OAB vércsoport (Beth Vincent, Simonin); Központi Katonai Sürgősségi Egyetemi Kórház Dr.
OAB vércsoport (Beth Vincent, Simonin)
Általános információ
Emberben 26 vércsoport-rendszert azonosítottak 228 antigénnel; a vércsoport egy vagy több antigénből áll, amelyeket egyetlen gén irányít, vagy két vagy több szorosan kapcsolódó gén komplexe.
Más antigéneket is azonosítottak, amelyek nem voltak hozzárendelve kialakult rendszerekhez. Az eritrocita antigének lehetnek fehérjék, glikoproteinek vagy glikolipidek. A legtöbbet az eritrocita szintetizálja, azonban néhány antigén, például a Lewis-rendszerhez tartozó, adszorbeálódik a plazmából az eritrocita membránján. Egyes antigének specifikusak az eritrocitákra, míg mások a test más sejtjein találhatók. A vércsoportok ismerete elengedhetetlen a transzfúziós terápia szempontjából. Így azok a személyek, akik nem rendelkeznek bizonyos vörösvértest-antigénekkel, alloantitesteket termelhetnek, ha ezeket az antigéneket tartalmazó vérnek vérátömlesztésben vagy terhesség alatt ki vannak téve. Az eritrocita antigénekkel kölcsönhatásba lépő antitestek azonnali vagy késleltetett hemolitikus transzfúziós reakciókat és újszülött hemolitikus betegségeket okoznak.
Az ABO vércsoportrendszer a legfontosabb vércsoportrendszer, mert: ha az antigének nem expresszálódnak az eritrociták felületén, a megfelelő antitestek mindig jelen vannak a plazmában, az antitesttermelés ingereit különféle környezeti tényezők képviselik, mint pl. baktériumok (pl. E. coli), amelyek a felszínen az ABO szénhidrátokkal szinte azonos szerkezetekkel expresszálódnak; a képződött antitestek főleg IgM (főleg) és IgG keverékét képviselik, amelyek 37 ° C-on aktívak és képesek aktiválni a komplementet, és az eritrocita membránon található antigén helyek nagy sűrűsége lehetővé teszi nagy számú antitest megkötését, ami inkompatibilis vérátömlesztés esetén az ABO rendszer, akut hemolitikus transzfúziós reakciókban.
Valamennyi immunokompetens egyén természetes antitesteket (izoagglutinineket vagy izohemolizineket) termel a hiányzó ABO (H) csoport antigénjeivel szemben. Az anti-A és az anti-B általában 3-6 hónappal a születés után detektálható, és 5 éves korában az antitest-titer eléri a maximumát, és felnőttkorban is fennmarad. Az IgM antitestek titerje fokozatosan csökkenhet az életkor előrehaladtával. Anti-A és anti-B antitestek is vannak jelen azokban, akiknek gyenge A vagy B variánsuk van. Az újszülöttek általában nem tartalmaznak jelentős mennyiségű anti-A és anti-B-t a plazmában, kivéve azokat, akik alloimmunizált anyáktól születtek, akiknél az anyától a placentán átjutott IgG antitestek jelen lehetnek. Az ABO antitestek nem jelentik az újszülöttek hemolitikus betegségének fő okát a vérben lévő oldható A és/vagy B anyagok, valamint az eritrocitákon kívüli más sejteken található A vagy B antigének gátlása miatt; az antitestek kötődési affinitása a cukormolekulákhoz is gyengébb, mint a fehérjemolekulák, például a D4 antigén ellenanyagoké. A hemolízis akkor valószínűbb, ha az anya O csoport, az A2 gyermek csoporttal.
Ajánlások az ABO2 vércsoport meghatározására
• transzfúzió előtt;
• invazív vagy műtéti beavatkozás előtt, amely potenciálisan vérzéses szövődményekkel járhat, amelyek transzfúziót igényelhetnek;
• anya és gyermek antepartum és posztnatális immunohematológiai monitorozása;
• véradóknak;
• az ABO-csoport kompatibilitására a vese- és szívátültetés során.
aratás
Betegképzés - nem szükséges előzetes képzés; hasznos információk a meghatározás előtt elvégzett makromolekuláris oldatok infúziós kezeléséről, transzfúziók az elmúlt 120 napban, Gram-negatív csírákkal fertőző betegségek szepszissel vagy anélkül, rosszindulatú betegségek (carcinoma, lymphoma, myeloma).
Begyűjtött minta - a) kapilláris vér az ujj pépéből; b) vér jön.
Betakarítási konténer - b) adalékanyagok vagy aktiváló gél nélküli vákuumozó (vörös vagy színtelen kupak).
Betakarított mennyiség - b) amennyit a vákuum megenged.
A bizonyíték elutasításának okai - erősen hemolizált példány.
