Preanalytics. Utasítások a mintaanyagok állatorvosi gyakorlatban történő kezelésére
Előzetes elemzés Utasítások a mintaanyagok kezelésére az állatorvosi gyakorlatban
Klinikai kémiai szérumcsövek fehér szemcsékkel (Sarstedt), sárga géllel (BD) hematológiai EDTA csövek piros (Sarstedt) vagy lila (BD) heparin csövek narancssárga (Sarstedt) vagy zöld (BD) koagulációs analízis citrátcsövek zöld (Sarstedt) vagy kék (BD) Speciális tubusok EDTA aprotinin tubusok rózsaszín (ACTH meghatározás) Glükóz és laktát Nátrium-fluorid csövek sárga (Sarstedt) vagy szürke (BD) vonalkód matricák erősen nyomva vannak, hogy jól tapadjanak, és ne szálljanak le szállítás vagy gépi feldolgozás közben. 7.
Vérvétel kutyáknál és macskáknál A vérmintát kutyáknál és macskáknál szövetkezeti állatoknál végzik a vena cephalica antebrachii dexternél (jobbkezeseknél), amely az alkar fölött és kissé mediálisan helyezkedik el. A jobb első végtagot egy asszisztens rögzíti és nyújtja hátulról, hogy a véna meghúzódjon. Ez megkönnyíti a megtalálást és megakadályozza a véna elgurulását. Nyugtalan állatoknál vért is lehet venni a hátsó végtag bokája feletti laterális saphena vénából (kutya) vagy mediális vénából (macska). A véna meghúzása érdekében a végtag kinyújtásra kerül, és a véna a térd üregében (kutya) vagy a comb közepén lévő közepes magasságban (macska) torlódik fel. Vérvétel a fejfenékből 10
A jugularis véna, a jugularis véna szintén alkalmas vérvételre. A fejet vagy az orrot egy asszisztens tartja fel és rögzíti, míg a vért szedő személy bal kezével blokkolja a nyaki vénát a mellkas bejáratának szintjén. Sűrű szőrű vagy nyugtalan állatok esetében a szúrás helyét le kell borotválni és gondosan fertőtleníteni, mielőtt a bent lévő katétert elhelyeznék. Vérvétel a nyaki vénából Vérvétel a fejfenék vénájából pillangóval és monovette kúppal 11
VÉR antikoaguláns Vérvétel kis háziállatoktól A véráramlás sebessége kulcsfontosságú a megfelelő mennyiségű vér megszerzéséhez. Ezért ajánlatos nagy lumenű kanülöket (20 G) és megfelelő gyűjtőedényeket használni. Nyulakban és görényekben, mint a kutyákban és macskákban, a vért normál méretű EDTA-val és szérumcsövekkel lehet gyűjteni; tengerimalacokban és csincsillákban csavaros fedéllel ellátott kis mintatartályok vagy kapilláris hatású eldobható edények (pl. Multivette, Microvette, Sarstedt) . Mikrokanulák Kis vénák esetén az új típusú mikrokanulák (mikrokanül, Sarstedt) különösen alkalmasak a kellő vérelvonás támogatására. Mivel a kanülnek nincs kúpja, a vér akkor is optimálisan folyhat le, ha alacsony a vérnyomás. A barázdált fogantyú biztosítja a kanül biztonságos vezetését. Javasoljuk a nagyméretű 21 G mikrokanül (zöld) használatát. 12.
A gyakorlatban a nyulakból, tengerimalacokból, csincsillákból és görényekből vért választanak a laterális saphena vénából, de más szúrási helyek is lehetségesek. Szúrási helyek kis emlősökben Faj Szúrási helyek Nyúl V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, A./V. auricularis lateralis 1 (csak kis mennyiség), fül 2 tengerimalac V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, párna 2 Chinchilla V. jugularis, V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, V. caudali, V. sublingualis 2, 2. betét, 2. fül, vadászgörény, Skunk jugularis véna, laterális saphena véna 1, antebrachialis véna 1, golyó 2, fül 2 Degu jugularis véna, laterális saphena véna 1, sublingualis véna, cefalis véna antebrachii, a hörcsög golyója V. sublingualis 2, a véna saphena lateralis, a vein cephalica, a golyó 2 egér, a patkány V. facial 2, a V. sublingualis, a V. saphena lateralis, a V. cephalica antebrachii, a V. caudalis, a 2 golyó 1 2 vénás katéter esetén kis mennyiségeket csepegtetnek közvetlenül a 13 lyukasztási helyről
Különböző vérképek esetén ajánlatos két vérkenetet elkészíteni és azonnal beküldeni a gyűjtés után. Madarakból és hüllőkből gyakran nehéz megfelelő mennyiségű mintát szerezni. A szolgáltatások specifikációjában megadott mennyiségek az adott vizsgálatok minimális mennyiségét jelentik, de csak az egyes paraméterek vizsgálatára vonatkoznak. Megengedett minták Vérminták madarakból és hüllőkből A madár és a hüllő vérmintái nagyon érzékenyek a hemolízisre és a sejtek szétesésére. Az EDTA-nak hemolitikus hatása van a hüllő vérére. A lítium-heparin tehát a legalkalmasabb antikoagulánsként (lítium-heparin-vér a vérkép és az ólomtartalom meghatározása, a lítium-heparin-plazma a klinikai-kémiai paraméterek és a szerológiai vizsgálatok céljából). Madár a testtömeg 1% -áig Budgerigar (40 g testtömeg) maximum 0,4 ml cockatiel (100 g testtömeg) legfeljebb 1,0 ml nagy papagáj (400 g testtömeg) legfeljebb 4,0 ml hüllő a testtömeg 0,5% -áig, azaz maximum 0,5 ml/100 g testtömeg. 16.
Vérvétel madarakban Madaraknál a vért a szárny vénájából vagy a jobb nyaki vénából veszik. Vérvétel technikája a szárnyas vénából A segítő rögzíti a madarat fekvő helyzetben, és a vizsgáztató egyik kezével az egyik szárnyat oldalra húzza. A könyökrész megnedvesítése után az inakra merőlegesen futó ulnáris véna láthatóvá válik, és a szárnyat tartó kéz hüvelykujjával blokkolható. A vénát a másik kezével átszúrják. A vért szívással szívják le, a csatlakoztatott fecskendővel. A kanül eltávolítása után a lyukasztási területet vas (II) -kloridba áztatott tamponnal enyhén összenyomják. Vérvétel az amazon szárnyi vénájából Általános szabályként a beteget visszaragasztják a ketrecbe, a tamponnal együtt. Az alvadó vér miatt a bőrre tapadt tampon később leesik. 17-én
Vérvétel lovakból Lóféléknél a vénás vért általában a két nyaki vénából (külső nyaki véna) veszik. A vénapunkciót a nyak középső és felső harmadának átmeneténél végezzük, mivel az omohyoideus izom védő helyen helyezkedik el a felületi nyaki vénák és a mélyebb közös carotis között, ami csökkenti az artériás defektus kockázatát. A vénákat megvizsgálják torlódás, vérelvezetés, megnövekedett kerület, gyulladás vagy korábbi károsodás jelei szempontjából. Általános szabály, hogy a haj és a bőr felületes fertőtlenítése elegendő. Ha a szőr nagyon hosszú és vastag (pl. Shetlandi pónik, izlandiak), akkor hasznos lehet a haj nyírása a véna jobb vizualizálása és a szúrás helyének fertőtlenítése érdekében. Alternatív megoldásként vért is lehet venni a fejfenék vénájából, a saphena vénából (különösen csikóknál) vagy a felszíni epigasztrikus vénából. Vérvétel a nyaki vénából 20
