Csontvelő-transzplantációs platform a dendritikus sejtek szerepének vizsgálatához
Összegzés
A transzplantátum-gazda betegség fő szövődmény az allogén csontvelő-transzplantáció után. A dendritikus sejtek kritikus szerepet játszanak a graft-versus-host betegség patogenezisében. A jelenlegi cikk egy új csontvelő-transzplantációs platformot ismertet, amely tanulmányozza a dendritikus sejtek szerepét a graft-versus-host betegség és a graft-versus-leukémia kialakulásában.
Absztrakt
Bevezetés
Az allogén hematopoietikus őssejt (BMT) transzplantáció hatékony terápia az 1,2-es hematológiai rosszindulatú daganatok graft-versus-leukémia (GVL) hatásának kezelésére 3. A donor limfociták azonban továbbra is nem kívánt immunológiai támadásokat okoznak a befogadó szövetek ellen, ezt a folyamatot graft-versus-host betegségnek (GVHD) nevezik 4 .
A donor T-limfociták aktiválása gazdaantigént bemutató sejtek (PCA) révén elengedhetetlen a DGV kialakulásához. Az APC-k közül a dendritikus sejtek (DC) a leghatékonyabbak. Magas antigénfelvételük, a T-sejt ko-stimuláló molekulák expressziója és a T-sejteket patogén részhalmazokká polarizáló gyulladásgátló citokinek termelése miatt eredendően képesek GVHD indukálására. A befogadó DC-k elengedhetetlenek a T-sejtek primálásának megkönnyítéséhez és a GVHD indukálásához a transzplantáció után 11, 12. Ennek eredményeként a CDC-k érdekes célpontokká váltak a GVHD 12 kezelésében .
TBI szükséges a donorsejtek beültetésének javításához. A TBI-hatás miatt a befogadó DC-k aktiválódnak és rövid ideig fennmaradnak a transzplantáció után 12. A biolumineszcencia vagy a fluoreszcencia alkalmazásának jelentős előrehaladása ellenére még mindig nehéz létrehozni egy hatékony modellt a befogadó DC-k szerepének tanulmányozására a GVHD-ban.
Mivel a donor T-sejtek a GVL-aktivitás mozgatórugói, az immunszuppresszív gyógyszereket, például szteroidokat alkalmazó kezelési stratégiák a T-sejtek alloreaktivitásának elnyomására gyakran tumor visszaesést vagy fertőzést okoznak. Ezért a befogadó CD-k megcélzása alternatív megközelítést nyújthat a GVHD kezelésében, miközben megőrzi a GVL-hatást és elkerüli a fertőzést.
Röviden: a jelen tanulmány platformot kínál annak megértésére, hogy a fogadó CD-k különböző típusú jelzései hogyan szabályozzák a GVHD kialakulását és a BMT utáni GVL-hatást.
Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.
Jegyzőkönyv
A kísérleti eljárásokat a Közép-Floridai Egyetem Állattenyésztési és Felhasználási Bizottsága hagyta jóvá.
1. GVHD indukció
MEGJEGYZÉS: Az allogén csontvelő (BM) sejtek transzplantációját (1.2. Lépés) a besugárzást követően 24 órán belül végezzük. Az alábbiakban leírt összes eljárást steril környezetben hajtjuk végre. Végezze el az eljárást szövettenyésztő fedélben, és használjon szűrt reagenseket.
2. Kotranszplantációs modell
3. BMT GVHD/GVL modellek
Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.
Reprezentatív eredmények
Az MHC (H2k b) -BALB/C (H2k d) nem egyező fő B6 modell szorosan megfelelt a transzplantáció utáni GVHD fejlődésének (2. ábra). A GVHD hat klinikai jele, amelyeket korábban Cooke és mtsai. 16 olyan betegeknél fordult elő, akiket WT-B6 T-sejtekkel transzplantáltak, de a csak BM-mel átültetett recipiensekben nem (1.5. Lépés), akik a GVHD-negatív csoportot képviselték. Ebben a modellben a GVHD fejlesztésének két fázisa van. Először is, a súlyosság csúcsa körülbelül 11 nappal a transzplantáció után következik be, majd a klinikai pontszámok és a testtömeg helyreállítása csökken akár 16 napig is. Ebben a szakaszban számos mechanizmus, mint például a gyulladás és a sugárzás által kiváltott beültetési szindróma vezérli a betegség kórokozóját és a GVHD-t. A címzettek a transzplantáció után körülbelül 30-40 nappal egyenletesen engednek a GVHD-nek.