Összehasonlítható étrend-kiegészítők 2012 - Wiley Analytical Science
Áttekintés
Az izoflavonszintek fogyasztóbarát megjelenítése
Az izoflavonok elemzése és számszerűsítése a választott módszertan függvényében különböző módon végezhető el, ami - főleg a fogyasztó szempontjából - átláthatatlan információkhoz vezethet az izoflavonszintekről, következésképpen sokkal nehezebbé teheti a termék objektív összehasonlíthatóságát. A speciálisan kiírt izoflavon tartalmú étrend-kiegészítők esetében ezért többnyire nem világos, hogy ezek a tartalmak valóban bioaktív koncentrációkra vonatkoznak-e, vagy csak az izoflavon konjugátumok összegéből számítják ki.
Izoflavonok a szójában
A fitoösztrogénekhez tartozó izoflavonok a polifenolos növényi alkotórészek csoportját jelölik, amelynek gyengén ösztrogén hatása tulajdonítható a 17-β-ösztradiollal való kémiai szerkezeti hasonlóságuk miatt. Ezeknek a tulajdonságoknak köszönhetően lehetőségük van a hormonfüggő rákok, a szív- és érrendszeri betegségek és az oszteoporózis csökkentésére, és természetes alternatív gyógyászatként szolgálnak, különösen a menopauzás panaszok enyhítésére [1–4].
A szója, mint étrendünk legfontosabb izoflavonforrása, három szerkezeti szempontból különböző izoflavon aglikon (daidzein, glicitein és genistein) különböztethető meg, amelyek jelen lehetnek β-glikozidok formájában, vagy tovább észterezhetők a glikozidok malonil- vagy acetil-észtereként is. . Minden aglikonhoz további három izoflavon konjugátum tartozik, ami összesen 12 lehetséges izoflavon formát eredményez a szója számára.
A feldolgozatlan szójababokban az izoflavonok főleg glikozidok formájában és malonil-észterekként találhatók meg, ezáltal a további feldolgozás (pl. Nedves/száraz melegítés) alapvetően megváltoztathatja ezt a tipikus eloszlást, amely megfelelő intenzitással (pl. Biokémiai folyamatok, például fermentáció) ) a teljes aglikonok teljes lebomlásához vezethet [5-6].
Az összes izoflavon-aglikon elemzése
Figyelembe kell venni azt is, hogy csak az aglikonoknak tulajdonítanak bioaktív hatást [7], ennek döntő szempontnak kell lennie az értékelés során, különösen a kifejezetten reklámozott izoflavon tartalmú termékek (pl. Étrend-kiegészítők) esetében. Az objektív (és fogyasztó-orientált) termék-összehasonlítás lehetővé tétele érdekében nyilvánvalónak tűnik az izoflavon-tartalom bemutatása a (bioaktív) teljes aglikonok alapján.
Azoknál az elemzéseknél, amelyek az izoflavon-tartalmat csak az egyes (nehezebb) konjugátumok összegeként számolják (pl. Oldószeres extrakció után), az ezt követő átalakítás a megfelelő aglikon-ekvivalensekké lehetséges alternatívát kínál a tényleges bioaktív koncentrációk „hamisítatlan” ábrázolásához. Itt kell megjegyezni azt is, hogy különösen a malonil- és acetil-észterek alacsony stabilitásúak, és a minta feldolgozása során már átalakulhatnak/lebonthatók.
A mennyiségi meghatározás robusztusabb módja viszont a hidrolitikus analízis protokollok használata, amelyben savas, bázikus vagy enzimatikus (β-glükuronidáz, celluláz, β-glükozidáz) hidrolízis után az izoflavon konjugátumok mennyiségileg átalakulnak sokkal stabilabb glikozidokká és/vagy aglikonokká alkalmazott hidrolízis) és következésképpen számszerűsítve [8].
A minta feldolgozásának különböző paramétereitől függően (oldószer kiválasztása, extrakciós technika, hidrolízis protokollok stb.) Különböző "optimális" módszerek léteznek, amelyek többé-kevésbé összehasonlítható eredményeket eredményeznek, objektív összehasonlításként az elemzett/számított összes aglikon tartalom referencia alap meg kell engednie.
Ezt figyelembe véve kidolgoztunk egy protokollt az összes izoflavon aglikon elemzésére különféle „szójaalapú” élelmiszerek (szójabab, tej, joghurtok, étrend-kiegészítők) számára [9-10]. Kétlépcsős módszerrel a mintát először kivonták, a szerves-vizes izoflavon-tartalmú extraktumokat előállították (1a. Ábra), majd pufferolták és enzimatikus hidrolízishez (közvetett hidrolízis mintamátrix nélkül) Helix pomatia-ból származó β-glükuronidázzal (EC 3.2.1.31, amelyet a Római csiga) inkubálták.
Egy éjszakán át tartó inkubálás az összes izoflavon konjugátum (glikozidok és észterek) teljes lebomlását eredményezte olyan hidrolizátumokkal, amelyekben csak a szabad teljes aglikonok voltak kimutathatók (1b. Ábra). A három aglikont UPLC (Waters Acquity Ultra Performance LC) és UV detektálás segítségével 260 nm-en detektáltuk [9-10].