Vérvétel a tevefélékből A vért a tevefajok nyaki vénájából is veszik. Ellentétben a legtöbb háziállattal, a nyaki véna és a nyaki artéria az Új Világ tevein a nyak leghosszabb részén fut össze, és csak három-négy centiméterrel választja el őket a mandibuláris szög előtt az omohyoideus izom. Az artéria véletlen szúrása tehát kiterjedt hematoma kialakulásához vezethet. Mivel a tevefélék aktívan képesek a nyak mozgó izmait a véna elé tolni, az izmok behatolása miatt nagyon magas CK-értékek (> 10 000 U/l) lehetségesek. Az értékes szőrminőség miatt a vérmintavételi pont borotválkozása ellenjavallt a tevéknél. Mivel a vénák nagyon gyorsan összeomlanak, vákuumrendszerrel általában nem lehet vért venni. Annak érdekében, hogy a szőrzet ne szennyeződjön vérrel, ajánlott a vétel aspiráció útján (pl. S-Monovette, Sarstedt). Vérvétel az alpakából 21
VÉR antikoaguláns Vérvétel szarvasmarhákból, juhokból és kecskékből A külső nyaki vénát általában szarvasmarhák, juhok és kecskék vérének vételére használják. Könnyen hozzáférhető, és gátlásakor világosan megmutatja magát. Szarvasmarháknál a farok alsó oldalán lévő középső farokvénából is vért lehet venni. Vérkivétel a farokvénából Vérkivétel a nyaki vénából 22
VÉR antikoaguláns Vérkenet előkészítése Miután az első vércseppet egy jól összekevert csőből egy kapillárisral vagy pipettával letörölte a tárgylemez végére, majd helyezze a második tárgylemezt az alkalmazás helye elé, és kissé mozdítsa vissza. A vér egyenletesen oszlik el a tárgylemez szélén a 45 - Tartsa a szöget és vezessen gyorsan és egyenletesen a szemközti keskeny oldalra. A vért a szél mögé húzzák, nem tolják! Ideális egy olyan kenet, amely körülbelül 2/3-a csúszda felületének hosszától, mindkét oldalán szabad szélet hagy, és tiszta zászlóval végződik. Hagyja a kenetet teljesen megszáradni Jelölje meg a szőnyeget a szőnyeg szélén ceruzával vagy vonalkódos címkével (ragaszkodjon a rögzítési pont keskeny oldalához; ne a zászlóhoz) Küldje be a csúszó hüvelybe 26
rossz rossz vonalkód szám vonalkód szám vonalkód szám vonalkód szám vonalkód szám vonalkód szám vonalkód szám vonalkód ideális túl rövid túl hosszú nincs jelző OT félkövér túl keskeny túl széles egyenetlen 27
Az EDTA cső elégtelen elforgatása az eltávolítás után és ezáltal a vér elégtelen keverése az antikoagulánsként hozzáadott EDTA-val szintén alvadékképződéshez vezet (lásd még a vérvétel sorrendjét, 9. o.). fordul elő (megnövekedett vér viszkozitás). A spontán agglutináció és a tekercsképzés megkülönböztetéséhez hasznos a vért háromszor ugyanannyi sóoldattal mosni. Ha az agglutináció továbbra is fennáll, akkor az immun hemolitikus vérszegénység bizonyítottnak tekinthető. Vörösvértest agglutináció Az eritrociták spontán agglutinációját meg kell különböztetni a vér preanalitikus koagulációjától. Ez jelezheti az immun hemolitikus vérszegénységet, amelyben az autoagglutinek (IgG és IgM) jelenléte makroszkóposan látható eritrociták összeomlásához vezethet. Össze lehet keverni az úgynevezett tekercsképzéssel, amely véletlenszerű megállapítás különösen lovaknál és macskáknál, vagy akut gyulladás esetén spontán agglutináció immunohemolitikus anaemia esetén (kutya) 33
