Tuberkulózis gyermekeknél új diagnosztikai vérvizsgálatok
ASZTAL 1
Célzott tuberkulózis (TB) szűrés: indikációk a tuberkulin intradermális reakcióhoz gyermekeknél
| Az aktív tuberkulózis ismert eseteinek kapcsolatai |
| Aktív TBC gyanújú gyermekek |
| A fertőzés kialakulásának ismert kockázati tényezőivel rendelkező gyermekek betegséggé válhatnak |
| Gyermekek, akik legalább három hónapig olyan területen utaznak vagy élnek, ahol magas a TBC előfordulása, különösen, ha a látogatás célja a helyi lakossággal való kapcsolatfelvétel. |
| Gyerekek, akik kevesebb mint két év alatt érkeztek Kanadába olyan országból, ahol magas a TBC előfordulása |
A 9. referenciától adaptálva
Előrehaladás a tuberkulózis diagnosztizálásában: GAMMA INTERFERON TESZT
A gamma-interferon detektálási tesztek (TDIG) a Mycobacterium tuberculosisra specifikus antigénekre adott válaszként szenzibilizált limfociták révén mérik az gamma interferon in vitro termelését. Az antigéneket kódoló gének az M tuberculosisban vannak jelen, de a BCG törzsekben vagy az MNT több környezeti törzsében nem (12–14). Ezért ezek a tesztek sokkal specifikusabbak (kevesebb hamis pozitív eredményt okoznak), mint az IDR. Az értelmezés idején is kevésbé szubjektívek, gyorsan kezelhetők, és csak a folyamat befejezéséhez szükséges látogatás. Két, ezen M tuberculosis-specifikus antigént használó kereskedelmi TDIG jóváhagyott Kanadában: a QuantiFERON-TB Gold In-Tube teszt (QFT-G-IT; Cellestis Inc., Ausztrália) és a T.SPOT - TB teszt (Oxford Immunotec, United States) Királyság). Ezen tesztek rövid leírását a 2. táblázat tartalmazza. Kanadában a legtöbb központban vagy referencialaboratóriumban még nem állnak rendelkezésre széles körben. Mindkettőt az Egyesült Államok Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hivatala is jóváhagyta (15,16). Az ELISpot teszt, bár hasonló a T.SPOT teszthez, egy házi teszt, amelyet nem forgalmaznak, de a TDIG tanulmányaiban gyakran említik.
2. TÁBLÁZAT
Gamma interferon tesztelés
| A QuantiFeRON-TB Gold In-Tube assay (Cellestis Inc., Ausztrália) | |
| Amit mér | Teljes vér ELISA, amely a gamma-interferon koncentrációját méri a vérben az ESAT-6, CFP-10 és TB7.7 specifikus tuberkulózis-antigénekkel való inkubálás után. A teszt minőségének biztosítása érdekében mérjük a mitogén stimulációra és a kontrollra adott választ is |
| Gyűjtési és feldolgozási követelmények | 3 ml vér gyűjtését igényli, csövenként 1 ml sebességgel (antigén, mitogén, nulla érték). A mintákat 12 órán belül fel kell dolgozni. Ezeket a csöveket 16–24 órán át inkubáljuk, majd az előállított gamma-interferon mennyiségét ELISA-val mérjük |
| Eredmények értelmezése | Az eredményeket pozitív (legalább 0,35 NE/ml gamma-interferon mért, és több mint 50% -kal magasabb a kontrollnál), negatív (0,35 NE/ml vagy kevesebb mért gamma-interferon) vagy nem ismert (kevesebb, mint 0,35 NE/m ml mért gamma interferon és szuboptimális mitogén válasz kevesebb, mint 0,5 NE/ml, vagy 0,7 NE/ml mért gamma interferon vagy kevesebb, mint a kontroll válasz/nulla érték) |
| A T.SPOT - TB teszt (Oxford Immunotec, Egyesült Királyság) | |
| Amit mér | Ex vivo enzim immunvizsgálat a gamma-interferonokat termelő T-limfociták számának felmérésére a Mycobacterium tuberculosisra specifikus antigéneknek való kitettség után. A betegtől izolált perifériás mononukleáris vérsejteket mikroliterbe, A csoportba (ESAT-6), B csoportba (CFP-10), nulla kontrollba vagy mitogén lyukakba helyezzük, majd inkubáljuk, hogy elősegítsük bármely szenzibilizált T limfocita stimulálását. Ezután megszámoljuk és meghatározzuk a gamma-interferont termelő T-limfociták számát |
| Gyűjtési és feldolgozási követelmények | Szükséges 8 ml vér összegyűjtése 10 év feletti gyermekektől, 4 ml 2 és 10 év közötti gyermekek és 2 ml 2 év alatti gyermekek vérének összegyűjtése (és immunhiányos betegeknél a mennyiséget meg kell duplázni). A mintákat ugyanazon a napon kell feldolgozni (a begyűjtéstől számított 8 órán belül) |
| Eredmények értelmezése | Az eredményeket a foltképző T-sejtek (LTT) számaként mutatjuk be, és pozitív, negatív, határvonalakként vagy nem ismertként osztályozzuk. Az eredmény pozitívnak minősül, ha az A vagy B csoport legalább 8 LTT-t tartalmaz, mint a negatív kontroll, negatívnak, ha az A vagy B csoport 4 LTT-t tartalmaz, vagy kevesebb, mint a negatív kontroll, és cut-off-nak, ha az A vagy B csoport közötti magasabb eredmény A B 5,6 vagy 7 LTT-t tartalmaz, mint a negatív kontroll. A határérték-teszt egyértelműnek tekintendő, és meg kell ismételni. |
| A mitogén pozitív kontrollra adott kielégítő reakció (20 LTT-nél nagyobb) jelenléte demonstrálja a T-sejt működését és validálja a teszt eredményeit. Határozatlan eredményt jelentenek be, ha az erős háttérzaj megakadályozza az értelmezést (több mint 10 LTT a null- vagy kontrollkútban), vagy kevesebb, mint 20 LTT-t észlelnek a mitogén pozitív kontrollkutakban | |
A 15. és 16. hivatkozásból lefordítva és adaptálva
AZ IDDD SZEREPE GYERMEKEKBEN: AMIKOR FELHASZNÁLHATÓ?
Az aktív tbc-ben szenvedő gyermekeknél is változó érzékenység van, 50% és 92% között a QFT-G-IT tesztnél, 81% és 93% között az ELISpot tesztnél és 40% és 83% között a T.SPOT-nál - TB teszt (18–20,27–29). Úgy tűnik, hogy a szenzitivitásban mutatott nagy különbség tükrözi e tesztek különböző hozamát életkor és környezet (endémiás vagy nem endémiás) függvényében. Nagyon fiatal, tuberkulózisban szenvedő gyermekeknél a teszt érzéketlen lehet, de vannak olyan esetek, amikor az IDR negatív, a TDIG pedig pozitív (29). Így a két teszt kombinációja növelheti a látens vagy aktív tuberkulózis diagnózisának érzékenységét olyan esetekben, amikor az IDR nem megbízható, például aktív vagy disszeminált TBC és látens betegség jelenlétében nagyon fiatal csecsemőknél és immunhiányos betegeknél.