Összehasonlítható étrend-kiegészítők?
Az izoflavonok egészséget elősegítő hatásaival kapcsolatos megbeszéléseket/publikációkat hamarosan széles körű kereskedelmi célú étrend-kiegészítők követték (szója vagy vörös lóhere alapján), kifejezetten reklámozott izoflavon tartalommal, amelyeket különösen a menopauza tüneteinek enyhítésére szánnak. A különböző adagolási formákon (tabletták, kapszulák, instant por, folyékony készítmények) kívül a tényleges rendeltetésszerű felhasználás (csak izoflavon-kiegészítés vagy többpreparátum hozzáadott vitaminokkal), a javasolt dózisok (mg izoflavon kapszulánként naponta) és az összetevők (izoflavontartalmú kivonatok, koncentrátumok " tiszta kapszulák ”), az izoflavon-tartalom kétértelmű meghatározása megnehezíti az ilyen készítmények objektív termék-összehasonlítását.
Általában csak a teljes izoflavon-tartalmat adják meg (például mg szója-izoflavon kapszulánként); Azonban többnyire nem világos, hogy ezek valóban bioaktív koncentrációk-e. Erre a problémára tekintettel az összes aglikont elemezték különféle étrend-kiegészítőkre (gyógyszertárakból, gyógyszertárakból stb.), És összehasonlították a megadott izoflavon tartalommal (fogyasztóbarát termékcímkével a tartalomnak meg kell egyeznie!).
Az enzimatikus hidrolízis után az összes aglikon mennyisége azonban minden vizsgált étrend-kiegészítő esetében túl alacsony volt, jelentős negatív eltérésekkel; azaz a bioaktív hatású mennyiség (aglikonok) mindig alacsonyabb volt, mint az ígéret megígérte (a megadott koncentrációknak csak a 40-95% -a, 2. ábra). Ezeknek az eltéréseknek a magyarázatát végül az összes izoflavon forma megoszlásának megvizsgálásakor találták meg, mivel ezek a mintákban honosak voltak. Az extraktumok (izoflavon ujjlenyomat a hidrolízis előtt) túlnyomórészt a „nehezebb” glikozidokat és észtereket tartalmazták, mint az uralkodó izoflavon formák (pl. 7. leves, 3a. Ábra), bár csak két készítményt (leves 6,9, 3b. Ábra) jelentős mennyiségű szabad aglikont lehetett kimutatni [9].
Ennek eredményeként a (legtöbb) gyártó kiszámolja a megadott izoflavonszinteket az egyes izoflavon konjugátumok összegeként (az aglikonoknál nehezebb 1,6-2,0 faktor), ami szintén eltéréseket eredményez az összes elemzett aglikonokhoz képest. Az inaktív "cukor" részt tehát a meghatározott tartalom tartalmazza, amely viszont (a fogyasztó számára) nyilvánvalóan magasabb bioaktív koncentrációt "szimulál".
Még ha a csomag magasabb tartalmat ígér is, ez nem feltétlenül jelenti azt, hogy a bioaktív koncentrációnak is magasabbnak kell lennie. Ezenkívül természetesen itt is meg kell említeni, hogy a konjugátumok felhasználásával végzett számítást nem szabad „tévesnek” vagy „megtévesztésnek” tekinteni, mivel az a termékben honos izoflavon formákra vonatkozik, és csupán kétértelmű mennyiségi típus.
következtetés
Mivel az ár mellett csak a deklarált izoflavon tartalom használható fel az ilyen étrend-kiegészítők vásárlási döntésére (és valóban bioaktív mennyiségeket kell feltételezni), itt egy objektív és fogyasztó-orientált specifikáció áll az előtérben, és a tartalom kiszámítása a teljes Úgy tűnik, hogy az aglycone a legegyszerűbb és legpraktikusabb módszer/megoldás erre.
[1] Adlercreutz H.: The Lancet Oncology 3, 364-373 (2002).
[2] Wroblewski Lissin L. és Cooke J.P .: Journal of the American College of Cardiology 35, 1403-1410 (2000).
[3] Wuttke W. és mtsai: The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology 83, 133–147 (2002).
[4] S etchell K.D.R. és Lydeking-Olsen E.: American Journal of Clinical Nutrition 78, 593S-609S (2003)
[5] Wang H.-J. és Murphy P. A.: Journal of Agricultural and Food Chemistry 42, 1666-1673 (1994)
[6] Coward L. és mtsai: American Journal of Clinical Nutrition 68, 1486S-1491S (1998).
[7] Setchell K.D.R. és mtsai: Journal of Nutrition 131, 1362S-1375S (2001)
[8] Schwartz H. és Sontag G.: Analytica Chimica Acta 633, 204–215 (2009).
[9] Fiechter G. és mtsai: Analytica Chimica Acta 672, 72–78 (2010).
[10] Fiechter G. és mtsai: Food Research International (sajtóban) doi: 10.1016/j.foodres.2011.03.038 (2011)
Ao. Univ. Prof. DI Dr. Helmut K. Mayer; DI Gregor Fiechter