Carotis mandzsetta beültetése nyírási stressz okozta ateroszklerózis kiváltására egerek protokolljában

Összegzés

Az ebben a cikkben bemutatott szűkülő mandzsettát ateroszklerózis kiváltására tervezték az egér carotis artériájában. A beültetett mandzsetta belső lumenének kúpos alakjának köszönhetően jól körülhatárolható, alacsony, nagy nyírófeszültségű és oszcillációs régiókat generál, amelyek kiváltják a különböző gyulladásos fenotípusok ateroszklerotikus elváltozásainak kialakulását.

Absztrakt

Széles körben elterjedt vélemény, hogy a vaszkuláris nyírási stressz változásai kiváltják a gyulladásos gének expresszióját az endothel sejtekben, és ezáltal ateroszklerózist váltanak ki (áttekintve az 1. és 2. részben). A nyírófeszültség szerepét in vitro alaposan tanulmányozták, hogy tanulmányozzák az áramlási dinamika hatását az endotheliális sejtekre az 1,3,4-es tenyészetben, és in vivo nagy állatokban és emberekben 1, 5,6,7,8. Ritkán fordulnak elő azonban nagyon jól reprodukálható kisállat-modellek, amelyek lehetővé teszik a nyírófeszültségek plakkok kialakulására gyakorolt ​​hatásának szisztematikus vizsgálatát. Nemrégiben Nam et al. A 9. ábra egy olyan egérmodellt mutat be, amelyben a nyaki artéria ágainak lekötése alacsony áramlású és oszcillációs régiót hoz létre. Noha ez a modell endothel diszfunkciót és gyors ateroszklerotikus elváltozások kialakulását eredményezi a hiperlipidémiás egerekben, nem zárható ki, hogy a gyulladásos reakció legalább részben megfigyelhető az endothelialis és/vagy az erek ligandumban bekövetkező károsodásának következménye.

Az ilyen korlátozások elkerülése érdekében egy nyírófeszültség-módosító mandzsettát fejlesztettek ki számított, kúp alakú folyadékdinamika alapján, amelynek belső lumenét úgy választották meg, hogy a fenék meghatározott régióit hozza létre, a nyírófeszültségek megemelkedjenek és oszcillációs szintek legyenek a közös carotisban. ez a modell az apolipoprotein E (apoE) kiütéses egerekben nyugati típusú magas koleszterinszintű étrendet etetett, érrendszeri elváltozások alakulnak ki a mandzsetta felfelé és lefelé. Fenotípusuk korrelál a regionális 11 fluxusok dinamikájával, amelyet in vivo megerősített a mágneses rezonancia képalkotás (MRI) 12: a mandzsetta feletti alacsony és lamináris nyírófeszültség egy fenotípusú, sérülékenyebb, míg a lefelé irányuló oszcillációs nyírás okozta kiterjedt plakkok kialakulását eredményezi. stressz a mandzsetta stabil ateroszklerotikus elváltozásokat vált ki 11. A magas nyírófeszültségű és a mandzsettán belüli nagy lamináris áramlású területeken általában nem észlelnek ateroszklerotikus plakkokat.

Összegzésképpen elmondható, hogy a mandzsetta nyírási stressz módosító eljárása megbízható műtéti megközelítés fenotípusosan különböző ateroszklerotikus elváltozások előállításához ApoE-hiányos egerekben.

Jegyzőkönyv

1. Készítse elő a nyírófeszültség módosítót (mandzsetta)

2. Beültesse a mandzsettát a jobb nyaki artéria köré

3. A mandzsetta és a nyaki artériák feltárása

  1. A carotis szövettani elemzéséhez a megfigyelési periódus végén be kell gyűjteni az artériákat. Az explantáció megkezdése előtt az állatot le kell ölni az IACUC irányelveinek megfelelően.
  2. A mandzsetta félhéjainak újrafelhasználása érdekében óvatosan távolítsa el az összes szövet- és varratfoszlányt, amelyek a műanyag elemekből csatlakoznak, boncolva a nyaki artériákat, mossa le és tárolja a félhéjakat alkoholos oldatban (70%). Nem szabad megfeledkezni arról, hogy a mandzsetta több hetes beültetés után rögzül a kötőszöveti tapadásokban, és hogy a mandzsettát óvatosan kell boncolgatni, hogy ne károsítsa az érfalat.
  3. Alternatív megoldásként a mandzsetta kiváltható és integrálható a nyaki artériával. A megküzdés műanyagja ellenáll a normál rögzítő oldatoknak és a paraffin beágyazásához használt oldószereknek. Ezenkívül a fedélzeti mintákat normál pengékkel ellátott normál mikrotóm segítségével lehet levágni.

4. Reprezentatív eredmények

A mandzsettát mindig az állat két közös carotisjának egyikére kell helyezni (1A., 1B. Ábra) - az ellenoldali oldal szolgál kontrollként. A sapka két félhéját ábrázoló képen (1B. Ábra) a belső lumen kúpos alakja látható. Ez a kúpos forma elengedhetetlen annak a három régiónak a megállapításához, ahol a dinamika egyértelműen áramlik. A Doppler 11-es mérések alapján számított tipikus olvadás okozta nyírófeszültség-minták és a megfelelő áramlási sebességek az 12 MRI-fázis kontrasztsebessége alapján a 2. ábrán láthatók.