrend alatt a baktériumokat rövid ideig kitettük az élő csírákkal, és az állatok székletében a csíraszámot a teljes időtartam alatt meghatároztuk.
A következő eredményeket kaptuk:
Az ürülékkel kiválasztott laktóz mennyisége sertéseknél és patkányoknál magas volt az első teszt-étrend során, és a következő két teszt-étrend során jelentősen csökkent. Statisztikailag szignifikáns különbségek voltak a 2. étrend alatti székletben lévő laktóz mennyisége között a 3. étrendhez képest, mint az 1. diéta esetében, de ezek valamivel kisebbek voltak, mint mindkét étrend (3. és 2.) étrendjében az 1. étrend esetében. Ez az eredmény a sertéseknél a marker értékekre való hivatkozás után sem változott. Megállapították, hogy az 1. étrendben a laktóz emészthetősége szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a 2. és a 3. étrendben. A 2. és 3. étrend laktóz-emészthetősége nem különbözött szignifikánsan.
A székletben kimutatható Я-galaktozidáz aktivitás ellentétes volt a laktózzal. Az 1. diéta során a legkisebb mennyiséget vagy egyáltalán nem mértük a Я-galaktozidáz aktivitást; a 2. diéta alatt növekedett, hogy elérje a 3. étrend során a legmagasabb értéket. A mind a három étrend közötti különbségek statisztikailag szignifikánsak voltak.
A beadott laktobacillustörzs nem volt képes állandóan megtelepedni a gnotobiotikus mini disznók és patkányok vékonybélében, az orális bevitel megszakítása után néhány napon belül eltűnt.
Ezen eredmények alapján a következő következtetést lehet levonni:
A bél laktóz hidrolízise az erjesztett tejtermékek elfogyasztása után volt a legmagasabb, ha mikrobiális akt-galaktozidázt fogyasztottak az étrenddel. Alig volt különbség, hogy a laktobacillusok életben vannak-e vagy megölik őket; a bél laktóz hidrolízise valamivel magasabb volt az étrendben élő laktobacillusokkal, mint az étrend alatt az elejtettekkel. Alapvető fontosságú volt, hogy a laktobacillusok héja által védett enzim túlélje a gyomorjáratot anélkül, hogy a gyomorsav és a proteázok elpusztítanák. Ezt egyértelműen bizonyították in vitro tesztek annak tesztelésére, hogy a gyomorpasszus fennmaradhat-e. Ezt a védelmet a g-sugarakkal kezelt (elölt) laktobacillusok, valamint az élő laktobacillusok biztosítják. Amíg a csírák sejtmembránja sértetlen, a bél laktóz-hidrolízisének elősegítéséhez nem szükséges, hogy a csírák életképesek legyenek.
Tartalomjegyzék
Betöltheti a dolgozat egészét zip-tar fájlként vagy zip fájlként.
A fejezetfejlécekre kattintva betöltheti a fejezetet PDF formátumban: