GENETIKAI, FIZIOLÓGIAI ÉS NÖVÉNYVÉDELMI INTÉZET C kézirat útján

GENETIKAI, ÉLET- ÉS NÖVÉNYVÉDELMI INTÉZET Kéziratként C.Z.U. 633.854.78: 631.523 (043.2) A NECHIFOR VICTORIA GIBERELINE AKCIÓ A NAPVIRÁG MIKROSPOROGENEZISÉN (HELIANTHUS ANNUUS L.) 162.01. NÖVÉNYI GENETIKA Doktori értekezés biológiai tudományokból Tudományos vezető DUCA Maria, biológiai tudományok habilitált doktora, egyetemi tanár, akadémikus Szerző NECHIFOR Victoria CHIŞINĂU, 2018

növényvédelmi

4.2.1. A CycD3, PCNA1, HIS1-3, H1.3 génekre jellemző bioinformatika. 73 4.2.2. Az expressziós eredmények elemzése. 79 4.3. Az MND1, AHP2, ASK1, DYAD kromoszómák szegregációjában szerepet játszó génexpresszió vizsgálata. 83 4.3.1. A génekre jellemző bioinformatika. 84 4.3.2. Az expressziós eredmények elemzése. 89 4.4. A sejtmembránok kialakulásában és aktivitásában szerepet játszó gének expressziós szintjének értékelése. 93 4.4.1. Az EXPA1, GSL12 génekre jellemző bioinformatika. 94 4.4.2. Az expressziós eredmények elemzése. 96 4.5. Következtetések a 4. fejezetben. 101 ÁLTALÁNOS KÖVETKEZTETÉSEK ÉS AJÁNLÁSOK. 103 BIBLIOGRAPHY. 105 MELLÉKLETEK. 127 1. melléklet A képzés tudományos eredményeinek végrehajtásáról szóló törvény. 127 2. melléklet A tudományos eredmények fejlesztés céljából történő végrehajtásáról szóló törvény. 128 FELELŐSSÉGI NYILATKOZAT. 129 A SZERZŐ önéletrajza. 130 4

RÖVIDÍTÉSEK FELSOROLÁSA ABA abszcizinsav AG3 gibberellinsav AIA - indolil-ecetsav AJ jászmonsav AS szalicilsav ASC citoplazmatikus androsterilitás ASI indukált androszterilitás BLAST Basic Local Alignment Search Tool BR brassinosteroid CDK ciklinfüggő kinázok CMP Secene PCylquate D észter tagged) ET ethylene FC fold change IGFPP Genetikai, Élettani és Növényvédelmi Intézet MO Optikai Mikroszkópia NCBI Nemzeti Biotechnológiai Információs Központ NT - Pb nukleotid bázispárok PCNA - Proliferáló nukleáris antigén PCR Polimeráz láncreakció (láncpolimerizációs reakció) RE endoplazmatikus retikulum SM hímsterilitás TAE Tris-acetát-EDTA TBE Trisz-borát-EDTA UV ultraibolya fény 8

a mikrospórákkal tetrádokat alkotó haploid magok. (3.6. Ábra, d). Az egyes falsejtek plazmalemma egyre hosszabbá válik, úgy, hogy a szárházban belülre nyúlik, miközben periférikus marad. A tetrad fázis vége felé ezek a szabálytalan alakú, plazmodium kinézetű, intenzíven poliploidizált magokat tartalmazó sejtek radiális felületeiken elválnak egymástól, míg a középső réteg vékony és degenerált. Jól kontúrozott, intenzív színű mikrospórákat figyeltek meg a kehelyfal emésztése után a 3,5 mm-nél nagyobb termékeny virágok portokjának mikrosporangiumában (3.6. E). Ábra. 3.6. A pollen őssejtjei a mikrosporogenezis különböző szakaszaiban. Megjegyzés: I. termékeny növények, II. ASI növények; a, f leptoten; b, g pachiten; c, h osztások; d, i tetrade; e, j mikrospórák x1600 (c, f); x640 (a, b, d, e, g, h, i, j) A mikrospórák posztmeiotikus fejlődése: individualizálódásuk és felszabadulásuk a tetrádból, az elsődleges exin lerakódása, az ekinimációk kialakulása fajok szerint alakul, kiemelve a szövet fokozatos, szinkronizált szétesését tapéta. Ábra. 3. 7. A szalagsejtek a mikrosporogenezis különféle fázisaiban Megjegyzés: termékeny növények; II. Növények ASI-vel; a és az I. prófázis; b, f osztások; c, g tetrád; d, h mikrospóra szakasz. 15. skála = µm. 57

A kulcsszó keresés kiemelte a lokuszt: az ACO58770.1, amely egy 68 aminosav-fehérjeszekvenciát kódol, amelyet A4-szerű fehérjebővítésként definiálnak, részben [Helianthus annuus]. Az expansin A4-szerű fehérjével [Helianthus annuus] vizsgált transzkripciós szekvencia BLASTX-je nagyon alacsony hasonlósági fokot jelez (pontszám: 72,4/72,4, lefedettség: 25%, E-érték: 7e-22, azonosság: 66%) 4,20, B). A B ábra. 4.20. Szekvenciaelemzés CCFT9238.b1_K05.ab1. a BLASTN (A) és a TBLASTX (B) programokon keresztül. A HELIAGENE adatbázis [295] bemutatja a napraforgó hipotetikusan funkcionálisan az expanzinoknak tulajdonított átiratait, különböző expressziós fokokkal a különböző szervekben, de génszekvenciájuk nem mutat hasonlóságot az ebben a tanulmányban vizsgált átirattal. 4.4.2. Az expressziós eredmények elemzése A kallusz bioszintézisében szerepet játszó napraforgóban a GSL12 gén expressziójának elemzése statisztikailag szignifikáns növekedést mutatott (p