A Táplálkozástudományi Intézettől - PDF ingyenes letöltés

A Táplálkozástudományi Intézettől A túlzott E-vitamin bevitel hatása a különféle diétás zsírokkal rendelkező vörösvértestek antioxidáns státuszára és hemolízis érzékenységére a minta állati patkányon A Martin Luther Egyetem Mezőgazdasági Kar Halle-Wittenberg (dékán: Prof. Dr. habil. W. Merbach) disszertációként a táplálkozástudományok doktorának (Dr. troph.) Tudományos fokozatának megszerzésére. Előterjesztő: Diploma trophologist, született: 1976. március 7., Diana Flader, Nordhausen. Recenzens: Prof. habil. K. Eder PD Dr. habil. M. Brandsch Prof. Dr. habil. G. Flachowsky Defence: 2002.12.9., Halle/Saale, 2002, urna: nbn: de: gbv: 3-000004327 [http://nbn-resolving.de/urn/resolver.pl?urn=nbn%3ade%3agbv%3a3 -000004327]

intézettől

Táblázatok és ábrák VII. Táblázat 32. táblázat: A máj foszfatidilkolin-frakciójának 60 zsírsavösszetétele az első kísérletben 33. táblázat: Az eritrocita membrán zsírsavösszetétele 62 ábra szám címoldal 1. ábra kis sűrűségű lipoproteinek oxidációjának kinetikája 234 nm-en 19

Táblázatok és VIII. Ábrák Rövidítések listája AIN aqua dest. ß-HMG-Co A reduktáz BSA BSTFA Cu-Zn-SOD DGE DNS δ E EC EC-SOD EDTA FAME FID GC-MS GSH GSH-Px GSSG G-6-P-DH Hb Hb-Hp komplex Hp HDL HPLC IE KGW LDL Amerikai Táplálkozástudományi Intézet desztillált víz ß-3-hidroxi-3-metil-glutár-koenzim A-reduktáz szarvasmarha-szérum albumin-bisz (trimetil-szilil) trifluor-acetamid réz-cink-tartalmú szuperoxid-dismutáz Táplálkozási deoxidoxi-ribonukleinsav Nómenklatúra) extracelluláris szuperoxid-dizmutáz etilén-diamin-zsírsav-metil-észter (zsírsav-metilészter) lángionizációs detektorral gázkromatográfiás tömegspektrometria glutation glutation peroxidáz oxidált glutation glükóz-6-foszfát-dehidrogenáz lipograde nagy teljesítményű hemoglobin nagy sűrűségű folyadék lipoglobin-highapy lipograde (nagy teljesítményű lipo-phrotography), nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás lipoglobin-nagy teljesítményű hemoglobin, lipoglobin-nagy teljesítményű lipoglobin, nagy teljesítményű, nagy teljesítményű, lipoglobin-lipograde Egységek (1 NE E-vitamin = 1 mg DL-α-tokoferil etat = 0,67 mg RRR-a-tokoferol) Testtömeg Kis sűrűségű lipoprotein

Táblázatok és ábrák IX SIM SOD TBARS TBA TEP TMB UV s laktát-dehidrogenáz Methemoglobin milliekvivalens aktív oxigént malondialdehid Mangán-tartalmú szuperoxid diszmutáz Messanger ribonukleinsavak egyszeresen telítetlen zsírsavak (egyszeresen telítetlen zsírsavak) omega-6-zsírsavak omega-6-zsírsav-nikotinamid-redukált nikotin-dinotamide-dinukleotid-nikotin-dinukleotid-dinukleotidok-nikotinamid-adenidic sav-dinukleotid-oldatot omega-3-oxidált-nikotin-dinukleotid-dinukleotid redukált nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát-nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát-oxidáz oxidált nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát Szignifikancia szint foszfáttal pufferolt sóoldattal (Phosphate Buffered Saline) foszfatidil-kolin foszfatidil-peroxidáz-peroxidáz-telített-zsírsav-savak/foszfatidil-peroxidáz-peroxidáz-telített-foszfatidil ) többszörösen telítetlen Többszörösen telítetlen zsírsavak (telített zsírsavak) Kiválasztott ionmonitorozó szuperoxid-diszmutáz Tiobarbitursav-reaktív anyagok Tiobarbitursav 1,1,3,3- tetraetoxipropán 3-, 3`-, 5-, 5`-tetrametilbenzidin egység Látszólagos emészthetőség

Táblázatok és ábrák listája X VLDL 7-ß-OH- koleszterin lipoproteinek nagyon alacsony sűrűségű lipoproteinek 7-ß-hidroxi-koleszterin

