TSH ELISA
.D D S. DIAGNOSIS Str. Vatra Luminoasa, sz. 45. szekta. 2, Bukarest telefon: 0213440771, fax: 0214104009, e-mail: [email protected] Felhasználói kézikönyv TSH ELISA A tirotropin (TSH) közvetlen immunenzimatikus meghatározása humán szérumban Variant 2.2 96 LOT tesztek TSH018 var. 2.2 1
TARTALOMJEGYZÉK Cél 3 1 Klinikai jelentőség 3 2 Alapelv 4 3 A készlet alkatrészei 4 4 A szükséges anyagok, amelyek nem szerepelnek a készletben 4 5 Reagenskészítés 5 6 Tárolási feltételek 5 7 Biológiai teszt 5 8 Óvintézkedések 5 9 Munkafolyamat 6 10 Minőség-ellenőrzés 8 11 8 12 Példa a standard görbére 8 13 Várható értékek 9 14 Teljesítmény és jellemzők 9 15 Hulladékkezelés 10 16 Irodalomjegyzék 11 17 Elemzési séma 12 2
Javasoljuk, hogy minden laboratórium állítsa be a saját normális értéktartományát, a populációtól függően. 14. TELJESÍTMÉNY ÉS JELLEMZŐK a) Pontosság sorozaton belüli variáció Meghatározva a TSH koncentrációjának ismétléses (20x) mérésével, 2 különböző kontrollszintű kontrollszérum felhasználásával egyetlen elemzésben. Kontroll n Átlagos koncentráció (miu/ml) CV (%) 1 20 1,96 5,46 2 20 10,59 6,8 Sorozatok közötti variáció Meghatározva a TSH koncentrációjának ismétlésével (10x) történő mérésével 2 kontrollszérummal és három különböző adag reagens, naponta egyszer 20 napig tesztelve. Kontroll n Átlagos koncentráció (ml/ml) CV% 1 40 2,21 4,97 2 40 10,02 5,18 b) Érzékenység. Az érzékenység meghatározása a nulla (S0) standard alkalmazásával történt az ismétlésben (20X) ugyanazon elemzés során. A minimális kimutatott TSH-koncentráció 0,01 μl/ml volt. c) Az antitestek specifitása (keresztreaktivitás). A tirotropin antitestek keresztreaktivitását az alábbi táblázat mutatja:
Anyag Keresztreaktivitás,% TSH 100% hcg 0% hgh 0% LH 0,021% FSH 0,014% d) Korreláció más módszerekkel A kitet Roche Cobas TSH-val hasonlítottuk össze 121 beteg mintáinak felhasználásával. A korrelációt lineáris regressziós módszerrel hajtottuk végre: y = 0,094 + 1,0138x, 0,991 korrelációs együtthatóval. 15. HULLADÉK KEZELÉS A reagenseket és a hulladékokat a hatályos jogszabályi előírásoknak megfelelően kell felhasználni és a laboratóriumban ártalmatlanítani. 16. BIBLIOGRÁFIA 1. Dinu V., Trutia E., Cristea-Popa E., Popescu A., Medical Biochemistry Small treatise, Ed. Medicala, 1996. 2. Laboratóriumi elemzések és egyéb diagnosztikai feltárások, Ed. MedicArt, 2007. 3. Cucuianu, M., Crisnic I., Plesca-Manea L., Klinikai biokémia, Ed. Dacia, 1998. 11
TSH-ELEMZÉSI Séma A teszt előkészítése Reagensek és minták előkészítése a leírt eljárás szerint. A kutak számának kiválasztása és behelyezése a speciálisan kialakított tartóba. Munkamenet Standard kontrollminta 0-5 Standard 50 µl - - 0-5 Kontroll - 50 µl - Minta - - 50 µl Konjugátum oldat 50 µl 50 µl 50 µl Óvatosan rázza a lemezt 30 másodpercig a keveréshez. Fedje le a kutakat fóliával. Inkubálja 60 percig. 37 ° C-on ötször mossuk 350 μl mosóoldattal, amelyet az 5.2. Standard kontrollminta 0-5 szubsztrátum 100 100l 100 µl 100 µl TMB Fedje le a lyukakat. Inkubáljuk 20 percig szobahőmérsékleten, 22-28 ° C-on, sötétben. Standard kontrollminta 0-5 Megállapító oldat 50 50l 50 µl 50 µl Óvatosan rázza a lemezt 30 másodpercig, hogy az oldatok teljesen elkeveredjenek. Mérje le az oldat abszorbanciáját a mérőhelyeken 450 nm-en 620-630 nm referenciaérték mellett, legfeljebb 15 perc alatt, a reakció leállítása után, mikrolemezes spektrofotométerrel. 12.