Fertőző kórokozók kimutatása (csíra kimutatás); gyógyszertári magazin
A baktériumok, vírusok és gombák súlyos betegségeket okozhatnak. Az ilyen fertőzések sikeres kezeléséhez az orvosok gyakran a laboratóriumban azonosítják a csírát
A baktériumtenyészetek tápanyag táptalajon nevelhetők
Hasi fájdalom, hasmenés, láz - ezek és egyéb panaszok lehetnek, ha kórokozókkal fertőződtünk meg. De hogyan találja meg az orvos a megfelelő kezelést? Sok helyzetben részletes kérdezés és fizikális vizsgálat, amelyet gyakran különféle vérértékek egészítenek ki, elegendő ahhoz, hogy képet kapjunk betegségünkről és megfelelő terápiát találjunk. Bizonyos esetekben az orvosnak pontosan tudnia kell, hogy melyik kórokozó okozta a betegséget, különösen a hatékony gyógyszerek célzott kiválasztása érdekében. - Mivel a helytelen kezelés nem csak haszontalan, sőt káros is lehet.
Hogyan tudja az orvos felismerni a kórokozókat?
Az orvosok testnedvek, székletminták vagy sebtamponok segítségével vizsgálják fel a kórokozókat. A mikroszkóp alatt végzett megfigyelés gyakran az első nyomokat adja. A laboratóriumi elemzések néha maguk a csírák, néha alkotórészeik, anyagcseretermékeik vagy akár patogén toxinok (toxinok) is kimutathatók, amelyeket egyes baktériumtípusok képesek termelni. A baktériumokat és gombákat gyakran úgy lehet növeszteni különböző tápközegekben, hogy az úgynevezett "kultúra". Az orvosok általában bizonyos antitestek révén észlelik a vírusfertőzéseket. Az antitestek olyan védekező anyagok, amelyeket a test a kórokozók (úgynevezett antigének) összetevőivel szemben alkot.
Mikor szükséges a csíra kimutatása?
A csírafelismerés egyrészt diagnózis felkutatására szolgál az akut betegségekben. Ezenkívül a csíra kimutatása a panasz nélküli emberek számára is fontos lehet, például ha az alkalmazottak után élelmiszer-feldolgozó cégekben keresnek szalmonellát. Vagy amikor tesztet végeznek annak megállapítására, hogy bizonyos kórházba került betegeknél vannak-e rezisztens baktériumok. Még akkor is, ha a közösségi létesítményekben többen szenvednek ugyanazon tünetektől, a csíra kimutatása segíthet feltárni a fertőzés útjait.
Az antitestek vizsgálata azt is megmutathatja, hogy az emberek immunisak-e bizonyos baktériumokkal szemben, vagy szükséges-e oltás. Ilyen például a rubeola vagy a hepatitis B elleni antitestek keresése a prenatális ellátásban.
A csíra kimutatásának előfeltétele: megfelelő minta
Megfelelő vizsgálati mintákban sok csíra kimutatható. Példák a mintákra a tamponok a sebekből, székletminták, testnedvek, például vizelet, idegvíz, váladék (váladék) a légutakból, valamint a vérminták speciális formája (vérkultúrák). Ezek a minták nem lehetnek szennyezettek a környezet egyéb csíráival. Ezért fontos, hogy óvintézkedéseket tegyen a minták összegyűjtésekor, és megfelelő edényekben tárolja. A mintának gyorsan el kell érnie a vizsgáló laboratóriumot is, hogy az eredményt ne hamisítsa meg a hosszú tárolási idő, nem megfelelő körülmények között. A minták nagy részét képzett egészségügyi szakemberek veszik. Néhány mintát a betegek maguk is megszerezhetnek, például székletmintákat vagy az első reggeli vizeletet.
Az, hogy melyik minta alkalmas a kórokozó kimutatására, a beteg betegségétől függ. A vizeletmintákban megtalálhatók a húgyúti fertőzéseket okozó kórokozók, agyhártyagyulladás esetén az idegvízben lehetnek a csírák. A szív- és érrendszer súlyos fertőzései, például a szívbillentyűk gyulladása, súlyos szervi fertőzésekből származó vérmérgezések vagy fertőzött érkatéterek esetén a csírák megtalálhatók a vérben. A minta vételének ideje is fontos. A csírák kimutatásának esélye a vérben akkor a legjobb, ha a vért nem sokkal akut láz előtt vagy alatt vették le.