Tesztstabilitás - a vizsgálatot azonnal el kell végezni, ha ez nem lehetséges, a mintát 48 órán át 2-8 ° C-on tartják.
Betakarítás után szükséges feldolgozás - szobahőmérsékleten történő teljes koaguláció után a szérumot és az alvadékot eltávolítjuk. A fennmaradó vörösvértestekből 10% -os szuszpenziót készítenek saját plazmájában vagy sóoldatban. A kártyákon történő agglutinálás módszeréhez 5% vörösvértest szuszpenziót készítenek egy speciális szuszpenziós közegben.
Módszer
A meghatározás módszere - a Synevo laboratóriumokban a közvetlen/globuláris módszert (Beth-Vincent) hajtják végre az ABO vércsoport meghatározására anti-A, anti-B és anti-AB szérumok felhasználásával, a következő változatokkal:
- hemagglutináció a lemezen3. Két kontroll alkalmazható: AB kontroll (a beteg vörösvérsejtjei AB szérummal) és autó kontroll (vörösvértestek és saját szérum).
- agglutináció és gélszűrés mikrocső kártyákon, amelyek tartalmazzák a meghatározandó eritrocita antigénspecifikus reagenssel (egér vagy humán monoklonális antitestek) impregnált gélt - közvetlen ABO csoportosítási teszt és Ag RH1 (D) és Ag RH 1 meghatározása, 2.3 (DCE).
Határértékek és interferenciák
A vércsoport meghatározásának eredményét két embernek kell elolvasnia, és végül meg kell erősítenie egy második vérmintával.
A kártya agglutinációs módszer esetében a pozitív reakció csak akkor érvényesül, ha a kontroll mikrotubus negatív. A pozitív reakció értékelhető az agglutinátok méretétől függően + -tól ++++.
Olvasási hibák technikai hibák miatt:
- piszkos üvegáru; bakteriális szennyeződés;
- mikrotagok jelenléte (hamis agglutináció);
- nem figyelték meg: vörösvértest/szérum arányok, a vérvizsgálati szérumok csepegési sorrendje (ellentmondásos agglutináció), olvasási idő - késői olvasás: száraz élek (hamis agglutináció), korai olvasás (agglutináció hiánya vagy rossz agglutináció).
A vörösvérsejtek által okozott hibák
Hamis agglutinátorok
a) Hengerek jelenléte (pszeudoagglutináció): makromolekuláris oldatok (Dextran, HES) használata, koagulációs rendellenességek, nem teljesen koagulált vérminták, hiperfibrinogenémia, fibrin lebomlástermékek, fibrinolitikus szerek, dysproteinemia, paraproteinemia, krioglobulinemia, emelkedett vérnyomás, magas szintű heparin, protamin-szulfát), reumatoid faktorok, emelkedett koleszterinszint, bilirubin, leukocitózis, leukocita enzimek2. Az AB kontroll pozitív; Az eritrociták mosása lehetővé teszi a gömb alakú minta helyes elvégzését.
b) Önagglutináció
• Hideg agglutininek jelenléte (az autó fénye pozitív). A vérmintát és a reagenseket 37 ° C-on előinkubáljuk, és a vizsgálatot forrón végezzük.
• Az alloantitestek által borított vörösvérsejtek: inkompatibilis terhességből származó újszülöttek (Rh rendszerben, ABO),
inkompatibilis vérrel transzfundált beteg.
• A vércsoport meghatározása a köldökzsinórból gyűjtött véren: A Wharton-zselatin, az eritrocitákat körülvevő makromolekuláris anyag pszeudoagglutinátok megjelenését kelti. Eltávolításához az eritrocitákat legalább hatszor meg kell mosni a meghatározás előtt.
• A gyógyszer immun komplexeinek jelenléte.
c) Poliglutináció
Gram-negatív bacillusokkal járó szeptikémiákban a kriptoantigének (T) a legtöbb emberi szérumban jelen lévő antitestek (anti-T) által felismert bakteriális ágensek enzimatikus hatásának vannak kitéve. A Witness AB pozitív.
Hiányos vagy gyenge agglutinációk vagy kettős populáció szempontjai: az agglutináció nem teljes, szabad vörösvérsejtek jelenlétével (az agglutinációk rózsaszín háttéren jelennek meg):
• régi vér;
• gyenge antigének: újszülöttek, koraszülöttek;
• gyenge A vagy B alcsoport;
• antigének gyengítése (leukémiákban, limfómákban, Hodgkin-kórban);
• O vagy O csoport vérrel transzfundált A vagy B csoportba tartozó beteg, anyai-magzati vérzés;
• nagy mennyiségű A vagy B anyag jelenléte a plazmában (gyomorrák, hasnyálmirigy), amely semlegesíti a tesztantitesteket (a vörösvérsejteket le kell mosni, hogy eltávolítsák őket);
• kiméra vagy mozaik jelenléte (kivételes, pl .: poszt-medulláris allograft).