Humán herpeszvírus (HHV) 6. típusú DNS (vér, CSF) - Synevo
Általános információ
A 6. típusú humán herpeszvírust - a humán herpeszvírust 6 (HHV-6) - Salahuddin és munkatársai izolálták 1986-ban. . A β-herpeszvírusok alcsaládjához, a Roseolovirus nemzetséghez tartozik, és két változatban írják le: A és B. A HHV-6B a fő kórokozó, amely részt vesz egy bőrbetegség - exanthema subitum (roseola infantum vagy 6. gyermekkori betegség) - etiológiájában. míg a HHV-6A-t főleg immunhiányos gazdaszervezetekben detektálták 2 .
A HHV-6 egy DNS vírus, amelynek genomját lipidhéj veszi körül. A többi herpeszvírushoz hasonlóan a HHV-6 mind az elsődleges fertőzéseket, mind a látens fertőzések reaktivációit okozza. .
A HHV-6 mindenütt elterjedt, a populáció 95% -a rendelkezik anti-HHV-6 antitestekkel; A vírus általában a fertőzött emberek nyálán keresztül terjed.
In vivo a HHV-6 megfertõzi és szaporodik a CD4-pozitív limfocitákban a CD46 sejtreceptoron keresztül, amely egy 52-57 kDa transzmembrán glikoprotein, amely kölcsönhatásba lép a vírusos glikoproteinekkel: gH, gL, gQ1 vagy gQ2.
Az akut fertőzés során a replikáció a limfocitákban (B, T, NK), a makrofágokban, a histiocitákban, az endoteliális sejtekben, a hepatocitákban, a nyálmirigyekben és a központi idegrendszerben történik. A HHV-6A túlnyomórészt az idegsejteket fertőzi meg, míg a HHV-6B a perifériás vér mononukleáris sejtjeiben található meg gyakrabban. A vírus közvetlen citolízist produkál, ez a hatás felelős a bőr és a fertőző mononukleózishoz hasonló tünetekért. A HHV-6 növeli a CD4 expressziót a T-limfociták felszínén, ami fokozott hajlamot mutat a HIV-fertőzésre.
Az elsődleges fertőzés 1-2 hetes inkubációs periódus után következik be, általában csecsemőknél (a gyermekek 40-50% -a az első életévben kapja meg a betegséget, a fertőzöttek százaléka 2 évesen eléri a 77-82% -ot)., csúcsa 9 és 21 hónap között van), és felelős a 6-24 hónapos gyermekek lázas rohamai eseteinek harmadáért. A HHV-6 fertőzések körülbelül 25% -a exanthema subitumként (roseola infantum) nyilvánul meg, amelyet 3-4 napig tartó magas láz jellemez, majd makula vagy makulopapuláris kiütések következnek be, amelyek a hőmérséklet normalizálódásakor jelentkeznek. A kiütések a törzsből vagy a nyakból indulnak ki, terjednek az arcra és a végtagokra, és néhány óra és 2 nap között tartanak. A betegség kísérheti: köhögés, nyaki vagy nyaki nyirokcsomó nyirokcsomó, ingerlékenység, kötőhártya-gyulladás, szemhéj ödéma, szökőkút kitüremkedés, orrfolyás vagy hasmenés. A klinikai megnyilvánulások átlagosan 9 napig tartanak, és ritkán bonyolítják agyhártyagyulladás vagy agyvelőgyulladás.
A HHV-6 az agyhártyagyulladás ritka oka; a vírus encephalitist is okozhat látszólag egészséges, tudatzavarral, görcsrohammal, pszichózissal vagy koponyaidegbénulással rendelkező gyermekeknél. A legtöbb esetben a panencephalia társulhat tartós neurológiai következményekkel 2. HHV-6 DNS-t detektáltak a CSF-ben a gyermekek legfeljebb 57% -ánál 1 .
Az akut HHV-6 fertőzés ritkán fordul elő immunkompetens felnőtteknél, és a fertőző mononukleózishoz hasonló szindrómaként jelentkezhet, lázzal, limfadenopátiával, generalizált kiütéssel, fulmináns hepatitisszel, thrombocytopeniás purpurával, myocarditisszel vagy encephalitisszel.
Az elsődleges fertőzés után a vírus rejtve marad a limfocitákban és monocitákban, alacsony szinten fennáll a különféle sejtekben vagy szövetekben, és az immunrendszer sérülése esetén újra aktiválódhat. Immunkompetens egyéneknél ez a tartós fertőzés nem jár következményekkel.
A HHV-6 reaktiváció gyakori megnyilvánulása immunszuppresszált egyéneknél (a hematopoietikus őssejt-transzplantációban szenvedő betegek 50% -a és a szilárd szervátültetéssel rendelkezők 33% -a), és a vírus DNS kimutatható a perifériás vérben. A reaktivációk az átültetést követő első hónapban fordulnak elő, és gyakoribbak azoknál a betegeknél, akiket anti-CD3 antitestekkel vagy kortikoszteroidokkal kezeltek, vagy azoknál, akiken allogén transzplantáció vagy köldökzsinór őssejtek estek át. A betegeknél a korai poszttranszplantációs időszakban gyakran van láz és kiütés. A HHV-6 a hematopoietikus őssejteket megfertőzi a kolóniák képződésének in vitro gátlásával, és néhány tanulmányban összefüggésbe hozta a csontvelő szuppressziójával és a késői ojtással. A hematopoietikus őssejt-transzplantációval rendelkező betegek vírusos reaktivációinak 95% -a HHV-6B.