Vizsgálati lépések a mikrobiológiai laboratóriumban: mikroszkópia, gyorstesztek, tenyésztés
A laboratóriumban több vizsgálati lépés következik. A minta fénymikroszkóp alatt vizsgálható, amikor még folyékony és még nem dolgozták fel. Ez akkor egy úgynevezett natív készítmény.
Ezenkívül a laboratóriumi személyzet gyakran állít elő különféle színezékekkel színezett szárított készítményeket (például Gram-foltot és egyéb speciális foltokat). E vizsgálat segítségével a lehetséges kórokozók spektruma gyakran jelentősen szűkíthető. Az orvos fénymikroszkóp alatt gyakran képes kimutatni baktériumok, gombák és paraziták jelenlétét. A vírusok túl kicsik ahhoz. A testsejtek tipikus változásai azonban néha láthatóak a mintákban, amelyek konkrét vírusfertőzésre utalnak. A mikroszkópos vizsgálat eredménye gyakran egy órán belül elérhető.
A kórokozó egyes összetevői vagy bizonyos anyagcseretermékek, például a toxinok (mérgező anyagok) szintén viszonylag gyorsan kimutathatók. Számos laboratóriumi módszer létezik erre. Például a laboratóriumi technikus a kórokozó egyes komponensei, az úgynevezett antigének ellen antitesteket kever össze egy mintába. Ezek az antitestek látható anyagokhoz kapcsolódnak, például latex részecskékhez. Ha a specifikus antitestek kötődnek a keresett antigénekhez, csomósodás következik be, amely szabad szemmel látható. Az ilyen gyors tesztek értékes információkat nyújthatnak, de általában viszonylag pontatlanok és hajlamosak is lenni. A legjobb, ha az eredményeket további mikrobiológiai vizsgálatokhoz használják.
Egy másik módszer a kórokozó kimutatására a tenyésztés kultúra formájában. De ez a vizsgálat időbe telik. Még a könnyen szaporodó baktériumok esetében is a tenyésztés eredménye általában csak körülbelül két nap elteltével várható. A lassan növekvő csíráknak, például a tuberkulózis kórokozóknak vagy gombáknak gyakran jelentősen hosszabb, esetleg több hétre van szükségük, mielőtt végleg meghatározhatók lennének. És sajnos egyes csírákat nem lehet a szokásos módszerekkel tenyészteni.
Kórokozók (főleg baktériumok és gombák) tenyésztése
A tenyésztés során a mintából származó élő kórokozóknak mesterséges tápközegen (tápközeg) kell növekedniük és elszaporodniuk. Ezután az orvos a további vizsgálati technikák segítségével pontosan meghatározhatja ezeket a baktériumokat, és tesztelheti azok érzékenységét a gyógyszerekkel szemben (pl. Antibiotikumok).
A táptalaj összetétele fontos szerepet játszik a kórokozó diagnosztizálásában. A táptalaj vizet, tápanyagokat, energiaforrásokat és nyomelemeket, valamint különféle egyéb anyagokat tartalmaz, amelyeknek a csírának szaporodnia kell. Zselésítő anyag (agar-agar) adja a tápanyag közegének erősségét. A pontos összetétel a keresett csíra követelményeihez igazodik:
- A legtöbb csíra az univerzális közegben nőhet.
- Szelektív táptalajon csak bizonyos baktériumok élhetnek túl.
- Az indikátor közegeket adalékokkal látják el, amelyek színeznek bizonyos csírákat.
Szelektív és indikátor táptalajokat használnak a kórokozók azonosítására olyan mintákból, amelyek a kórokozók mellett más csírákat is tartalmaznak. Például a bőr és a nyálkahártya tamponjai mindig tartalmazzák a természetes csíra flórát.
A legtöbb tenyészetet körülbelül 48 órán át kemencében "inkubálják". Ha az orvos kórokozóként gyanítja a lassan növekvő baktériumokat (például Legionella, mikobaktériumok vagy gombák), hosszabb inkubációs idő lehetséges, néha akár több hét is. A hosszabb tenyésztési idők a vérkultúrák esetében is gyakoriak.
Módszerek tenyészetekből származó csírák azonosítására
Ha a csírák megnőttek, az orvos pontosan meghatározhatja azokat a különféle jellemzők alapján. Ehhez felméri, hogy néz ki a kultúra. A baktériumok és bizonyos gombák úgynevezett telepeket alkotnak. Ez több ezer csíra, amelyek mind egyetlen csírából származnak. Néhány kórokozó jellegzetes kinézetű telepeken nő. A diagnózis magában foglalja azt is, hogy melyik közeg és milyen körülmények között nő a csíra. - Növekszik-e oxigén jelenlétével vagy anélkül, milyen hőmérsékleten és mennyi idő után? Ezenkívül az orvos megvizsgálja, hogy a csírák alkotnak-e bizonyos anyagokat.
