Clostridium difficile-toxin AB - Synevo
Általános információk és ajánlások
A Clostridium difficile - sporulált anaerob Gram-pozitív bacillus - felelős a pseudomembranosus colitis és az antibiotikumok által kiváltott hasmenés előállításáért.
Bár a C. difficile toxinokat a kutatók már régóta kiemelték, csak 1970-ben erősítették meg szerepüket a pseudomembranosus colitis kialakulásában. .
A C. difficile legalább 2 A és B nevű toxint termel. A toxin A, egy enterotoxin, fokozott folyadék szekréciót és gyulladást okoz a bél nyálkahártyájában. A toxin B, amelynek in vitro citotoxikus hatása körülbelül 1000-szer erősebb, mint az A toxin, szinergikusan hat vele. Míg az A toxint a betegségben részt vevő C. difficile szinte minden törzse termeli, a közelmúltban kimutatták, hogy egyes törzsek csak a B4 toxint választják ki. .
A C.difficile által kiváltott vastagbélgyulladás a vastagbél bakteriális flórájának egyensúlyhiányából, a C.difficile-tal való kolonizációból és a toxinok termeléséből származik. Az antibiotikum-kezelés felelős a flóra megváltoztatásáért, és a fertőzés fő célpontja a kórházi emberek. A kolonizáció széklet-orális úton történik. A C. difficile olyan hőálló spórákat is képez, amelyek a környezetben több hónaptól több évig is fennmaradhatnak. Ha a szennyezés elterjedt, a hasmenés járványai előfordulhatnak a kórházakban és más gondozó egységekben. A normál bélflóra ellenzi a gyarmatosítást, de az antibiotikum-kezelés a flóra elnyomásával megkönnyíti a C.difficile 1 szaporodását. .
A betegséget eredetileg klindamicin-kezelésben részesülő betegeknél írták le, de jelenleg úgy gondolják, hogy bármely antibiotikum pszeudomembranosus vastagbélgyulladást okozhat. Nagyszámú beteg bevonásával végzett vizsgálatokban az esetek több mint 70% -a társult cefalosporinok (különösen a második és a harmadik generáció) 3 alkalmazásához. Az ampicillin és az amoxicillin gyakorisági sorrendben következik. Kevésbé érintettek a makrolidok és más penicillinek. Aminoglikozidok, fluorokinolonok, trimetoprim-kotrimoxazol, imipenem és meropenem esetenként okozhatják a betegséget. Még egy antibiotikum rövid beadása is okozhat vastagbélgyulladást. A kockázat nagyobb az elhúzódó kezelések és az antibiotikumok kombinációi esetén 1 .
Idős embereknél és immunhiányos betegeknél alakul ki leginkább a C. difficile által kiváltott vastagbélgyulladás. Bár a kisgyermekek gyakran hordozzák a méreganyagokat kiválasztó Clostridium difficile törzseket, a klinikailag nyilvánvaló fertőzés ebben a korcsoportban szokatlan.
A C. difficile-val történő kolonizáció a klinikai állapotok széles skáláját generálja, a tünetmentes hordozó státusztól, az enyhe, önkorlátozó hasmenéstől a pseudomembranosus vastagbélgyulladásig és a fulmináns vastagbélgyulladásig. A legsúlyosabb szövődmények a toxikus megakolon, a vastagbél perforációja és a peritonitis. A legtöbb betegnél hasmenés jelentkezik az antibiotikum-kezelés megkezdése alatt vagy közvetlenül utána. A betegek 25-40% -a azonban nem válik tünetibbé, mint 10 héttel az antibiotikum-terápia befejezése után. A spontán betegség egyes eseteit olyan betegeknél is leírták, akiknek anamnézisében nem volt antibiotikum kezelés; 1; 3; 4 .
