A vizeletfehérjék mint a diabéteszes nephropathia indikátorai - PDF ingyenes letöltés
Klin Woschenschr (1988) 66: 892-898. Klinische Wochenschrift Springer-Verlag 1988 A vizeletfehérjék mint a diabéteszes nephropathia indikátorai M.H. Weber Belgyógyászati Központ a G6ttingeni Egyetemen, Nefrológiai és Reumatológiai Tanszék (vezető: Prof. Dr. F. Scheler) A vizeletfehérjék mint a diabéteszes nephropathia mutatói Összefoglalás. Az elmúlt tíz évben számos tanulmány igazolta a vizeletalbumin mennyiségi meghatározásának alkalmazhatóságát a diabéteszes nephropathia korai diagnózisában. Nagy pontosságának és összehasonlítható alacsony módszertani erőfeszítéseinek köszönhetően csak az albumin meghatározását hangsúlyozták. A vizeletfehérje mintázatának párhuzamos vizsgálata azonban nátrium-dodecil-szulfát - poliakrilamidegel - elektroforézissel igazolta más magas és alacsony molekulatömegű fehérjék fokozott kiválasztódását a diabéteszes nephropathia különböző szakaszaiban. Következésképpen a puszta albumin-vizsgálat kiterjesztése makromolekuláris (pl. Transzferrin) és mikromolekuláris (pl.
-l-mikroglobulin) fehérje értelmesnek tűnik. E tanulmány szerint mindkét módszertani vonal (kombinált kvantitatív és kvalitatív elemzés) hasznos eszköz a diabéteszes nephropathia korai felismerésében és nyomon követésében. Kulcsszavak: Diabéteszes nephropathia - Vizeletelemzés - Albumin - Egyetlen fehérjék -
-l-mikrogtobulin - SDS-PAGE összefoglaló. Az elmúlt 10 évben számos tanulmány kimutatta, hogy az albumin mennyiségi meghatározása a vizeletben alkalmas a diabéteszes nephropathia korai diagnosztizálására. Nagy pontossága miatt, kevés módszeres erőfeszítéssel, a hangsúly az albumin meghatározására irányult.
--M = a-1 mikroglobulin; DDM = inzulinfüggő diabetes mellitus; GBM = Glomerulfire Basement Membrane; Mr = relatív molekulatömeg; NDDM = nem inzulinfüggő diabetes mellitus; PAGE = poliakrilamid-gél elektroforézis; SDS = nátrium-dodecil-szulfát (nátrium-lauril-szulfát) ben. A vizelet fehérje spektrumának párhuzamos vizsgálata SDS poliakrilamid gélelektroforézissel azt mutatja, hogy más nagy és alacsony molekulatömegű fehérjék is egyre inkább kiválasztódnak a diabéteszes nephropathia különböző szakaszaiban, így a tiszta albumin meghatározása makromolekuláris (pl. Transzferrin) és mikromolekuláris pl. c
-l-mikroglobulin) fehérje van értelme. Jelen tanulmány szerint mindkét módszer (kombinált kvantitatív és kvalitatív elemzés) alkalmazható a diabéteszes nephropathia lefolyásának korai diagnosztizálásában és monitorozásában. Kulcsszavak: diabéteszes nephropathia - vizeletelemzés - albumin - egyes fehérjék - 0
-1-mikroglobulin SDS-PAGE Az egyszerű laboratóriumi módszerekkel (pl. Tesztcsíkokkal) kimutatható fehérjevizelés 1/inger meglévő inzulinfüggő (DDM) és nem inszutin-függő (NDDM) diabetes mellitusban "signum mali ominis" -nak számít (Scheler 1977) jelzi a diabéteszes nephropathia stádiumát (4. stádium), egy klinikailag nyilvánvaló szövődményt, általában kedvezőtlen lefolyással a cukorbetegség diagnosztizálása után 10-20 éven belül. Az inzulinfüggő cukorbetegek mintegy 40% -át érinti ez a fejlődés (Andersen 1983) Különösen fontosnak tűnik a családi nagynyomású terhelés (Krolewski 1988).
A fiatalkori cukorbetegség természetes lefolyásával kapcsolatos régebbi vizsgálatok kimutatták, hogy az inzulinfüggő cukorbetegek több mint 2/3-a a proteinuria klinikai diagnózisa után 10 évvel (fehérje kiválasztásként definiálva)
Az ezt meghaladó albuminmennyiségek félkvantitatívan meghatározhatók vizelet tesztcsíkokkal és kvantitatívan teljes elágazási módszerekkel (nyílt proteinuria). Egyrészt a bazális membrán korai szerkezeti változásai hozzájárulnak a mikroalbuminuria kialakulásához (amelyek Feldt-Rasmussen (1986) szerint nem korlátozódnak a GBM-re), másrészt pedig a plazmaalbumin izoelektromos pontjában (p) eltolódnak a fokozott nonenzimatikus glikoziláció következtében. A vélemények eltérnek a mikrobuminuria optimális kimutatása tekintetében. Klinikai célokra az albumin-clearance meghatározásához szükséges rövid távú vizeletgyűjtések (nappali rost 2 órán át pihenéskor vagy 8 óra éjszakán át) könnyen megismételhetők. Az albumin 24 órás vizeletben történő meghatározása viszont pontatlan vegyes értéket eredményez a nappali vizeletben (ingadozások a különböző fizikai aktivitás miatt) és az éjszakai vizeletben nyugalomban. A Pra-ban vett spontán vizeletminták-
894 M.H. Weber: Húgyúti fehérjék diabéteszes nephropathiában i 1. Reggeli vizelet ALBUMN tesztcsíkok (pos.> 300 mg/l) POSTV = klinikai proteinuria anamnest. Tippek. (Diabetes) ALBUMN-LATEX-TEST döntési határ 30 mg/l A DABETSCHE NEPHROPATHE H kezdetének gyanúja
anamnest. Jegyzetek (szűrés)
klinika. Következmények 7 POSTV F NEGATV] A teszt megismétlése a legjobb
T TAT VER MKROALBUMN TESZT,
ige kontroll NEGATV - kiterjesztett proteinuria diagnosztika - Abkl
-A spontán vizeletben lévő im koncentrációk a hamis pozitív értékek csökkentése érdekében 30 mg/1 (Mogensen 1986; Howey 1987) és 12 rag/1 dózisnál az 1. táblázatban láthatóak. Különböző vizelet és szérum paraméterek táblázatos ábrázolása 162 DDM és 12 évnél fiatalabb betegségben szenvedő NDDM betegek. 1. bekezdés: Fehérjekoncentráció az 1. reggeli vizeletben, S-kreatinin és CK
ea (MW ± SD); 2. bekezdés: A patológiás vizeletfehérje minták, valamint az albumin és a g-l-m koncentrációinak százalékos aránya az 1. reggeli vizelet DDM NDDM 12Y-ben. 12Y. (n = 65) (n = 46) (n = 34) (n = 17) proteinuria (g/l) 0,19_ + 0,06 0,38_ + 0,54 0,26_ + 0,05 0,77_ + 1,04 S-kreatinin (mg)/dl) 0,9 ± 0,16 1,06 + _0,36 1,03 + 0,26 1,12_ + 0,28 CKro, (ml/perc) 102 ± 19,6 98 4-32,6 86 4-30,1 70 - + 16,8 SDS-PAGE% norma. 66,2 37 44,1 29,4% út, 33,8 63 55,9 70,6 Albumin (% _12 rongy/l) 10,7 41,3 23,5 52,9 rng /] [] TF e43,4 600 500 400 300 200 100 - O- 200,6 7o,6
9.Y 27.8 6.2 13.9 6.7 35.9 8.7 16.6 12 év 12 év 2. ábra A transzferrin (TF), az albumin (ALB) és c átlagos spontán vizeletkoncentrációk (1. reggeli vizelet) megoszlása
-l- mikrogl6bulin (A1M) 162 inzulinfüggő (DDM) és nem inzulinfüggő (NDDM) cukorbetegségben, kevesebb (12 év) 12 év/betegség időtartamával (adatok rongyban/l)
M.H. Weber: vizeletfehérjék diabéteszes nephropathiában 897% PAGE minta 70 norma. 70 6o 50 40 30 20 - loo Ab. LMW HMW E T [1] T [11
i HMW/LMW DDM 12 J időtartam% PAGE minta 70-60- 50-40- 30-20-10. b o Ab formában HMW/LMW Nm
HMW t J "'" " "t J NDDM 12 J Időtartam 3a és b ábra. A fiziológiai (norm.) És a kóros vizeletfehérje minták százaléka 162 cukorbetegben. a inzulinfüggő (DDM) cukorbetegek, akiknek betegségük időtartama kevesebb (12 év) 12 év. b Nem inzulinfüggő (NDDM) cukorbetegek, akiknél a betegség időtartama kevesebb (12 év) 12 év (Alb. = mikroalbuminuria; LMW = tubul/ir; HMW = glomerul/ir; HMW/LMW = glomerulo-tubul/ir vegyesen) a megfelelő A DDM csoport az NDDM betegek nagyobb százalékában már a 12 éves periódusban (2. ábra) volt az átlagos transzferrin, albumin és e-1-M koncentráció - összehasonlítva a nefrotikus tartományban lévő 12 éves csoporttal. A makroproteinek magas arányát mindkét csoportban megerősítette az SDS-PAGE (3a. És b. Ábra), amelyek mindegyik esetben megfelelő glomeruláris fehérje mintákat mutattak. A> 12 évnél idősebb NDDM csoportban a tubulus és a glomerulo-tubulphire mintázatot gyakrabban találták, mint az összehasonlítható DDM csoportban, amelyek szintén szignifikánsan növekedtek egy csoportban
-Az L-mikroglobulin kiválasztása kifejezi. 10 évre osztva az NDDM csoportban. 12 évnél hosszabb betegséggel küzdő DDM és NDDM csoportjainkban a fiziológiás kiválasztási minták még mindig viszonylag magas, 30-40% -os aránya volt észrevehető az SDS-PAGE-ban. Bár Feldt-Rasmussen (1986) tanulmányai szerint nem túl valószínű, hogy a spitproteinuriák ebben a csoportban egyetlen prodromális stádium nélkül alakulnak ki, a vizeletfehérje kiválasztásának következetes ellenőrzése szintén hasznosnak tűnik e betegcsoport számára. Értékelésünk szerint mind a kombinált egyedi fehérje-meghatározás, mind a mikro-SDS elektroforézis felhasználható a-
898 M.H. Weber: A diabéteszes nephropathiában található vizeletfehérjék a diabéteszes nephropathia stádiumaiban és lefolyásukban jól fel vannak jegyezve.
-Az l-mikroglobulin kiegészíti a tubulusok kialakulására vonatkozó korábbi információhiányt