Bevezetés 3 A lipidperoxidációt meg kell vizsgálni annak érdekében, hogy bizonyítani lehessen az in vivo túlzott E-vitamin-bevitel lehetséges pro-oxidatív hatásait. Mivel az eritrociták nagyon érzékenyek az oxidatív stresszre, meg kell vizsgálni a túlzott E-vitamin bevitel hatását az eritrociták hemolitikus érzékenységére is. Mivel a diétás zsír az oxidatív folyamatokra is hatással van, két különböző diétás zsírt választottak. A magas E-vitamin-kiegészítők lehetséges pro-oxidatív hatásait egy magas PUFA-tartalmú diétás zsír erősítené. A lazacolajat ezért választották diétás zsírnak, mert a lazacolaj magas arányban tartalmaz telítetlen omega-3 (n-3) pufát, amelyek nagyon érzékenyek az oxidációra (MALIS et al. 1990, ZSIGMOND et al. 1990, SAITO and NAKATSUGAWA 1994, CHIANG és TSAI 1995, VALK és HORNSTRA 2000). Ezenkívül zsírszöveteket használtak zsírként, magas telített zsírsavtartalommal (SFA) és alacsony n-3 PUFA-tartalommal. Zsírsav használata esetén kevesebb oxidatív folyamattal kellett számolni, mint lazacolaj alkalmazásakor.

Anyag és módszerek 7. 4. táblázat: Az alkalmazott étrendek cellulóz- és E-vitamin-tartalma Étrendcsoport L/S 100 L/S 500 L/S 1000 L/S 3000 L/S10 000 Cellulóz 49,9 49,5 49 47 40 [g/kg étrend] E-vitamin 1 [g/kg étrend] 0,1 0,5 1 3 10 1 Az E-vitamint DL-α-tokoferil-acetát formájában adtuk hozzá. Az ásványi és a vitamin-kiegészítők összetételét az 5., illetve a 6. táblázat mutatja be. hivatkozni. 5. táblázat: Az ásványi kiegészítők összetétele Alkatrészkoncentráció Mennyiségi elemek [g/kg étrend] Kalcium-karbonát (36% kalcium) 8,44 Dikalcium-foszfát (17,5% foszfát, 22% kalcium) 8,92 Kálium-klorid (52,4% kálium, 47, 2% klorid) 6,87 magnézium-oxid (50% magnézium) 1,014 nátrium-karbonát (27% nátrium) 3,774 nyomelem [mg/kg étrend] vas-szulfát (30% vas) 116 cink-oxid (79% cink) 38 mangán-oxid (62% mangán) 16 réz-szulfát (25% réz) 24 Kalcium-jodát (62% jód) 0,32 Nátrium-szelenit (45% szelén) 0,33 6. táblázat: A vitamin-kiegészítő komponens összetétele A-vitamin (5000 NE/g) D-vitamin 3 (5000 NE/g) Vitamin K (510 mg/g) tiamin (1000 mg/g) riboflavin (800 mg/g) piridoxin (1000 mg/g) biotin (20 mg/g) pantoténsav (1000 mg/g) nikotinsav (990 mg/g) vitamin B 12 (1000 µg/g) folsav (1000 mg/g) kolin-klorid NE: nemzetközi egységkoncentráció [kilogramm diéta] 4000 NE 1000 NE 0,75 mg 5 mg 6 mg 6 mg 0,2 mg 15 mg 30 mg 0, 25 mg 2 mg 1000 mg

Anyag és módszerek 19 1.200 maximális konjugált diének koncentrációja 1.100 1.000 0.900 kihalás 0.800 0.700 0.600 0.500 0.400 késleltetési idő 0.300 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400 420 440 460 480 500 idő percben 1. ábra: Kis sűrűségű lipoproteinek oxidációjának kinetikája 234 nm-en 2.3.6 A lipidperoxidáció markereinek meghatározása 2.3.6.1 Tiobarbitursav-reaktív anyagok koncentrációja A szekunder lipid-peroxidációs termék malondialdehid (MDA) vagy TBARS kimutatása egy módszerrel történt módosított CONTI és mtsai. (1991). A TBA teszt elve két tiobarbitursav (TBA) molekula komplex képződésén alapul, egy savas molekulatömegű MDA molekulával savas pH-érték mellett (HALLIWELL és GUTTERIDGE 1988). Ez az MDA-TBA komplex elnyeli a fényt 542 nm-en, azonban ez a komplex képződés nem specifikus az MDA-ra, mert más aldehidek, cukrok és epepigmentek is reagálhatnak a TBA-val (HALLIWELL és GUTTERIDGE 1988). 750 µl TBA reagenst pipettáztunk 100 µl mintába vagy standardba. Ezt követte az inkubálás 95 ° C-on 60 percig. A TBARS-okat ezután 3 ml n-butanollal extraháltuk, és spektrofotometriásan (Ultrospec 2000) 542 nm-en határoztuk meg.