Vizeletvizsgálatok A vizeletmintáknak külső szennyeződésektől mentesnek kell lenniük, hogy a felhőzet vagy a színváltozások műtárgyak nélkül értékelhetők legyenek. A mikrobiológiai vizsgálatok kivételével minden vizsgálatot natív vizelettel végeznek. Szükség esetén a mintát fel kell osztani, és stabilizált és natív vizeletet is el kell küldeni az értelmes eredmény érdekében. A szállításhoz csavarozható edények szükségesek. Cystocentesis A cystocentesis a legalkalmasabb módszer a vizelet gyűjtésére kutyákban és macskákban. Ha helyesen hajtják végre, biztonságos és egyszerű eljárás. A személyes tapasztalatoktól és a gyakorlat technikai felszereltségétől függően a cystocentesis ultrahang vagy vak segítségével végezhető el. A szúráshoz kanül (22 G, fekete) és fecskendő (10 ml) szükséges. A szőrzet állapotától függően a szúrás helyét az alkohol felvitele után borotválják, a bőrt fertőtlenítik, vagy a szőrzet elválik. A szúrás helyének aszeptikus előkészítése nem szükséges. 34
Ha lehetséges, a hólyagot szonográfiai ellenőrzés alatt szúrják. Ha a hólyag kellően kitöltött és tapintható, a cystocentesis ultrahangos készülék nélkül is biztonságosan elvégezhető, és a kutyán álló, fekvő vagy oldalsó helyzetben végezhető. Macskáknál a lyukasztás legkönnyebb az oldalsó helyzetben. Az egyik kezével a hólyag rögzítve van, a másik kezével a kanült és a hozzá csatlakoztatott fecskendőt a hasüregbe vezeti a hólyag ventrolaterális területére, és leszívja. Katéterezés Lovakban és szarvasmarhákban vizeletkatétert használnak, ha spontán ürített vizelet nem gyűjthető össze. Kicsi állatok esetében a vizeletkatétert elsősorban a húgycső átjárhatóságának ellenőrzésére kell használni, különben ennek az eltávolítási módnak a hátrányai dominálnak (a nyálkahártya traumája, a csírák bejuttatásának veszélye). Ultrahangvezérlés cystocentesis 35
Előnyök és hátrányok elérése Laboratóriumi vizsgálatok spontán közvetlen gyűjtés - nem steril vizelet státusz 1 gén (pl. Vizelet üledék szennyeződésével 1 kanál húgycső, előkészítmény, klinikai-kémiai vagy vaszkuláris) hüvelyi és környezeti vizsgálatok (pl. UP/C), 2 az immunológiai vizsgálatokhoz nem alkalmas mikrobiológiai szemétdoboz (pl. UCC) 1,2 (katéter, gyöngyszem) katéter húgyhólyag - alacsony szennyezettség - vizelet állapota1 katéter veszély vizelet üledék1 húgycső sérülése/klinikai-kémiai és hólyag (szennyeződés immunológiai vizsgálatok 1,2 vér) mikrobiológiai vizsgálat 2 csírát tolnak a hólyagba kívülről cysto-transcutan tiszta húgyhólyag vizelet mikrobiológiai vizsgálat 2 bármilyen szennyeződés központi szúrása az összes többi vizsgálattal (lásd fent) hólyagvér 1 = natív vizelet (steril, bevonat nélküli cső ) 2 = stabilizált vizelet (speciális cső bórsavval) A kívánt vizsgálatoktól függően Ha szükséges, ossza meg a vizeletet, és küldje el a natív és a stabilizált vizeletet is. 37
