CYP2C9 genotipizálás (orális antikoagulánsok) - Synevo
Általános információk és ajánlások
A CYP2C9 a citokróm P450 egyik fő izoenzimje, amelynek szerepe van a gyógyszer metabolizmusában. Így a CYP2C9 felelős az előírt gyógyszerek 5% -ának metabolizmusáért, amelyek közül a legfontosabb a glipizid, fenitoin és kumarin származékok.
A CYP2C9 enzimet kódoló gén a többi CYP2C génnel együtt a 10. kromoszóma rövid karján (10q24) található. A CYP2C9 genetikai polimorfizmus elemzésével azonosítható megváltozott aktivitású enzimatikus változatok, amelyek befolyásolják a gyógyszer metabolizmusát, és amelyek a kezelés során társulnak a mellékhatások fokozott kockázatával.
A CYP2C9 genotipizálás főleg orális antikoagulánsok (kumarin-származékok) adagolásával függ össze, amelyeket gyakran használnak a tromboembóliás rendellenességek megelőzésében és terápiájában. Még a kezelés helyes nyomon követése esetén is nagyon nagy eltérések mutatkoznak az első beadott dózisokra adott válaszban, és a szint szűk terápiás intervallumban való fenntartásának kísérlete gyakran nehéz és súlyos mellékhatásokkal járhat együtt; Tehát úgy vélik, hogy a súlyos vérzések (olyan vérzések, amelyek esetében legalább két egységnyi vér elvesztése dokumentálható vagy kórházi kezeléshez vezetett) éves előfordulása hosszú távú antikoagulált betegeknél 6,8%, mellékhatásként pedig az éves letalitási arány. ennek a kezelésnek a 0,88% -a.
A speciális antikoagulációs klinikákon végzett utókezelés ezeket a baleseteket évi 2,7% -ra, illetve 0,4% -ra csökkentené 1 .
A CYP2C9 és a VKORC1 gének bizonyos alléljai (a K-vitamin epoxid-reduktáz C1 alegysége - az antikoaguláns kezelés célpontja) a warfarin-érzékenység egyéni változásainak 30-50% -át magyarázzák; emiatt ezen gének polimorfizmusának tesztelése hozzájárulhat az orális antikoaguláns terápia megfelelőbb kezeléséhez.
A warfarint R és S enantiomerek racém keverékeként adják be, amelyekért az S-warfarin felelős
A készítmény antikoaguláns aktivitásának 80% -a a májban metabolizálódik egy hidroxilezési folyamat révén, amelyben a CYP2C9 enzim részt vesz. A normál aktivitású enzimváltozatot kódoló vad típusú CYP2C9 * 1 allél mellett 2 allélt írtak le a CYP2C9 gén pontmutációi alapján: CYP2C9 * 2, felelős az arginin 144-es aminosavnál lévő ciszteinnel történő helyettesítéséért és a CYP2C9 * 3, ami az izoleucin leucinnal való helyettesítését eredményezi a 359. pozícióban. Mindkét allél mérsékelt (a CYP2C9 * 2 a warfarin metabolizmusát 30% -kal csökkenti) vagy súlyos (a CYP2C9 * 3 a warfarin metabolizmusát 80% -kal csökkenti) S-warfarin hidroxilációval jár együtt és az ezekkel az enzimatikus változatokkal rendelkező betegeknél, akik lassan metabolizálják a warfarint, fokozott a súlyos vérzési szövődmények kockázata az antikoaguláns terápia megkezdésekor 2; 11 .
A 3 allél 6 genotípusban kombinálható: * 1 * 1, * 1 * 2, * 1 * 3, * 2 * 2, * 2 * 3 és * 3 * 3, a következő prevalenciával a kaukázusi populációban:
Az afrikai populációban az * 2 és * 3 allélok gyakorisága sokkal alacsonyabb, mint a kaukázusi és ázsiai populációban 11 .
Egy 9 vizsgálatot (2775 beteget) tartalmazó metaanalízis során Sanderson és munkatársai arra a következtetésre jutottak, hogy a CYP2C9 * 2 és a CYP2C9 * 3 allélben szenvedő betegeknél alacsonyabb átlagos napi terápiás dózisra van szükség, mint a vad típusú CYP2C9 * 1 allél és fokozott vérzési kockázat. Így a CYP2C9 * 2 allél esetében az átlagos napi terápiás dózis 17% -kal alacsonyabb volt, a CYP2C9 * 3 allél esetében pedig azt találták, hogy 37% -os dóziscsökkentésre van szükség. A súlyos vérzés kockázata 5,3-szor nagyobb, mint a normál kezelés alatt, és 2,2-szer nagyobb a stabilizáció után 13 .
A Nemzetközi Warfarin Farmakogenetikai Konzorcium (2009) megállapította, hogy a CYP2C9 és a VKORC1 gén polimorfizmusának elemzésén alapuló warfarin dózisalgoritmus a betegek magasabb százalékát jelöli meg, akiknél a heti INR-értékek ≤ 21 mg és ≥ 49 mg szükségesek az INR-célok eléréséhez 49,4% vs 33,3% azoknak, akiknek ≤ 21 mg/hétre van szükségük, és 24,8% vs 7,2% -ra van szükségük azoknak, akiknek ≥ 49 mg/hétre van szükségük) 6 .
Egy nemrégiben 1015 résztvevőt magában foglaló tanulmány célja egy farmakogenetikai algoritmus kifejlesztése és validálása volt a warfarin terápia megkezdésekor. A klinikai és farmakogenetikai algoritmusok használatának megkönnyítése érdekében a szerzők egy nonprofit weboldalt fejlesztettek ki: www.warfarindosing.org; az oldalon található formában adja meg a beteg adatait (életkor, nem, súly, magasság, faj, dohányzás, májbetegség, antikoagulációt igénylő betegség, bazális és cél INR értékek, statin és amiodaron kezelések, antibiotikus vagy gombaellenes kezelések, CY2C9 genotípusok és VKORC1 - ha rendelkezésre áll), amely után becsülik a telítődózist és a napi terápiás dózist. Ha 3-4 warfarin beadása után visszatér a weboldalra, és megadja a kapott INR-értéket, dózismódosításra kerül sor 5 .
A Romániában és más európai országokban alkalmazott acenocoumarol-kezeléssel kapcsolatban számos tanulmány kimutatta, hogy a CYP2C9 * 2 vagy a CYP2C9 * 3 allél jelenlétében nagyobb a vérzés kockázata, és alacsonyabb antikoaguláns dózisokra van szükség. cél INR érték 10; 12. Csak egy tanulmány számol be az acenocoumarol fenntartó dózisairól genotípus szerint; így 2,5 terápiás INR eléréséhez az acenocoumarol napi fenntartó dózisa 2,44 mg az * 1 * 1 genotípusnál, 2,06 mg az * 1 * 2 genotípusnál és 1,57 mg az * 1 * 3 genotípusnál. Ezen kísérletileg megállapított értékek alapján egy román kutatócsoport egy szimulátort vezetett be, amely lehetővé tette a közös antikoagulációs sémák hatásának tanulmányozását az INR evolúciójára a CYP2C9 genotípustól és testtömegtől függően 1 .
Egy franciaországi tanulmány megállapította, hogy a farmakogenetikai vizsgálatokkal a túladagolás fokozott kockázata azonosítható az acenocoumarol terápiát kezdő emberek 25% -ában (a VKORC1 1639A vagy 1173T allél hordozói és a CYP2C9 * 3). Az antikoaguláns terápia kezelésének javítása klinikailag jelentős e gyógyszerek széles körű alkalmazása miatt 9 .
Összegzésképpen elmondhatjuk, hogy az elvégzett vizsgálatok a farmakogenetikai tesztek (CYP2C9 és VKORC1) klinikai validitását mutatják, és alátámasztják a kumarin antikoagulánsok egyes genetikai variánsai és terápiás dózisai közötti összefüggést. Az orális antikoaguláns terápia megkezdése előtt azonban még mindig nincs elegendő bizonyíték a rutinvizsgálatok költséghatékonyságáról. Amíg a prospektív klinikai vizsgálatok (pl. COAG vagy EU-PACT) eredményei nem állnak rendelkezésre, genetikai vizsgálat ajánlott a magas vérzésveszélyben szenvedő betegeknél, valamint a szokatlan terápiás válasz okának tisztázása érdekében: nagyon alacsony fenntartó dózisok szükségessége vagy az INR-értékek tartóssága. magas a 2-es antikoaguláns szokásos dózisainál; 4 .
Betegképzés - nincs szükség speciális képzésre 7 .
Begyűjtött minta - vér jön 7 .
Betakarítási konténer - EDTA-t antikoagulánsként tartalmazó vakutainer 7 .
Betakarított mennyiség - amennyit a vákuum megenged 7 .
Az elutasítás okai megpróbálni - heparin antikoagulánsként történő alkalmazása; koagulált vagy hemolizált minták 7 .
Tesztstabilitás - 7 nap 2-8 ° C-on; 1 év -20 ° C-on 7 .
Módszer - láncpolimerizációs reakció (PCR) kolorimetriás detektálással a szalagokon lévő specifikus próbákkal történő hibridizáció után; a CYP2C9 * 2 és a CYP2C9 * 3 2 allélnek megfelelő 2 CYP2C9 mutációt vizsgáljuk .
Az eredmények közlése
A kapott CYP2C9 genotípust közöljük 7 .
Határértékek és interferenciák