Tumor nekrózis faktor (tnf alfa) Synevo Moldova

Informtii. Általános és ajánlások a TNF meghatározásához-α

synevo

A TNF (tumor nekrózis faktor) egy gyulladáscsökkentő citokin, amelynek neve abból a képességből ered, hogy elpusztítja a tumorsejteket és vérzéses nekrózist vált ki az egerekbe átültetett tumorokban 5 .

A TNF-α-t (casectin) és a TNF-β-t (limfotoxin) kezdetben makrofágok és limfociták által termelt citotoxikus tényezőként írták le; Később kiderült, hogy a TNF-a és a TNF-β két olyan fehérje, amely homológiát mutat a 3; 5 aminosavszekvenciák 34% -ával. Mindkét mediátor ugyanazon receptorokon keresztül hat a célsejtekre, és ezért hasonló, de nem azonos biológiai hatásuk van.

A TNF-α génje a 6. kromoszómán található. Denaturáció körülményei között a TNF-α egy 17 kDa fehérje, nem glikozilezett. A TNF-a biológiailag aktív formája a trimer. Ezen oldható formán kívül van még egy membránhoz kötött forma (28 kDa), amely a TNF-α-termelő sejtek felszínén helyezkedik el, és amely az oldható forma pooljául szolgál, amelyet a proteolitikus hasítás hoz létre. .

A TNF-α-t nemcsak makrofágok és monociták, hanem limfociták, hízósejtek, neutrofilek, keratinociták, asztrociták, mikroglia, simaizomsejtek és néhány daganatos sejtvonal is termeli 5. Nagy mennyiségű TNF szabadul fel a makrofágok, a CD4 + T limfociták és a természetes gyilkos (NK) sejtek lipopoliszacharidokkal, baktériumtermékekkel és interleukinnal való érintkezésekor 1 3 .

A TNF-α közvetlenül két különálló felületi receptoron keresztül hat, úgynevezett TNFR I és TNFR II, különböző molekulatömegű 3, 4, 5. Ezek a receptorok az eritrociták kivételével minden sejttípuson azonosíthatók. Ezeknek a receptoroknak a részeit proteázok hasítják, és oldható receptorokat képezve eljutnak az extracelluláris környezetbe; a TNF-α endogén inhibitoraként hatnak, és így szabályozzák az extracelluláris TNF-α 4 szintjét .

A TNF-a receptorhoz való kötődése konformációs változásokat okoz a receptor szerkezetében, ami a sejtproliferációban, a gyulladásos válaszban és a sejtek apoptózisában szerepet játszó más fehérjék transzkripciójának kaszkád-aktivációjához vezet. A TNF-α helyi parakrin hatással bírhat (a TNF koncentrációjának helyi növekedése a gyulladás kardinális jeleit okozhatja: bőrpír, fájdalom, hő és duzzanat), vagy távolról is hat, mint az endokrin hormonok Receptorainak a legtöbb szövetben való jelenléte miatt a TNF-α sokféle biológiai hatást fejt ki:

  • citolitikus és citosztatikus hatások a tumorsejtekre;
  • kemotaktikus hatás a neutrofilekre 3;
  • növeli az endoteliális sejtek permeabilitását a gyulladásos régióban; nemcsak az immunsejtek felhalmozódását okozzák, hanem hatással vannak az alvadási folyamatra is;
  • az izomsejtekben és az adipocitákban különböző metabolikus folyamatokat aktivál, hogy biztosítsa a gyulladásos reakcióhoz szükséges energiát 1;
  • a makrofágok szintjén serkenti a fagocitózist és a prosztaglandin E2 termelését;
  • más szövetekben nő az inzulinrezisztencia;
  • aktiválja az oszteoklasztokat, így serkenti a csontfelszívódást;
  • a fibroblasztok növekedési tényezője és stimulálja a kollagenáz szintézist;
  • fokozza a T-limfociták szaporodását az interleukin 2 3 -al történő stimulálás után;
  • étvágytalanságot és lázat okoz, mint endogén pirogén 1;
  • felelős a rosszindulatú folyamatokkal és a legtöbb parazita fertőzéssel járó cachexia szindrómáért 5 .

