Gyakorlati jelentés A laktóz és a fehérjék elválasztása a tejből - Lap - ptitbou

Szerző: ptitbou • 2015. november 8. • Lap • 1 386 szó (6 oldal) • 3 402 megtekintés

gyakorlati

G.M Group TD 1.6

Jelentés TP III A laktóz és a tejfehérjék elkülönítése

A tej, az állati eredetű termék, háromféle összetevőt tartalmaz: fehérjéket, szénhidrátokat és lipideket.

A tejfehérjéket főleg kazeinek képviselik (körülbelül 35 kDa molekulatömeg = 35 000 g.mol -1).

Van olyan laktóz (vagy β-D-galaktopiranozil (1 → 4) D-glükopiranóz) is, amely diszacharid, ezért molekulatömege (342 Da) jelentősen alacsonyabb, mint a kazeineké, amelyek polipeptidként d 'amino-szekvenciák savak, amelyek mindegyike körülbelül 110 Da-ot képvisel.

II- A manipuláció célja

Ebben a manipulációban azt javasolták számunkra, hogy tanulmányozzuk a tej különböző alkotóelemeinek eluálási sorrendjét, először azáltal, hogy kizáró kromatográfiával elválasztjuk őket egymástól, majd spektrofotometriával detektáljuk jelenlétüket különböző frakcióinkban. Fehling italával az ózokhoz.

III- Az alkalmazott technikák elve

Ebben a részben bemutatjuk a manipuláció során alkalmazott különféle tanulmányozási technikák alapelveit.

Gélszűrési technika vagy kizárási kromatográfia

Ez az elválasztási módszer lehetővé teszi a minta kromatográfiás oszlopba juttatott különböző alkotórészeinek eluálását, méretüktől és ezért molekulatömegétől függően.

Valójában az ebben a szűrési eljárásban használt gél (itt Sephalex G-25) kémiai affinitás révén nem lép kölcsönhatásba a mi érdeklődésre számot tartó makromolekuláinkkal (mint az affinitáskromatográfiában), de lehetővé teszi azok szétválasztását, mert a három- dimenziós hálózat, amelybe csak kis molekulatömegű molekulák tudnak behatolni. Így az oszlopban tartózkodási idejük meghosszabbodik a nagy molekulatömegű makromolekulákhoz képest, amelyeket nem helyeznek be a mikragyöngyök közé, és késedelem nélkül elúsznak. A gélből teljesen kizárt nagy molekulákat V 0 -val egyenértékű oldószerrel eluáljuk (holttérfogatnak nevezzük, ez az oszlop teljes térfogatának egyharmadának felel meg), míg a kisebb molekulatömegűeket, amelyek hosszabb ideig az oszlopban, nagyobb puffertérfogattal távozik, egyenlő V e = V 0 + K d V i és K d értékkel, amely az egyes molekulákra jellemző állandó, és amely fordítottan változik a molekula logaritmusával arányosan a figyelembe vett molekula tömege.