Készült a Német Táplálkozástudományi Kutatóintézetben. Az osztály benyújtotta
Értekezés A. Winchenbach Készült a Német Táplálkozástudományi Kutatóintézetben Doktors fájl: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/index.htm (1/6) [2000.03.07. 18:54:54]
Értekezés A. Winchenbach állatorvoslás a Berlini Szabadegyetemen Andrea Winchenbach állatorvos előadásával, Salzhemmendorf Berlin 1998 Folyóirat száma: 2172 Tartalomjegyzék 1. oldal. Bevezetés 1 2. Irodalomjegyzék 3 2.1. Laktóz malabszorpció 3 2.2. Az erjesztett tejtermékek előállításához felhasznált csíratípusok áttekintése 7 2.3. A ß-galaktozidázok 8 2.3.1. A bél (a gazda sajátja) ß-galaktozidáz 8 2.3.2. A mikrobiális ß-galaktozidáz 12 2.4. Az erjesztett tejtermékek toleranciája laktóz malabszorberekkel 2.5. "Mikroorganizmusok" vagy "laktobacillusok" megölése γ sugarakkal 13 18 file: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/index.htm (2/6) [2000.07.03. 18:54:54]
Értekezés A. Winchenbach 3.3.2. Nyálkahártya-homogenizátumok megszerzése a bél ß-galaktozidáz aktivitásának későbbi meghatározásával a göttingeni mini-disznóban 3.3.3. Nyálkahártya-homogenizátumok megszerzése a bél β-galaktozidáz aktivitásának későbbi meghatározásával patkányokban 3.3.4. A ß-galaktozidáz aktivitás meghatározása és a baktériumok elpusztítása laktobacillus szuszpenziókban ionizáló sugárzással történő kezelés után 3.4. Laktóz emésztés és ß-galaktozidáz aktivitás vizsgálata gnotobiotikus göttingeni kismalacokban 41 42 42 44 3.4.1. Kísérleti állatok 44 3.4.2. 44 megtartása 3.4.3. Diéták 45 3.4.4. Etetési kísérlet 46 3.4.5. Mintavétel és kezelés 47 3.4.6. Steril kontrollok 47 3.5. Laktóz emésztés és ß-galaktozidáz aktivitás vizsgálata gnotobiotikus patkányokban 48 3.5.1. Kísérleti állatok 48 3.5.2. Tartása 48 3.5.3. Diéták 48 3.5.4. Etetési kísérlet 49 3.5.5. Mintavétel és kezelés 49 3.5.6. Steril kontrollok 49 3.6. Statisztikai értékelés 50 4. Eredmények 51 4.1. A Lactobacillus delbrückii ssp. Növekedési görbéje bulgaricus 709-1 51 fájl: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/index.htm (4/6) [2000.07.03 18:54:54]
Értekezés A. Winchenbach 4.8.5. A baktériumok száma az étrendben és a patkányok székletében az életképes laktobacillusok beadása után 73 5. Megbeszélés 76 5.1. Előzetes tesztek 76 5.1.1. A kísérletben használt laktobacillus törzs növekedési körülményei és tisztasága 5.1.2. β-galaktozidáz aktivitás mintákban in vitro emésztés után pepszin/HCl keverékben 5.1.3. A gazda saját nyálkahártya-ß-galaktozidáz aktivitása a göttingeni mini sertések és patkányok vékonybélében 5.1.4. A γ sugarakkal történő besugárzás hatása a ß-galaktozidáz aktivitásra és a Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 5.2. A laktóz, a ß-galaktozidáz aktivitás és a baktériumok száma a gnotobiotikus göttingeni mini sertések ürülékében három különböző módon elkészített kefir diéta elfogyasztása után 5.3. Laktóz, ß-galaktozidáz aktivitás és baktériumok száma a gnotobiotikus patkányok ürülékében három különböző elkészítésű kefir étkezés elfogyasztása után 76 77 79 80 83 90 6. Összefoglalás 92 Összegzés 7. Irodalomjegyzék 94 8. Rövidítések listája 114 9. 115. függelék Köszönetnyilvánítás CV fájl: ///g /Sassadat/Diss/UB/winch/index.htm (6/6) [2000.03.07. 18:54:54]
