DBU - Biotechnológia finanszírozási prioritás ChemBioTec Az első technikai felhasználás
A munkalépések és az alkalmazott módszerek bemutatása A lignocellulóz emésztés legfontosabb enzimeit először elektroforetikusan és tömegspektrometriával azonosítják, és a kódoló géneket megfelelő gazdaszervezetekben fejezik ki. Ez hozzáférhetővé teszi az enzim koktélokat (enzimatikus eszközkészlet), amelyek célja a lignin polimer aromás frakcióinak hozzáférhetővé tétele az anyag újrafeldolgozása céljából. Tömegspektrometriás és kromatográfiás módszereket alkalmaznak a kis molekulatömegű bomlástermékek szerkezeti azonosítására. Az enzimtermelés fokozását és az új biokatalizátorok forgalmazását a projekt partnerei garantálják.
Eredmények és vita
A Xylaria polymorpha-t, az Ascomycete-t és a Pleurotus sapidus-t, a Basidiomycete-t alámeresztve tenyésztették és repce szalmán szénforrásként merítették. A tenyésztés során mindkét reprezentatív oxidatív és hidrolitikus enzim aktivitást detektáltuk. Vad típusú kultúrák (
PR és prezentáció
A projekt eredményeit számos előadáson mutatták be nemzeti és nemzetközi szinten. A projekt eredményeiről jelenleg összesen 5 tudományos publikáció készül.
Noha a fa lignocellulitikus gombás enzimek általi lebontásának mechanizmusait több mint három évtizede intenzíven vizsgálták, nem voltak szisztematikus vizsgálatok az Asco- és Basidiomycetes komplex szekretomjának elemzésére. A projekt befejezésével most először állnak rendelkezésre átfogó adatkészletek az Ascomycete Xylaria polymorpha és a Basidiomycete Pleurotus sapidus szekretómairól, amikor a megújuló alapanyagú repce szalmán tenyésztik. A vad típusú enzimeket mindkét szervezet tenyészeteiből előállítottuk, és sikeresen felhasználtuk a modell szubsztrátok megvalósításához. Számos szekretált P. sapidus enzimet klónoztunk heterológ gazdákba, és expresszáltattuk aktív formában. A keletkezett adatok végső bioinformatikai elemzése után optimalizált enzim koktélokat alkalmaztunk a repce szalma és a fa lebontására, lignin frakciók felszabadításával. A Deutsche Bundesstiftung Umwelt által jóváhagyott alapokon kívül minden érintett partner támogatta a projektet költségvetési forrásokkal és további személyzet bevonásával.