Korea Huntington - genetikai tesztelés - Synevo
Általános információ
A Huntington-kór egy progresszív, autoszomális domináns neurodegeneratív betegség, amelyet fenotípusosan akaratlan mozgások, disztónia, kognitív hanyatlás és viselkedési rendellenességek jellemeznek.
A betegség prevalenciája 5-10: 100 000 eset. Jellemzően az első tünetek 35-50 éves kor között jelentkeznek, de az állapot bármely életkorban megkezdődhet. A tünetek késői megjelenése miatt a Huntington-kórban szenvedő személynek még gyermekei lehetnek, mielőtt tudnák, hogy betegségben szenvednek; 1; 6 .
A betegséget először George Huntington amerikai orvos írta le 1872-ben. A "chorea" kifejezés a görög khoreia = dance szóból ered, és a betegségre jellemző gyors, nem ismétlődő, kiterjedt és hirtelen akaratlan mozgásokat jellemzi; ezek a mozdulatok súlyossága változhat, kezdve a mozdulatoktól, a gesztusok és a kifejezés enyhe, szakaszos túlzásával járó izgatástól, a kezek idegmozgásaitól, az instabil hullámzó járástól az erőszakos, mozgáskorlátozó mozgások folyamatos áramlásáig. Korea a betegek több mint 90% -ában van jelen, és az evolúció első 10 évében súlyosbodik. A betegség előrehaladtával a choreát fokozatosan felváltja a dystonia és a Parkinson-kór megnyilvánulásai, például bradykinesia, merevség, testtartási instabilitás. A késői szakaszban egy akinetikus-merev szindróma kerül beépítésre, amelyben a koreikus mozgások minimálisak vagy hiányoznak. Az önkéntes motoros funkció károsodása a betegség korai jele; a dysarthria és az oculomotoros rendellenességek szintén a korai szakaszban alakulnak ki, míg a dysphagia későn fordul elő.
A fiatalkori Huntigton-kór (Westfal-variáns; az esetek 5-10% -a) 20 éves kora előtt kezdődik, és Parkinson-kór megnyilvánulásai, dystonia, dementia, epilepszia és enyhe chorea vagy akár hiánya 2; 5 .
A Huntington-kór által érintett összes ember fokozatosan globálisan csökken a kognitív funkcióban. A demencia szindróma a kezdeti szakaszban magában foglalja az ingerlékenységet, az elhanyagolást, az érdeklődés elvesztését; a gondolkodási folyamat lelassulása és a memóriazavarok később jelentkeznek. Ez a klinikai kép a subcorticalis demenciára jellemző (eltér attól, ami Alzheimer-kórban fordul elő), amelyről azt gondolják, hogy a fronto-subcorticalis idegi áramkör diszfunkcióját tükrözi.
A viselkedési rendellenességek főleg érzelmi betegségekkel kapcsolatosak. A depresszió gyakoribb; csak a betegek egy részénél fordul elő bipoláris rendellenességre jellemző mániás roham. Magasabb lehet az öngyilkosság aránya; Az érintett egyéneknél pszichózis, rögeszmés-kényszeres tünetek, szexuális rendellenességek, alvászavarok és személyiségváltozások is kialakulhatnak. .
A Huntington-kór neuropatológiai jellemzői közé tartozik a szelektív idegsejt-degeneráció a caudatában és a putamenben. A bazális ganglionok indirekt kontrollútjának GABA-ergikus középső gerincsejtjeinek előnyös károsodása a chorea neurobiológiai alapja (a csíkos testekben a kolinerg és GABA-erg rendszerek romlása befolyásolja a globid pallidus sejtek GABA-ergikus gátlását); a striatális interneuronokat általában nem érinti; egyéb érintett agyi régiók: a fekete anyag, a hippocampus és a kéreg egyéb területei. Számos mechanizmust javasoltak a neuronok megsemmisítésére, például exotoxicitást (a gerjesztő aminosavak neurotoxikus hatása a posztszinaptikus receptorok túlzott aktivációjának jelenlétében), oxidatív stresszt, az energia-anyagcsere megzavarását és az apoptózist 2; .
A HTT (HD) az egyetlen Huntington-kórhoz kapcsolódó gén; az egyetlen leírt mutáció a CAG trinukleotidismétlések kiterjesztése; Nancy Wexler, aki saját családjában rendelkezik tapasztalattal a betegséggel kapcsolatban, 1983-ban felfedezte a HD gén elhelyezkedését a 4. kromoszóma rövid karján (4p16.3).