Az immunszuppresszált betegek legjobb dokumentált megnyilvánulása az encephalitis. 2-6 hetes időközönként fordulnak elő a transzplantáció után fejfájással, zavartsággal, görcsökkel, pszichózisokkal vagy a koponyaidegek hiányosságaival. Míg a CT-vizsgálat a kezdeti szakaszban általában normális, az MRI a betegek 75% -ában a temporális lebeny szürkeállományának rendellenességeit jelzi. A pozitív diagnózist a vírus cerebrospinalis folyadékban való jelenléte alapján állapítják meg.
HHV-6-asszociált óriássejtes májgyulladás, vastagbélgyulladás és gyomor-nyombélgyulladás eseteiről transzplantált betegeknél is beszámoltak.
A HHV-6 kevésbé gyakori az encephalitisben és a tüdőgyulladásban AIDS-es betegeknél, és nem gondolják, hogy befolyásolja a HIV-fertőzés AIDS-stádiumba történő progressziójának sebességét.
A HHV-6 a sclerosis multiplexhez társult a DNS és a vírusantigének kimutatása alapján a CSF-ben és az agyban. Így a HHV-6 megtalálható az oligodendrocyták magjaiban a sclerosis multiplexes betegek elváltozásaiban, a kutatók szoros összefüggést találtak az anti-HHV-6 IgM antitestek cerebrospinalis folyadékban való jelenléte és a sclerosis multiplex korai stádiuma között. Egyesek szerint a vírusfertőzés fontos szerepet játszik a betegség patogenezisében, molekuláris mimikrián keresztül, a vírusfehérjék keresztbe reagálva a mielin bázikus fehérjével. További vizsgálatokra van szükség azonban a HHV-6 sclerosis multiplexben betöltött szerepének teljes meghatározásához. .
Az elsődleges fertőzés pozitív diagnózisát az IgG antitestek negatívról pozitívra történő szerokonverziójával vagy IgM antitestek jelenlétével lehet kimutatni. Az IgG antitestek titerének négyszeres növelése aktív betegségre utal. A szerológiai diagnózis azonban nem képes megkülönböztetni az elsődleges fertőzést a reaktivációtól. A diagnózis alternatív módszere a vírus DNS kimutatása a szérumban vagy a plazmában az antitestek megjelenése előtt, de ez a módszer kevésbé specifikus, mint a szerokonverzió.
Immunhiányos egyéneknél fontos megkülönböztetni a látens fertőzést (klinikai megnyilvánulások nélkül) és a reaktivációt, amely a vírus DNS-jének a plazmában történő meghatározásával érhető el. .
Ajánlások a HHV-6 - DNS meghatározására - hasznos a HHV-6 fertőzések gyors diagnosztizálásában 4 .
Betegképzés - nem szükséges 3 .
Begyűjtött minta - a) vér jön; b) ágyéki szúrással összegyűjtött cerebrospinalis folyadék 3 .
Betakarítási konténer - a) vakuainer, amely antikoagulánsként EDTA-t tartalmaz; b) steril CSF tartály 3 .
Betakarított mennyiség - a) amennyire a vákuum megengedi; b) legalább 2 ml 3 .
Betakarítás után szükséges feldolgozás - a), b) probele nem centrifugáljuk 3 .
A bizonyíték elutasításának okai - a) régi, koagulált, hemolizált minták; heparin antikoagulánsként történő alkalmazása 3 .
Tesztstabilitás - a vér- vagy CSF-minták 1 hétig stabilak 2-4 ° C-on 3 .
Módszer - Valós idejű PCR Light-Cycler: láncpolimerizációs reakció a felhalmozódott PCR termék valós idejű kimutatásával, a kibocsátott fluoreszcencia mérésével (a tesztet plazmából vagy CSF-ből hajtják végre) 3 .
Referenciaértékek - HHV-6 kimutathatatlan DNS 3 .
Kimutatási határ - 10 gyermek/3. minta .
Az eredmények értelmezése
A HHV-6 plazma DNS pozitív eredményének elérése a klinikai kép jelenlétében az aktív fertőzés indikátora.
A HHV-6 DNS kimutatása a cerebrospinális folyadékban a központi idegrendszer fertőzésére utal, de nincs abszolút diagnosztikai értéke (előfordulhat HHV-6 DNS a CSF-ben és más, a vírushoz nem kapcsolódó központi idegrendszeri állapotokban is; neurológiai szindróma nélküli betegeknél is kimutatható) 1; 2; 4 .
Határértékek és interferenciák
A negatív eredmény nem zárja ki a HHV-6 fertőzést 4 .
A PCR-teszt hasznosságát a HHV-6 fertőzések diagnosztizálásában bonyolítja, hogy a HHV-6 az emberek 0,7-1,5% -ában integrálódik a kromoszóma DNS-be. A HHV-6 beágyazott példányait tartalmazó őssejtek vírus DNS-t továbbítanak a transzplantált recipienseknek. Emiatt, ha az elemzett minta leukocitákat tartalmaz, akkor pozitív eredményt lehet elérni aktív fertőzés hiányában 2 .
1. Guy Boivin. A központi idegrendszer herpeszvírus fertőzésének diagnosztizálása. In HERPES 11, Kiegészítés, 2004.
2. Jeffrey I. Cohen 6. és 7. típusú emberi herpesz.
3. Synevo Laboratórium. Konkrét hivatkozások a felhasznált munkatechnikára 2015. Ref. Típus: Katalógus.