Leggyakrabban a klinikai kép a következőket tartalmazza:
-enyhe vagy közepes hasmenés, ritkán véres;
-kólikás hasi fájdalom;
A C. difficile által kiváltott vastagbélgyulladás diagnózisát fel kell gyanítani minden olyan hasmenésben szenvedő beteg esetében, aki az elmúlt 2 hónapban antibiotikum-kezelésben részesült és/vagy a kórházi kezelés után 72 órával (vagy annál hosszabb ideig) kezdődött hasmenés volt.
A C. difficile toxinok kimutatása fontos a megfelelő terápia kialakításához. Ha az inkriminált antibiotikum-kezelés abbahagyása után a klinikai tünetek nem oldódnak meg, akkor vankomicin, metronidazol vagy bacitracin orális beadása javasolt.
A baktérium rutin tenyésztése nem ajánlott a nem toxint szekretáló törzsek 3 gyakori izolálása miatt .
A laboratóriumunkban elvégzett teszt immunokromatográfiás technikával 2 kimutatja az A és/vagy B toxint a székletben .
Begyűjtött minta - frissen kibocsátott széklet; az ajánlott mennyiség 1-2 g képződött ürülék vagy 1-2 ml folyékony széklet; a rektális 3. tamponról gyűjtött mintákat nem fogadják el .
Betakarítási konténer - eldobható tartály a széklethez; tartósítószerek hozzáadása tilos 2 .
Betakarítás után szükséges feldolgozás - az elemzést frissen kibocsátott székleten végezzük a betakarítástól számított legfeljebb 3 órán belül (lehetőleg). Ha ez nem lehetséges, a mintát 2-8 ° C-on tartják, legfeljebb 3 napig. A feldolgozáshoz a homogenizált minta bizonyos részét egy speciális hígítószerrel kezeljük a toxinok szolubilizálására, és a 2 felülúszó elválasztásához centrifugáljuk. .
Tesztstabilitás - a betakarítást követően a mintát a lehető leghamarabb a laboratóriumba kell szállítani; a minta 3 napig stabil 2-8 ° 2-on .
Módszer - immunokromatográfia. A hígított minta egy részét összekeverjük az 1. konjugátum oldattal (a Clostridium difficile A és B toxin specifikus monoklonális antitesteket tartalmaz színes mikrorészecskékkel konjugálva) és a 2. konjugátum oldattal (biotinilezett anti-toxin A és anti-toxin B specifikus antitesteket tartalmaz). ). Ennek a keveréknek egy bizonyos térfogatát egy erre a célra szolgáló tesztablakba viszik át; a doboz a teszt sávban immobilizált streptavidint és a kontroll sávban kecske anti-immunglobulin antitesteket tartalmaz. A specifikus antitestek a mintában lévő antigénhez kötődnek és "antigén-szendvics" komplexet alkotnak. A komplexek kapillárisokon keresztül vándorolnak, eljutnak a tesztcsíkot tartalmazó területre, a szilárd fázisban jelen lévő sztreptavidinhez kötődnek, és bármilyen intenzitású fekete színű sávként tekinthetők az eredményablakban. A minta és/vagy B toxin hiányában a szalag nem jelenik meg. A teszt csak akkor érvényesül, ha a 2. kontrollablakban bármilyen intenzitású fekete színű sávot kapunk .
Referenciaértékek
Clostridium difficile toxin A/B - negatív.
Az eredményeket minőségileg fejezzük ki: pozitív/negatív 2 .
Határértékek és interferenciák
A negatív eredmény nem zárja ki a C. difficile-hoz társuló állapot jelenlétét. A hamis-negatív eredménynek a következő okai lehetnek:
-a minta nem megfelelő gyűjtése, szállítása vagy tárolása;
-az A/B toxinok alacsony szintje, a módszer kimutatási határa alatt;
1. Craig A Gronczewski, MD, Jonathan P Katz, MD. Clostridium Nehéz vastagbélgyulladás. e-gyógyszer gasztroenterológia (frissítés 2006. augusztus). Ref típus: Internetes kommunikáció.
2. Synevo Laboratórium. Az alkalmazott munkatechnika konkrét hivatkozásai 2010. Ref.