Philipp Pierre Markwerth - PDF ingyenes letöltés
A düsseldorfi Heinrich Heine Egyetem Virológiai Intézetének igazgatója: egyetemi tanár. Dr. med. Jörg Timm A JC és BK humán polivírusok fertőzéseinek szerológiai és molekuláris kimutatása progresszív multifokális leukoencephalopathia (PML) disszertációban az orvostudományi doktor fokozat megszerzésére a düsseldorfi Heinrich Heine Egyetem Orvostudományi Karán, Philipp Pierre Markwerth 2018
Nyitott disszertációként a düsseldorfi Heinrich Heine Egyetem Orvostudományi Karának jóváhagyásával. aláírta: Dean: egyetemi-prof. Dr. med. Nikolaj Klöcker Első véleményező: Prof. Dr. med. Ortwin Adams második bíráló: PD Dr. med. Philipp Albrecht
A munka egyes részei megjelentek: A CSF JCV antitestindex a natalizumabbal társult PML diagnosztizálására. Warnke C, von Geldern G, Markwerth P, Dehmel T, Hoepner R, Gold R, Pawlita M, Kümpfel T, Mäurer M, Stangel M, Wegner F, Hohlfeld R, Straeten V, Limmroth V, Weber T, Hermsen D, Kleinschnitz C, Hartung HP, Wattjes MP, Svenningson A, E őrnagy, Olsson T, Kieseier BC, Adams O. Annals of neurology 2014, dec. 76 (6): 792-801.
Rövidítések listája 5HT2A 5-hidroxi-triptamin receptor 2A AI JCV AKT ANOVA ATP AU BKV BSA CCD CSF/szérum antitest hányados-JCV protein kináz B Varianciaelemzés Adenozin 5 trifoszfát tetszőleges egység BK vírus Szarvasmarha szérum albumin töltéshez kapcsolt devicena D Mérési idő 1 DMSO Desoxyr dezoxiribonukleinsav DX1 mérési idő 2 DX2 mérési idő 3 E. coli Escherichia coli EDTA etiléndiamin-tetraecetsav EIA enzimes immunoszorbens vizsgálattal ELISA enzyme linked immunosorbent assay FAM 6-karboxi-fluoreszcein HAART nagymértékben aktív antiretrovirális G Ig-IgM-IgM-immunopropyl β-immunglobulin kontroll IgM-IgM-IgM-immunopropyl β-immun-kontroll IgM-IgM-immunopropyl β-immunglobulin G Ig-immunglobulin G-β-immun-kontroll IgM-immunopropyl kontroll IgM-IgM-immunopropyl terápia D-tiogalaktopiranozid JCV JC vírus kbp kilobázis párok KI konfidencia intervallum LB lizogénleves LPOS alacsony pozitív kontroll MAPK mitogén-aktivált protein kináz mirna mikro RNS ml milliliter MPOS tápközeg kontroll mrna messenger RNS MRI mágneses rezonancia képalkotás MRZ kanyaró-rubeola-zoster reakció Az MS multiplex szklerózis átlagértékek NAT natalizumab II
NCCR nem kódoló kontroll régió NEM N-etilmaleimid NF-1/X magfaktor-1 osztály X NLS mag lokalizációs jel nm nanométer OD X optikai sűrűség x nm nm-nél PBS foszfátpufferolt sóoldat oldott antigén PML progresszív multifokális leukoencephalopathia PP2A fehérje foszfatáz 2A prb retinoblastoma fogékonyság qpcr kvantitatív polimeráz láncreakció RNS ribonukleinsav SAPK stressz-aktivált protein kináz SEM standard hiba S-fázis szintézis fázis SMPB szukcinimidil-4- [p-aleimidofenil] -butirát SV-40 majomvírus 40 TAMRA tetrametil-rodamin T-antigén tumorantigén U egységek VP-1 vírus fehérje 1 2 VP-3 vírus fehérje 3 CNS központi idegrendszer III
Tartalom 1 Bevezetés 1 1.1 Poliomavírusok. 1 1.1.1 Besorolás. 1 1.1.2 Morfológia. 2 1.2 JC vírus. 4 1.2.1 Előzmények. 4 1.2.2 Morfológia és vírusfehérjék. 4 1.2.3 Genom. 6 1.2.4 Replikációs ciklus. 6 1.2.5 Típusok és altípusok. 8 1.2.6 Patogenezis. 8 1.2.7 Epidemiológia. 10 1.2.8 Terápia. 10 1.3 Szklerózis multiplex. 11 1.4 Natalizumab. 12 1.5. Kiadás. 13 2 Anyag és módszerek 14 2.1 A beteg anyaga. 14 2.2 Rekombináns JCV-BKV-IgG ELISA. 15 2.2.1 Alapelv. 15 2.2.2 Rekombináns fehérje VP-1 megszerzése. 16 2.2.3 Anti-JCV/Anti-BKV IgG ELISA. 18 2.2.4 Rekombináns JCV IgG alosztály ELISA. 21 2.2.5 Affinitásmérés rekombináns JCV-IgG ELISA alkalmazásával. 22 2.3 MRZ reakció/Reiber index. 24 2.4 Bradford fehérje meghatározása. 25 2.5 Kvantitatív valós idejű PCR. 26 3 Értékelés 28 3.1 ELISA. 28 3.1.1 Anti-JCV IgG. 28 3.1.2 Anti-BKV IgG. 31 3.1.3 CSF/szérum hányados. 33 3.1.4 Anti-JCV IgG alosztályok. 35 3.1.5 Anti-JCV és anti-BKV IgM. 36 3.1.6 Anti-JCV IgG affinitás. 40 3.2 PCR eredmények. 41 3.2.1 Az összehasonlító csoportok eredményei. 41 3.2.2 JCV DNS. 43 3.2.3 BKV-DNS. 44 IV
Tartalomjegyzék 4 Vita 45 4.1 JCV IgG. 45 4.2 BKV IgG. 47 4.3 CSF/szérum hányados. 48 4.4 JCV IgG alosztályok. 49 4,5 JCV IgM. 50 4,6 BKV IgM. 51 4.7 Anti-JCV IgG affinitás. 52 4,8 PCR-JCV. 53 4.9 PCR-BKV. 54 5 Következtetés 55 6 Irodalomjegyzék 56 V
1 Bevezetés 1.1. Ábra: A Polyomaviridae család osztályozása; ábra a Nemzetközi Vírusrendszertani Bizottság Polyomaviridae vizsgálati csoportjából módosítva. 3
1 Bevezetés A szklerózis multiplex (MS) a humanizált anti-alfa-4-integrin antitest natalizumabbal (Tysabri) együtt a PML súlyos mellékhatásaként is előfordulhat. 12,22,50 1.4. Ábra: PML-ben szenvedő beteg MRI képei. A hiperintenzív medulláris gócok a jobb agyfélteke temporo-occipitalisak (piros nyilak). Az illusztrációt kedvesen közölte Priv.-Doz. Dr. med. Michael Mull, Aacheni Egyetemi Klinika Diagnosztikai és Intervenciós Neuroradiológiai Klinika. 9.