A recto-anális nyálkahártyához kapcsolódó limfoid szövetek genotipizálása és elemzése a kimutatására
A krónikus pazarló betegség (CWD) megerősítést nyer, amikor kimutatják a CWD prionját az agyszövetben vagy a nyirokszövetben. A szarvasfélék tulajdonosai harmadik fél laboratóriumait felkérhetik a végbél anális nyálkahártyájához kapcsolódó nyirokszövetek elemzésére és/vagy a szarvasfélék genotipizálására, amely lehetővé teszi a potenciálisan fertőzött szarvasfélék kimutatását és ezáltal az irányítást.
Mint minden CWD-vizsgálathoz, a recto-anális nyálkahártyához társuló limfoid szövet elemzése is korlátozott információt szolgáltat. Az alábbiakban felsoroljuk az e szövetek elemzésével és a genotipizálással kapcsolatban gyakran feltett kérdéseket; segíthet a tenyésztőknek abban, hogy megállapítsák, be akarják-e integrálni ezeket a teszteket az állományuk kezelésébe.
Mi a recto-anális nyálkahártyához kapcsolódó nyirokszövetek elemzése?
A végbél-végbél nyálkahártyájához kapcsolódó nyirokszövet elemzése magában foglalja a nyirokszövet kis sávjának biopsziáját, amely az élő szarvas végbélnyílásán belül helyezkedik el. Ez a szövetcsík limfoid tüszőket tartalmaz, amelyekben a CWD-t okozó prion jelen lehet, ha a méhnyaknak van ilyen betegsége. Ezután a szövetet rögzítik és jelzett anti-MDC antitestekkel festik, és egy állatorvos-patológus megvizsgálja a nyiroksejteket, hogy nem festődtek-e. Ezt a tesztet immunhisztokémiának (IHC) nevezik. Legalább hat lymphoid tüszőnek láthatónak kell lennie ahhoz, hogy az eredmények értelmesek legyenek.
Mi a genotipizálás?
A genotipizálást DNS-elemzésnek is nevezik. Ez egy eljárás, amelynek során meghatározzuk az állat genetikai összetételét egy DNS-szekvencia vizsgálatával. Az állatok CWD-re való hajlamának genotipizálásakor a DNS-elemzés meghatározza a normál sejtes prionfehérjét kódoló gén genetikai variációját. A CWD lefolyása egy állatban attól függhet, hogy a normális fehérjét kódoló gén mennyire képes ellenállni a CWD-t okozó kóros formában történő változásnak.
Hogyan befolyásolja a genotípus a hajlamot a CWD-re?
Kutatások kimutatták, hogy a genetikai variációk nem okoznak rezisztenciát a CWD ellen, de befolyásolhatják, hogy a betegség milyen gyorsan halad előre, amikor az állat fertőzött. A CWD-re fogékony genotípusú állatoknál az inkubációs periódus rövid, és a klinikai tünetek gyorsan haladnak. Az őzek tulajdonosai felhasználhatják ezeket az információkat állományuk feltöltésekor vagy selejtezésénél.
Hogyan befolyásolják a cervid fajok és a genotípus a recto-anális nyálkahártyához kapcsolódó lymphoid szöveti elemzés eredményeit?
A fertőzés ideje és a CWD-t okozó prion megjelenése között a nyirokszövetekben eltelt idő a méhfélék fajtájától és genotípusától függően változik. Például néhány olyan jávorszarvas agyvizsgálata, amelyek még nem mutatnak klinikai tüneteket, pozitív eredményeket mutatnak, de a retro-garat nyirokcsomókban nincs kimutatható koncentráció a CWD-vel összefüggő prionokban. Ilyen helyzetben a végbél-végbél nyálkahártyájához kapcsolódó nyirokszövet elemzése hamis negatív eredményt adhat. A 132LL gént hordozó jávorszarvasnak tekintik a leghosszabb inkubációs periódust. Így egy állat sokáig megfertőződhet, mielőtt a prion kimutatható lenne a nyirokszövetben, ami szintén hamis negatív eredményt produkálhat a végbél anális nyálkahártyájához kapcsolódó limfoid szövet elemzésekor.
A fehérfarkú szarvasoknál azonban a CWD-t okozó prionok az agyi limfoid szövetekben (például a retropharyngealis nyirokcsomóban) felhalmozódnak, mielőtt az agyban kimutatnák őket. A 96GG gént hordozó fehérfarkú szarvasok azok, amelyekben a betegség a fertőzés után jelentkezik legkorábban; a prionok tehát a fertőzés után hamarosan kimutathatók a nyirokszövetben. Az ezzel a genotípussal fertőzött szarvasban a recto-anális nyálkahártyához társuló limfoid szövet elemzése pozitív eredményt adhat.