Disszertáció A. Winchenbach - 4. fejezet: Eredmények 4. Eredmények 4.1 A Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 709-1 A munka szempontjából kiemelt fontosságú volt a lehető legnagyobb laktobacillus-hozam elérése a benne lévő ß-galaktozidázzal. A for Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 709-1 előkészített példaértékű növekedési görbét egy nap, le lehetett olvasni, hogy az a pont, amikor a csíra növekedésének log fázisa álló helyzetű fázisra változik, vagyis ahol annyi csíra pusztul el, amennyi keletkezik, 14 órás inkubációs periódus után ért el. A csírákat ezért lehetőleg 14 óra elteltével kell összegyűjteni és feldolgozni az optimális élő csírák tömegének elérése érdekében. Az 1. ábra a Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 709-1. 1. ábra: A Lactobacillus delbrückii ssp. Növekedési görbéje bulgaricus 709-1, tenyésztés MRS-táptalajban, 37 ° C-on, a telepképző egységek megjelölése naplóban (lásd még a 3. táblázatot a függelékben) 4.2. A laktobacillus törzs tisztaságának ellenőrzése: /// g/Sassadat/Diss/UB /winch/results.htm (1/26) [2000.03.07. 18:57:06]
Értekezés A. Winchenbach - 4. fejezet: Eredmények d. PH 4-nél és a teljes β-galaktozidáz mérésénél (ultrahanggal végzett kezelés után) a besugárzott mintákban a csökkenést általában a teljes mérési időszak alatt regisztrálták. 120 percig 37 ° C-on végzett inkubálás után a besugárzott kefirmintában még mindig 519 NE/l-t, a puffermintában pedig 543 NE/l-t mértünk. Mindkét besugárzatlan mintában (mindkét 1040 NE/l-ben) az aktivitás növekedése meghaladta a 750 IU/l aktivitást az inkubáció kezdetén 120 perc után (5. ábra). 2. ábra: A szabad ß-galaktozidáz aktivitása 4 különböző mintában laktobacillusokkal pepszin/HCl keverékkel 2-es pH-n történő inkubálás után (szubsztrátként o-npg-vel meghatározva) (lásd még a függelék 4. táblázatát). azonosítatlan/puf. = besugárzatlan laktobacilluscsapadék azonosítatlan pufferben szuszpendálva./kef. = besugárzatlan laktobacillus pellet a legjobb kefirben szuszpendálva./puf. = 20 kgy újraszuszpendálással besugárzott Lactobacillus-pellet. puffer sorrendben/kulcsban = 20 kgy újraszuszpendálással besugárzott Lactobacillus-pellet. a kefir fájlban: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/results.htm (3/26) [2000.03.07. 18:57:06]
Értekezés A. Winchenbach - 4. fejezet: Eredmények 3. ábra: A szabad ß-galaktozidáz aktivitása 4 különböző mintában laktobacillusokkal pepszin/HCl keverékkel 4-es pH-n történő inkubálás után (szubsztrátként o-npg-vel meghatározva) (lásd még . 5 a függelékben). azonosítatlan/puf. = besugárzatlan laktobacilluscsapadék azonosítatlan pufferben szuszpendálva./kef. = a besugárzatlan laktobacillus pellet a legjobb kefirben szuszpendálva./puf. = 20 kgy újraszuszpendálással besugárzott Lactobacillus-pellet. puffer sorrendben/kulcsban = 20 kgy újraszuszpendálással besugárzott Lactobacillus-pellet. a kefir fájlban: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/results.htm (4/26) [2000.03.07. 18:57:06]
