Monoklonális antitestek tisztítása SpringerLink
Összegzés
A tumor ascitesbe került asciteset hordozó egér szérumából származó immunglobulin szimulálhatja az mAb reaktivitását olyan antigénnel, amely ellen az egeret korábban természetes úton immunizálták. A gyakorlatban ez különös jelentőséggel bír, ha az mAb alacsony koncentrációban van jelen az ascites folyadékban, vagy csak alacsony az affinitása az antigénjéhez, ezért nem alkalmazható nagy hígításokban. Ilyen esetekben kontrollként használható az egér szérummintája, amelyet a hibridóma sejtek injektálása előtt kaptak.
Az mAb elégtelen tisztaságú készítményének közvetlen jelölése (például biotinnal, peroxidázzal vagy fluorokrómmal) más fehérjéket (pl. Inzulin vagy transzferrin stb.) Is jelölhet. Ha most az antitestet alkalmazzák, például a monoklonális antitest által felismert antigén expressziójának vizsgálatára, akkor azokat a sejteket is meg lehet jelölni, amelyek rendelkeznek szennyező fehérjéhez (pl. Transzferrin receptorok).
Különleges nehézségek merülnek fel az mAb-k biológiai vizsgálati rendszerekben történő alkalmazásakor. Az antitest várható aktivitása az immunmediátorok szennyezésével megváltoztatható. Mivel ezek közül az immunmediátorok közül sok még nincs megfelelően meghatározva, nem zárható ki, hogy még az antitest gondos tisztítása után is jelen vannak a készítményben. Ilyen esetekben kontrollantitestként szolgálhat ugyanazon immunglobulin alosztályba tartozó antitest, amely nem reagál a szóban forgó antigénnel, de ugyanabból a fúzióból származik, és ugyanolyan körülmények között készült és tisztult.