A HTT gén (más néven IT15) hossza körülbelül 200 kb, 67 exonnal és 10366 bp kódoló régióval. Az első exon szintjén normális allélokban találhatók 8-26 hármas CAG, míg a Huntington-kórea által érintett egyéneknél az ismétlések száma meghaladja a 36-ot (az eddig ismert maximális szám 250), ami a DNS-polimeráz "csúszásához" vezet a replikáció során 3; 5. A fiatalkori Huntington choreája akkor fordul elő, amikor az ismétlések száma meghaladja a 60-at. Ha a hibát az apa továbbítja, akkor a hármasok száma nagyobb, mint az anyától való átvitel esetén (az imprint jelenség miatt). 2 típusú betegséget okozó allélt írnak le:
• teljes behatolással (ezek mindig társulnak a betegséghez), ami megjelenik > 40 CAG hármas;
• alacsony behatolással jellemezve 36-39 CAG ismétlés, ami a Huntington-kór megnövekedett kockázatát okozza, de nem minden hordozó válik tünetessé.
A betegséget okozó allélokkal együtt léteznek köztes allélok is ("mutálható" allélok), 27-35 CAG ismétléssel, amelyek nem társulnak a betegség tüneteinek kialakulásának kockázatával, de amelyek az ismétlődő CAG sorozat instabilitása miatt nemzedékről nemzedékre, hajlamosak a terjeszkedésre, és fokozott kockázatot idézhetnek elő egy betegséget okozó allélú gyermek születése szempontjából. Ezeket a gyermekeket "de novo" mutációnak tekintik6 .
A HTT gén egy fehérje - hunttint kódol; a génnek számos olyan polimorfizmusa van, amelyek változatos számú glutamin-maradékhoz vezetnek (aminosav, amelyet a CAG triplett kódol), amelyek monoton módon illeszkednek a fehérje aminoterminális végéhez. Másrészt a mutáns gén nagyobb számú glutamin-maradékot eredményez a normál génhez képest (lásd a 18.1.5.4. Ábrát), ennek oka valószínűleg a funkciómutáció erősödése; ez azt jelenti, hogy a szintetizált fehérje funkcionális, de "toxikus" hatásokkal is jár a strukturális és biokémiai tulajdonságok megváltozása miatt 1; 6. A legfrissebb adatok azt sugallják, hogy a hosszúkás poliglutamikus láncba való beavatkozás a CBP (CREB-kötő fehérje) transzkripcióval, amely az érett idegsejtekben a túlélési jelek alapvető közvetítője, genetikailag megszerzett "funkció" lenne. .
Ábra. 18.1.5.4 Normál és mutáns HTT gén a társított fehérjékkel együtt
(A publikációkból módosítva:.nigms.nih.govfindingssept08imageshunt_gene_big.jpg)
A Huntingtin poszttranszlációs változásokon megy keresztül, amelyek abból állnak, hogy hasítanak a poliglutamikus lánc mögött (kaszpázoknak nevezett enzimek által); a kapott aminoterminális fragmens citotoxikus és 2; 3 apoptózist okoz. Az összesített hunttin-aminotermális fragmensek intracelluláris felhalmozódása (intraneuronális zárványok) Huntington kóréjának egyik neuropatológiai jellemzője 6 .
A genetikai vizsgálatokra vonatkozó ajánlások
-Huntington kóréjának diagnosztizálása az érintett egyéneknél;
-magas kockázatú tünetmentes felnőttek prediktív vizsgálata (50%); nagyon gondos tanácsadást igényel a vizsgálat előtti és utáni időszakban, mivel a betegségnek nincs specifikus kezelési módja;
-prenatális diagnózis magas kockázatú terhes nőknél (50%); amniocentézissel nyert magzati sejtekből kivont DNS elemzésével végezzük, amelyet általában a vemhesség körülbelül 15-18 hete, vagy a chorion villusok biopsziájával végezzük, körülbelül 10-12 vemhességi héten; a diagnózist a családban molekuláris technikákkal kell megerősíteni, a prenatális vizsgálat előtt 5 .
Begyűjtött minta - vér jön 4 .
Betakarítási konténer - antikoagulánsként EDTA-t tartalmazó vakutainer 4 .
Betakarított mennyiség - 5 ml vér 4 .
Az elutasítás okai megpróbálni - heparin antikoagulánsként történő alkalmazása; koagulált vagy hemolizált minták 4 .
Tesztstabilitás - 7 nap 2-8ºC-on 4 .
