Az in vivo és az in vitro hepatikus steatózis protokoll optimalizált elemzése (francia nyelvre fordítva)
Bevezetés
Az elhízás egyre növekvő egészségügyi probléma a fejlett és a fejlődő országokban. Beszámoltak arról, hogy ez az egyik olyan együttélő állapot, amely gyakran társul alkoholmentes zsírmájbetegséghez (alkoholmentes zsírmájbetegség), prevalenciája 30 és 100 százalék között változik a NAFLD 1-ben szenvedő betegeknél. a máj és az elhízás, az elhízott egerek étrendje által kiváltott (DIO) modelleket széles körben használják a NAFLD 2, 3, 4, 5, 6 kialakulásával összefüggő komplex molekuláris mechanizmusok tanulmányozására. A máj steatosis a NAFLD első szakasza, és az alkoholmentes steatohepatitis (NASH), a cirrhosis és végső soron a májrák kialakulásához vezethet. Ezért ennek a módszernek az az általános célja, hogy állati és sejtes modelleket hozzon létre a máj steatosisos állapotairól, és részletes protokollokat nyújtson a hatékony és pontos lipidtartalomhoz. mérés. Ezek a modellek és mérések hasznosak más anyagcserezavarok, például az inzulinrezisztencia és a 2-es típusú cukorbetegség tanulmányozásában is.
Mivel az elhízást az NHSA egyik fő kockázati tényezőjeként azonosítják, az egerekben elhízás kiváltására a magas zsírtartalmú, magas szacharóz tartalmú étrendet (HFHS) használják, amely utánozza a nyugati stílusú, magas zsírtartalmú étrendet. Ezt követően a zsírmáj mértékét különböző módszerekkel értékelhetjük. Először is, a testtömeg és a testösszetétel elemzése magmágneses rezonanciával (NMR) megmutatja a lipidek felhalmozódását étkezés közben. A zsírtömeg és a sovány tömeg nem invazív módon és valós időben számszerűsíthető.
A jelen eljárás előnye, hogy több optimalizált megközelítést alkalmaz a máj steatosis modelljeinek előállításához, valamint a fenotípusok teljes jellemzéséhez in vivo és in vitro. Az egér DIO modelljei összefoglalják az emberi zsírmáj betegség metabolikus patológiáit és fenotípusait. Az emberi anyagcsere egyéb paraméterei ebben a modellben is reprodukálhatók 8. A szteatotikus hepatocita modell előállítása a magas glükóz hatására, annál hatékonyabb, hasznosabb az inzulin, és legyőzi a drága és fárasztó munka korlátozását. Ezek a módszerek együttesen elegendőek és nélkülözhetetlenek a máj lipid-diszfunkciójának és tápanyag-túlterhelés alatti inzulinrezisztenciájának tanulmányozásához.
Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.
Jegyzőkönyv
Az összes állatkísérleti protokollt az állatgondozási és alkalmazási intézményi bizottság jóváhagyta a Kínai Tudományos Akadémia Sanghaji Biológiai Tudományok Intézetében (Sanghaj, Kína).
1. DIO egér modell
2. Elsődleges egér hepatocita modell
Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.
Reprezentatív eredmények
Amint az a 1A. ábra, Az egér testtömege 45 ± 1,2 g-ra nőtt 16 hetes HFHS-diéta után, ami körülbelül 1,5-szer magasabb, mint a chow-étrend csoportban. Testösszetétel Az egerek zsírtömegét és sovány tömegét mutató NMR-elemzéseket mutatjuk be (1B. ábra). Az egész test és a máj zsíreloszlását MRI-vel határoztuk meg, és az ábrák valós színű, álszínes, tudatos egerekben láthatók. ábra 1C-D. A testtömeget és a testösszetételt a HFHS-diéta táplálási folyamata során mértük és tettük láthatóvá.