Tehát készítsen foszfáttal pufferolt sóoldatot
A PBS vagy foszfáttal pufferolt sóoldat olyan pufferoldat, amely különösen értékes, mivel utánozza az emberi test folyadékainak ionkoncentrációját, ozmolaritását és pH-ját. Más szavakkal, izotóniás az emberi oldatokkal szemben, ezért biológiai, orvosi vagy biokémiai kutatásokban kevésbé valószínű, hogy sejtkárosodást, toxicitást vagy nemkívánatos kicsapódást okoz.
PBS kémiai összetétele
A PBS megoldás elkészítéséhez számos recept létezik. Az esszenciális oldat vizet, nátrium-hidrogén-foszfátot és nátrium-kloridot tartalmaz. Egyes készítmények kálium-kloridot és kálium-dihidrogén-foszfátot tartalmaznak. Az EDTA hozzáadható a sejtek előkészítéséhez is, hogy megakadályozza az összecsomósodást.
A foszfáttal pufferolt sóoldat nem ideális kétoldalas kationokat (Fe 2+, Zn 2+) tartalmazó oldatokban történő felhasználásra, mivel csapadék előfordulhat. Egyes PBS-oldatok azonban kalciumot vagy magnéziumot tartalmaznak. Ne feledje, hogy a foszfát gátolhatja az enzimatikus reakciókat. Különösen ügyeljen erre a lehetséges hátrányra, amikor a DNS-sel dolgozik. Bár a PBS kiváló fiziológiai tudományban, vegye figyelembe, hogy a PBS-sel pufferolt mintában lévő foszfát kicsapódhat, ha a mintát etanollal keverik.
Az 1X PBS tipikus kémiai összetétele 10 mM PO 4 3-, 137 mM NaCl és 2,7 mM KCl végső koncentrációval rendelkezik. Itt van a reagensek végső koncentrációja az oldatban:
| NaCl | 137 | 8.0 |
| KCl | 2.7 | 0.2 |
| Na 2 HPO 4 | 10. | 1.42 |
| KH 2 PO 4 | 1.8 | 0,24 |
Protokoll foszfáttal pufferolt sóoldat készítésére
Céljától függően 1X, 5X vagy 10X PBS-t készíthet. Sokan egyszerűen megveszik a PBS puffertablettákat, feloldják desztillált vízben, és szükség esetén sósavval vagy nátrium-hidroxiddal állítják be a pH-t. Könnyű azonban a semmiből elkészíteni a megoldást. Íme receptek 1X és 10X foszfáttal pufferolt sóoldathoz: