Profil ALEX (allergia Explorer) - IgE - Synevo

Általános információ

profil

IgE által közvetített allergia és in vitro allergológiai tesztek

Az IgE által közvetített allergiás betegségek előfordulása drámaian növekszik, mind a fejlett, mind a fejlődő országokban. Sok gyermek súlyos ételallergiában és anafilaxiában szenved, és az asztma és az allergiás nátha által érintett serdülők és fiatal felnőttek nagy száma csökkent a napi tevékenységekben. Ezen okok miatt javítani kell az allergiás betegségekkel küzdő betegek kezelését 1 .

Az allergén kivonatok alkalmazásával kapcsolatos másik probléma az olyan kivonatokban található glikoproteinek, amelyek kölcsönhatásba léphetnek az IgE-vel a betegek szérumában, ami hamis pozitív eredményekhez vezet az allergén-specifikus IgE-meghatározásokban. A fukóz és/vagy xilóz epitópjainak jelenlétével jellemzett növények és rovarok által termelt glikánokat keresztreaktív szénhidrát-determinánsoknak (CCD) nevezik. A növény/rovar CCD-re érzékeny betegek százalékos arányát 23% -ra becsülték. Ezek az anti-CCD IgE-ben szenvedő betegek keresztreaktivitást mutatnak az összes CCD epitópot tartalmazó növényre, ami főleg allergén kivonatokon alapuló specifikus IgE meghatározásokban nagyszámú pozitív eredményt eredményez, utánozva a többszörös érzékenységet. Másrészt az anti-CCD antitestekről beszámoltak, hogy alacsony klinikai jelentőségűek. Ezért elengedhetetlen a CCD 1 in vitro allergiás tesztjének interferenciájának csökkentése; .

Az ALEX teszt jellemzői

Az ALEX egy in vitro diagnosztikai eszköz az allergiás szenzibilizációhoz, amelynek segítségével egyszerre meghatározható a 282 allergén elleni specifikus IgE kiterjesztett profilja (152 „integrált” allergén kivonat és 125 molekuláris komponens). Ez a teszt az inhalációs, élelmiszer-, latex- és Hymenoptera méregallergének döntő többségére kiterjed. Olyan "makroszínű" technológiát alkalmaznak, amelyben az allergének foltok formájában oszlanak el egy chipben lévő nitrocellulóz membránon. A teszt meghatározza mennyiségi A specifikus IgE mind az allergén kivonatokra, mind a releváns molekuláris komponensekre (specifikus és keresztreaktivitás) irányul. Az allergén kivonatok és a molekuláris komponensek kombinációja ugyanabban a tesztben lehetővé teszi az IgE-szenzibilizáció jellemzését, meghatározva, hogy ez egy "igazi" reakció vagy keresztreakció-e. A CCD-inhibitorok alkalmazása az első inkubációs fázisban csökkenti a CCD által kifejtett interferenciát, növelve a teszt specificitását. Ezenkívül meghatározzuk az összes IgE 5; 6 értéket is .

Egy nemrégiben készült tanulmány szerint az ALEX jó összefüggést mutat az ImmunoCAP ISAC teszttel, amely a molekuláris allergológiában a legszélesebb körben alkalmazott "mikroarray" teszt 5. .

Javaslatok az ALEX teszt elvégzéséhez - allergiás betegségek diagnózisa, anamnesztikus adatokkal és klinikai vizsgálattal együtt.

Molekuláris allergén komponensek alkalmazásával a teszt fontos információkat nyújt a következőkről:

  • a specifikus immunterápia jelzése, különösen a légúti allergiák és a rovarmérgek által okozott allergiák esetében;
  • az ételekkel szembeni súlyos allergiás reakciók kockázata (pl. Ara h 1,2,3 vagy 6 tároló fehérje súlyos allergiás reakciókat okoz az anafilaxiás sokk hatására, míg az Ara h 8 és PR-10 fehérjék nem vesznek részt súlyos reakciókban, a fehérje mindkét csoportja pozitív eredményt ad, ha földimogyoró kivonatokkal teszteljük);
  • keresztreaktivitás (keresztreaktivitás).

Ez a teszt különösen előnyös a poliszenzibilizált betegeknél és az orális allergiás szindrómában szenvedőknél 5; 6 .

Betegképzés - à jeun (éhgyomorra) vagy étkezés utáni (étkezés után) 6 .

Begyűjtött minta - vénás vér 6 .

Betakarítási konténer Antikoaguláns nélküli vakutainer szétválasztó géllel/anélkül 6 .

Betakarítás után szükséges feldolgozás - centrifugálással különítsük el a szérumot 6 .

A minta mennyisége - legalább 1 ml ser 6 .

Az elutasítás okai megpróbálni - hemolizált szérum 6 .

A minta stabilitása - az elválasztott szérum 7 napig stabil, 2-8 ° C-on; 6 hónap - 20 ° C-on .

Módszer - Multiplex ELISA.

A szilárd fázis az a nitrocellulóz membrán, amelyben az allergének eloszlanak (lásd az alábbi táblázatot az alkalmazott allergének felsorolásával), és amely egy chipben található. Az első fázisban a membránt inkubáljuk a beteg hígított szérumával, az alkalmazott hígítószer CCD-gátlót tartalmaz. 2 órás inkubálás után a zsetonokat alaposan mossuk, majd a következő lépésben 30 percig inkubáljuk lúgos foszfatázzal jelölt humán anti-IgE antitesttel. Egy új mosási lépés után hozzáadjuk az enzimatikus szubsztrátot. A membránok megszáradása után az egyes allergén foltoknál kapott színintenzitást digitális kamerával mérjük. A specifikus IgE-khez kapott értékeket a makroszintű tesztelésre szánt szoftver segítségével közöljük. A teljes IgE szintet is meghatározzuk 6 .

A specifikus IgE eredményeinek jelentése

A laboratórium által a beteg számára kiadott jelentés a következőket tartalmazza:

  • az összes tesztelt allergéncsoport, az allergének típusai (kivonatok vagy molekuláris komponensek) és az egyedi specifikus IgE-értékek (kUA/L-ben kifejezve);
  • teljes IgE-szint (kUA/L-ben kifejezve);
  • a detektált szenzibilizációk összefoglalása, amelyekben az allergéncsoportokat az azonosított legmagasabb érzékenységi osztálynak megfelelő színnel jelöljük 6 .