Disszertáció A. Winchenbach - 4. fejezet: Eredmények 4. ábra: A teljes ß-galaktozidáz aktivitása 4 különböző mintában pepszin/HCl keverékkel 2-es pH-n történő inkubálás után (szubsztrátként o-npg-vel meghatározva) (lásd még a 2. táblázatot). A mellékletben 6). azonosítatlan/puf. = besugárzatlan laktobacilluscsapadék azonosítatlan pufferben szuszpendálva./kef. = a besugárzatlan laktobacillus pellet a legjobb kefirben szuszpendálva./puf. = 20 kgy újraszuszpendálással besugárzott Lactobacillus-pellet. puffer sorrendben/kulcsban = 20 kgy újraszuszpendálással besugárzott Lactobacillus-pellet. Kefir fájlban: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/results.htm (5/26) [2000.03.07. 18:57:06]
Disszertáció A. Winchenbach - 4. fejezet: Gnotobiotikus eredmények, de hagyományosak) A 6. ábrán látható nyálkahártya-ß-galaktozidáz aktivitás görbéi 6 vékonybél metszetben (pH 5,5-nél mérve) 6 göttingeni mini sertésben minden állat esetében egyediek voltak. Általánosságban azonban megállapítható volt, hogy a vékonybél elülső szakaszain az aktivitás a gyomor kimenetétől számított 50% -ig volt a legmagasabb szinte minden állatnál, majd - a sertések kivételével - a vége felé többé-kevésbé erőteljesen csökkent. A 6. disznó mutatta a legnagyobb ß-galaktozidáz aktivitást a nyálkahártyában a vékonybél utolsó szakaszában. A nyálkahártya-ß-galaktozidáz legnagyobb aktivitását a 4. sertésnél tapasztalták, 14,24 NE/g nyálkahártya (nedves tömeg) a vékonybél 30% -ánál, majd a 2. sertés 13,51 NE/g 30% -nál és 13,38 NE-nél következett./g 50% -ban és 3. sertésből 13,28 NE/g nyálkahártya (nedves tömeg) 30% vékonybél szakaszon a gyomor kimenetétől. 6. ábra: ß-galaktozidáz aktivitás a vékonybél mentén 12 hetes göttingeni mini disznókban (6 állat), meghatározás a vékonybél 6 különböző szakaszán (szubsztrátként laktózzal meghatározva; pH = 5,5) (lásd még a függelék 8. táblázatát) ). fájl: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/results.htm (7/26) [2000.03.07. 18:57:06]
Disszertáció A. Winchenbach - 4. fejezet: Eredmények 8. ábra: A besugárzási körülmények (besugárzás intenzitása és helyzete) hatása a ß-galaktozidáz aktivitásra laktobacillus pelleteken; Meghatározás 4 napon belül egy hónapon belül (3. besugárzási helyzet; ultrahangos kezelés nélkül; szubsztrátként o-npg-vel meghatározva) (lásd még a függelék 10. táblázatát) 9. ábra: A besugárzási körülmények (a besugárzás intenzitása és helyzete) hatása a ß- Galaktozidáz aktivitás laktobacillus pelletekben; Meghatározás 4 napon keresztül, egy hónap alatt (7. besugárzási helyzet; ultrahangos kezelés nélkül; szubsztrátként o-npg-vel meghatározva) (lásd még a függelék 11. táblázatát) file: /// g/Sassadat/Diss/UB/winch/results. htm (10/26) [2000.03.07. 18:57:06]
Disszertáció A. Winchenbach - 4. fejezet: Eredmények 10. ábra: A besugárzási körülmények (besugárzás intenzitása és helyzete) hatása a ß-galaktozidáz aktivitásra laktobacillus pelleteken; Meghatározás 4 napon belül egy hónapon belül (3. besugárzási helyzet; ultrahangos kezeléssel; szubsztrátként o-npg-vel meghatározva) (lásd még a függelék 12. táblázatát) 11. ábra: A besugárzási körülmények (a besugárzás intenzitása és helyzete) hatása a ß- Galaktozidáz aktivitás laktobacillus pelletekben; Meghatározás 4 napon keresztül egy hónap alatt (7. besugárzási helyzet; ultrahangos kezeléssel; szubsztrátként o-npg-vel meghatározva) (lásd még a függelék 13. táblázatát) file: /// g/Sassadat/Diss/UB/winch/results. htm (11/26) [2000.03.07. 18:57:06]