A rezisztencia teszt során a laboratóriumi orvos újra tenyészti a baktériumokat. Tápláló közegeket használ, amelyekhez a különféle antibiotikumokat meghatározott mennyiségben keverik. Így láthatja, hogy mely gyógyszerek hatékonyak a csírákkal szemben, és melyek nem.
A mesterséges táptalajon azonban nem minden kórokozó nő. Különösen a vírusok, de bizonyos baktériumok is csak sejttenyészetekben vagy akár laboratóriumi állatokban is szaporodhatnak.
A kórokozók genetikai információinak igazolása
Az 1980-as évek óta létezik olyan módszer, amely kimutathatja a csírák genetikai információjának ismert szakaszait (DNS, RNS): az úgynevezett polimeráz láncreakció (PCR). Ez a PCR lehetővé teszi a mintában jelenlévő DNS vagy RNS szaporítását és összehasonlítását az ismert génszekvenciákkal. Ha egy csíra genetikai információja megtalálható a mintában, ez e csírával való fertőzésre utal.
A PCR lényegesen kevesebb időt vesz igénybe, mint a tenyészet. Az orvosok ezért időfüggő kérdésekre vagy nem termeszthető fertőző ágensek felderítésére használják őket. Nem helyettesítheti azonban a tenyészetet, mert nem rögzíti a kórokozó összes tulajdonságát: Például csak nagyon korlátozottan állítja az antibiotikumokkal szembeni érzékenységet.
Vírusfertőzések: kimutatás antitestekkel a vérben
A vírusfertőzések diagnosztizálásához az antitestek keresése a beteg vérében a legfontosabb kimutatási módszer. Az egészséges immunrendszer specifikus antitesteket képez, amikor érintkezésbe kerül a kórokozók bizonyos komponenseivel. Attól függően, hogy egy fertőzés nemrégiben történt-e, vagy régen volt, különböző típusú antitestek lehetnek jelen. Az ilyen patogénspecifikus antitestek száma a vérben, az úgynevezett titr szintén fontos információval szolgálhat. Az immunrendszer reakciójának követése érdekében ezért fontos lehet az antitestek többszörös meghatározása. A titer egyértelmű növekedése általában friss fertőzésre utal.
Tanácsadó szakértő: Dr. professzor rer. nat. Udo Reischl, biokémikus és orvosi mikrobiológus a Regensburgi Egyetemi Kórház Orvosi Mikrobiológiai és Higiéniai Intézetében (UKR)
Dagad:
1. Mims C, Dockrell HM, Goering RL: Orvosi mikrobiológia, fertőzés, 2. kiadás, München, Jena Elsevier 2006
2. Surbaum S, Hahn H, Burchard GD et al.: Orvosi mikrobiológia és fertőző betegségek 7. kiadás, Berlin Heidelberg Springer-Verlag 2012
3. Reischl U, Landt O, Rabenau HF et al.: Nukleinsav-diagnosztika a mikrobiológiai laboratóriumban - A kultúrától független kórokozók kimutatásának, a fajok differenciálásának és a molekuláris rezisztencia tesztelésének új lehetőségei, 1. kiadás, Bremen Uni-Med Verlag 2012
4. Maorny B: Új diagnosztikai módszerek az élelmiszer által okozott fertőzéseket okozó kórokozók kimutatására, állapot: 2007. november, online: www.bfr.bund.de/cm/343/neue_diagnostische_verfahren_zum_weise_von_erregern_ food-beding_infections.pdf (hozzáférés ideje: 2014. február 26.)
5. A tübingeni egyetemi kórház Orvosi Mikrobiológiai és Higiéniai Intézetének információs oldalai: A bakteriális fertőző betegségek kulturális diagnosztikája, online: https://www.medizin.uni-tuebingen.de/Forschung/Institute/Med_+Mikrobiologie+und+Hygiene-p- 748/Diagnostik/Bakteriologie.html (elérhető: 2014. február 26.)
Fontos jegyzet:
Ez a cikk csak általános információkat tartalmaz, és nem használható öndiagnosztikához vagy önkezeléshez. Nem pótolhatja az orvos látogatását. Szakértőink nem tudnak megválaszolni az egyes kérdéseket.