A szérum TNF-α meghatározása a szepszishez, traumához és szívelégtelenséghez társuló szisztémás gyulladásos válasz (SIRS) markere. Néhány tanulmány kimutatta a cerebrospinalis folyadékban a TNF-α koncentráció összefüggését a sclerosis multiplex aktivitásának mértékével; másrészt a TNF-α meghatározása hasznos lehet a bakteriális agyhártyagyulladás és az agyhártyagyulladás egyéb okainak megkülönböztetésében 1 .

Állatkísérletek kimutatták, hogy a TNF-α részt vesz a reumás ízületi gyulladás és a gyulladásos bélbetegségek patogenezisében, az előgyulladásos hatása miatt, az endothel sejtek aktiválásával és a neutrofil kemotaxis kiváltásával. Emiatt ezen állapotok kezelése magában foglalja a TNF-α inhibitorokat is: vagy anti-TNF-α monoklonális antitesteket (infliximab, adalimubab), vagy antitest-receptor fúziós fehérjéket, illetve TNFRII-IgG1 (etanercept) 5 .

A TNF-α szint az immunrendellenességek diagnosztizálásában és a kezelések monitorozásában csak a kiegészítő klinikai és paraklinikai adatokkal korrelálva használható 2 .

Betegképzés - éhgyomorra (éhgyomorra) vagy étkezés után 2 .

Begyűjtött minta - vér jön 2 .

Betakarítási konténer - vakutainer antikoaguláns nélkül, szétválasztó géllel/anélkül 2 .

Betakarított mennyiség - legalább 0,5 ml ser 2 .

A bizonyíték elutasításának okai - intenzíven hemolizált, sárgított, lipémiás vagy baktériummal szennyezett minta; a laboratóriumba nem érkezett minták fagyasztva 2 .

Betakarítás után szükséges feldolgozás - a szérumot a túró teljes képződése után a lehető leghamarabb centrifugálással elválasztjuk, és a mintát azonnal -20 ° C-on lefagyasztjuk; a laboratóriumi pontokon kívül gyűjtött mintákat a fagyasztott mintákra szánt edénybe 2 szállítják .

Tesztstabilitás - a szérum 1 hónapig stabil -20 ° C-on; ne olvassa le/ne fagyassza újra 2 .

Módszer - EIA 2 enzim immunvizsgálat .

Referenciaértékek 1 - 2 .

Az eredmények értelmezése

A megnövekedett TNF-α szinteket szepszis, trauma, autoimmun és krónikus gyulladásos betegségek (rheumatoid arthritis, spondylitis ankylopoetica, Crohn-kór, pikkelysömör), fertőző betegségek és graft kilökődés esetén rögzítik 2 .

1. Hans D. Volk, Gernot Keyser, Gerd R. Burmester. Citokinek és citokinreceptorok. A klinikai laboratóriumi diagnosztikában - a klinikai laboratóriumi eredmények felhasználása és értékelése. Lothar Thomas. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main, Németország, 1 szerk. 1998, 764-772.

2. Synevo Laboratórium. Az alkalmazott munkatechnika konkrét hivatkozásai 2010. Ref

3. Amerikai Laboratory Corporation. Szolgáltatások katalógusa és Értelmező útmutató. Tumor nekrózis faktor-α. www.labcorp.com 2010. Ref. típus: Internetes kommunikáció.

4. Magda Fekete. Gyulladás. In Essentials in Reumatology. Amaltea Kiadó, 2007, 56.

5. Richard A. McPetersen, Matthew R. Pincus. Immunológia és immunopatológia. Henry klinikai diagnózisában és kezelésében laboratóriumi módszerekkel - Sauders Elsevier 21st-Ed 2007, 867.