A gyűjtést az antibiotikum terápia megkezdése előtt kell elvégezni. Ha nem lehet közvetlenül a laboratóriumba küldeni a mintákat, a mintákat 1-2 napig hűtőszekrényben tárolhatjuk kulturális bakteriológiai vizsgálatok céljából. Ez vonatkozik a tej- és vizeletmintákra csövekben, stabilizátor hozzáadásával. Mikrobiológiai vizsgálati anyag A minta anyagának helyes kiválasztása elengedhetetlen a bakteriológiai vizsgálat eredményéhez. A magas szintű tájékoztató érték elérése érdekében az anyagot úgy kell megszerezni és szállítani, hogy az eredetileg jelen lévő kórokozók a szállítás során képesek legyenek reprodukálhatóvá vagy detektálhatóvá válni. Anaerobok és különösen érzékeny baktériumok, mint pl B. β-hemolitikus streptococcusok vagy Haemophilus spp., Nem tárolható, hanem azonnal a laboratóriumba kell vinni. Elsősorban a steril mintaanyagokat (vérkultúra, szinoviák stb.) Is a lehető leggyorsabban meg kell vizsgálni, mivel fertőzés esetén a csírák számának vagy a csíra spektrumának legkisebb változása helytelen eredményekhez vezethet. 38
A vizsgálati anyag mikrobiológiai feldolgozásához és értékeléséhez a személyazonosság biztosítása mellett feltétlenül szükséges a következő információ: Fontos előzetes jelentés időpontja/dátuma A vizsgálati anyag eredete (pl. Méhnyak kenet, mellhártya szúrás) Vizsgálati sorrend és kérdés (pl. Patogén csírák és/vagy speciális kimutatás) Csírák) Tamponok A tampon eltávolításakor ügyeljen arra, hogy az ne érintkezzen nem steril tárgyakkal vagy baktériumokkal megtelepedett nyálkahártyákkal stb. A baktériumok által fiziológiailag gyarmatosított területekről származó bőrkeneteket (bőr/szájüreg/orr) csak konkrét kérdésekre ajánljuk. Orrvatták esetén az orrtükör tisztítása után a lehető legmélyebb eltávolítást kell biztosítani. A lehető legjobb vizsgálati eredmények érdekében a törlőkendőt a kiszerelés után azonnal szállítóközegbe kell helyezni. Előzetes diagnózis/klinikai információk (pl. Betegség kialakulása, klinikai tünetek, külföldön tartózkodás) Antibiotikus előkezelés Az előzetes vizsgálatok részletei, pl. B. MRSA-t már észlelték. Vastag tampon vékony tampon 39
Hüvelyi citológia A szukában lévő hüvelyi kenet citológiai képe lehetővé teszi a ciklus állapotának meghatározását, és információt nyújt a kóros folyamatokról. Ebből a célból, ha lehetséges a tükör ellenőrzése alatt, a koponya-, a hátsó vagy az oldalsó hüvelyboltozatból kenetet kapunk, amelyet a tárgylemezre gördítünk, majd a mintát levegőn szárítjuk. A sejtek törékenysége miatt a ki nem csíkozott tamponok nem értékelhetők. Kihúzási technika a hüvelyi kenethez 45
SZÁLLÍTÁS Szállítás/minta szállítása A csövek felcímkézése és a vizsgálati űrlap kitöltése után a mintákat szállításra csomagoljuk. A SYNLAB.vet többnyire ingyenesen biztosítja a szükséges anyagokat. A csomagolásnak megfelelő védőhatással kell rendelkeznie a szállítás során fellépő elkerülhetetlen szállítási terhelések ellen (különösen nem szakadhat el és nem repedhet fel), és nem okozhat fennakadásokat a feldolgozási folyamatban. Postai és országos futárszolgálatok esetén mindig többrészes csomagolást kell használni, amely a tényleges mintatárolóból, egy védő- vagy szállítóhüvelyből és a külső csomagolásból áll. Ha folyékony anyagot küldünk, abszorbens réteget (abszorbens betét) kell elhelyezni az elsődleges és a másodlagos edény között. A szállítási csomagolás 3 komponensből áll: 1.) maga a mintacső (elsődleges edény) 2.) szivárgásmentes másodlagos edény Karton doboz helyett PE szállító boríték is használható. A mentesített mintaanyag címkéjén (lásd alább) a mentesített állatgyógyászati minta szerepel. A B kategóriába tartozó anyagokat az ENSZ 3373 veszélyes áruk címkével kell ellátni. 3.) a külső csomagolás 48