Panserin C6000, fehérjamentes tápközeg CHO-sejtekhez szuszpenzióban, w L-glutamin

  1. Főoldal/->
  2. Panserin C6000, fehérjamentes tápközeg CHO-sejtekhez szuszpenzióban, w: L-glutamin
  • Használjon sejteket a szérumot tartalmazó tapadó tenyészetből (pl. DMEM magas glükózszint 10% FCS-sel) a log fázisból.
  • Távolítsa el a szérumot tartalmazó táptalajt pipettával.
  • Mossa a sejtpázsit PBS-sel Ca, Mg nélkül.
  • Fedje le a sejtpázsit tripszin/EDTA-val (0,25%, 0,02%) (kb. 2 ml T25-ös palackon).
  • Kb. 1 perc múlva távolítsa el a tripszint.
  • Inkubálás, amíg a sejtek lekerekednek és leválnak a szubsztrátról. (kb. 5 perc múlva).
  • Abszorbeálja a sejteket a DMEM-ben, állítsa le a fennmaradó tripszin aktivitást 10% FCS-sel.
  • Centrifugáljuk a sejteket, vegyük fel PBS-ben és centrifugáljuk újra.
  • Vegye fel a sejteket a PBS-ben, és határozza meg a sejtek számát. 5 x 104 - 1 x 105 sejt/ml magot előmelegített Panserin C6000-be.
  • A szuszpenzió tenyésztéséhez palackokat használjon (pl. Greiner bio-one, kód 690 190).
  • Inkubálás 37 ° C-on és 5% CO2-gázosítás az inkubátorban.

Az első napokban késleltetési szakasz következik be, szinte alig megy végbe sejtburjánzás. Kb. 7 nap elteltével azonban a sejtek megszokták a fehérjamentes táptalajt és 1 × 106 sejt/ml-re növekedtek.

tápközeg

Vigye a sejteket friss táptalajra 3-4 naponta.

3. vetőmag - 5 x 104 sejt/ml.

Generációs idő CHO Panserin C6000-ben: 16,5 óra.