Módszer - láncpolimerizációs reakció (PCR) az alleelek célzott detektálására, legfeljebb 115 CAG 4 ismétléssel .
Az eredmények jelentése és értelmezése
A HTT 4 génben található CAG ismétlések számát közöljük .
A ≥ 36 CAG ismétlődést tartalmazó alléleket betegség okozónak tekintik, és a betegség kialakulásának kockázatát hordozzák magukban. Míg a 36-39 CAG ismétléssel rendelkező allélek nem teljes penetranciával rendelkeznek, addig a ≥ 40 CAG ismétléssel rendelkezők mindig társulnak a betegség kialakulásával.
Jelentős fordított összefüggés van a CAG ismétlések száma és a Huntington-kór kora megjelenési kora között:
• a felnőttkorban kezdődő embereknél a CAG ismétlődéseinek száma általában 36 és 55 között van;
• a fiatalkori betegségben szenvedőknél a CAG ismétlési száma ≥60.
A CAG ismétlések számától függően a megjelenés koráról további információk találhatók a weboldalon: www.cmmt.ubc.ca.
Jelentős negatív összefüggés van a CAG ismétlődési szegmens nagysága és a kezdet változékonysága között abban az értelemben, hogy a kisebb CAG méretek és a betegség késői megjelenése közötti összefüggés kevésbé pontos. Átlagosan a CAG ismétlések nagysága felelős a megjelenés korának változékonyságának akár 70% -áért, míg más örökletes tényezők a maradék változékonyság 10-20% -áért felelősek.
A motoros, kognitív és funkcionális károsodás aránya közvetlenül korrelál a CAG ismétlések méretével. Úgy tűnik azonban, hogy a viselkedési rendellenességek progressziója nem függ össze a CAG ismétlések számával.
A teljesen behatoló HTT-allélok homozigótáinak a betegség kezdete hasonló életkorú, mint a heterozigótáké, de a betegség progressziójának gyorsított üteme lehet.
A Huntington-kór autoszomális domináns betegség; emiatt az érintett személy gyermekeinek 50% -os kockázata van a betegséget okozó allél öröklésének. Ha az érintett személy homozigóta a CAG-ismétlések kiterjesztésére, akkor minden gyermek örökli a betegséget okozó allélt.
Az érintett testvéreiben a betegség kialakulásának kockázata a szülők genetikai állapotától függ:
• ha egy szülő érintett, vagy olyan HTT allél van, amelynek CAG értéke ≥ 40, a kockázat 50%;
• ha az apának köztes HTT allélja van, akkor a betegséget okozó allél öröklődésének kockázata legfeljebb 5%; minél nagyobb a CAG ismétlési szegmens, annál hajlamosabb a terjeszkedésre; egyetlen anyai köztes allél terjeszkedésének esetét sem írták le; a kibővített köztes allélokat elsősorban az előrehaladott apai korú férfiak közvetítik;
• egy testvér, aki alacsony behatolással örökli a HTT allélt, előfordulhat, hogy nem kapja meg a betegséget.
Bár a Huntington-kór által érintett legtöbb embernek van egy szülője, vannak olyan helyzetek, amelyekben a család története negatív:
• az állapotot a családtagoknál nem diagnosztizálták helyesen;
• a mutáns alléllel rendelkező személy idő előtti halála a tünetek megjelenése előtt;
• egy köztes allél vagy egy alacsony behatolású allél jelenléte egy tünetmentes szülőben;
• a betegség késői megjelenése az érintett szülőnél.
A nyilvánvalóan de novo mutációval rendelkező személy szülei számára genetikai vizsgálat ajánlott 6 .
Határértékek és interferenciák
Nagyon ritka esetekben tünetmentes idős emberek mutathatók ki, akiknek 36-39 CAG ismétlődése van.
Noha fontos összefüggés van a betegség kialakulásának életkora és a kiújulás nagysága között, a tünetmentes egyének CAG genetikai vizsgálata nem mindig nyújt megfelelő becslést a megjelenés korára, a tünetek súlyosságára vagy az állapot progressziójának sebességére. .
1. Francis O Walker. Huntington-kór. In The Lancet, 2007; 369: 218-28.
2. Fredy J Revilla, Jaime Grutzendler, Travis R Larsh. Huntington-kór. www.emedicine.medscape.com, Ref típus: Internetes kommunikáció.
3. HTT gén. Génkártyák. www.genecards.org. Referencia típusa: Internetes kommunikáció.
4. Synevo Laboratórium. Az alkalmazott munkatechnika konkrét hivatkozásai 2010. Ref.